山东产部分品种大枣活性成分含量比较

张 采 李 佳 张永清

（山东中医药大学，山东 济南 250355）

大枣既是著名的水果，也是传统中药，药用历史已长达2000余年。具有补中益气、养血安神等功效，用于治疗中气不足、脾胃虚弱、体倦乏力、食少便溏、血虚萎黄、妇女脏躁等病症。现代研究证明，大枣含有多糖、黄酮类、皂苷类、三萜类、生物碱类、环磷酸腺苷等活性物质，具有增强免疫、抗氧化、抗肿瘤、抗衰老等药理作用。大枣原产我国，自古以来就被列为“五果”（桃、李、梅、杏、枣）之一。据统计，全球大枣种质资源的98%以上、总产量的近100%都集中在我国。山东作为我国大枣主产区之一，品种众多，著名的地方品种有金丝小枣、圆铃枣、大马牙、小马牙、短果长红、亚腰长红等[1]。不同品种大枣的形状、大小、颜色、甜度等具有明显差异，但其药用价值有无差异至今报道甚少。为了评价不同品种大枣的药用质量，我们分析比较了山东产8个品种的总黄酮、齐墩果酸、熊果酸等活性成分含量。

1 材料与方法

1.1 大枣样品

2009年9～10月份，采摘各地不同品种大枣近成熟果实，晒干，去核粉碎前50℃烘干。各品种大枣及采集地点见表1。

表1 各品种大枣及采集地点

1.2 仪器与试剂

紫外－可见分光光度计；电子分析天平；超声震荡仪。芦丁（购自山东省药品检验所）；齐墩果酸（购自四川省维克奇科技有限公司）；熊果酸（购自四川省维克奇科技有限公司）。95%乙醇；亚硝酸钠；三氯化铝；氢氧化钠；甲醇；香草醛；冰醋酸；高氯酸；乙酸乙酯。均为分析纯。

1.3 方法

采用分光光度法[2-4]。

1.3.1 总黄酮含量测定

1.3.1.1 标准曲线制作

精密称取干燥至恒重的芦丁对照品9.3mg，置25mL容量瓶中，加60%乙醇溶解，定容至刻度，摇匀，既得对照品溶液。精密吸取对照品溶液0mL、0.3mL、0.5mL、0.8mL、1.0mL、1.3mL、1.5mL、1.8mL、2.0mL，分别置10mL容量瓶中，加60%乙醇至5.0mL，精密加入5%亚硝酸钠溶液0.3mL，摇匀，放置6min，再精密加入10%三氯化铝溶液0.3mL，摇匀，放置6min，再加入4%氢氧化钠溶液4.0mL，放置10min，最后加60%乙醇至刻度，摇匀，放置10min，以试剂空白做参比，在510nm处测吸光度值（A），以吸光度为纵坐标，芦丁对照品溶液浓度（C）为横坐标，绘制标准曲线，得出回归方程：A＝12.6C＋0.0144（R＝0.9997)。

1.3.1.2 样品测定

准确称取样品1.0000g，置于100ml锥形瓶中，加入60%乙醇30mL，浸泡24h，超声处理1h，过滤，洗涤，滤液置50ml容量瓶中，60%乙醇定容，得样品提取液。按照标准曲线制备方法操作，测定吸光度，带入下列公式，计算总黄酮的含量。

总黄酮含量（mg/g）＝（A－0.0144）/12.6M

（M为样品质量，单位g）

1.3.2 齐墩果酸含量测定

1.3.2.1 标准曲线制作

精密称取齐墩果酸对照品5mg，置于25mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，即得200μg/mL齐墩果酸对照品溶液。分别吸取上述溶液0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL、1.2mL置于试管中，挥去溶剂后，准确加入5%香草醛冰醋酸溶液0.4mL，高氯酸1.6mL，混匀，置70℃恒温水浴中加热5min，冷却至室温，并转移至10ml容量瓶中，加乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，在560nm处测定吸光度（A）。以吸光度为纵坐标，齐墩果酸对照品溶液浓度（C）为横坐标，绘制标准曲线，得出回归方程：A＝24.393C＋0.0177（R＝0.9991）。

1.3.2.2 样品测定

精密称取样品粉末1g，置于三角瓶中，加入95%甲醇10mL，在常温下超声提取30min，过滤，滤渣再提取1次，合并2次滤液，以95%甲醇定容至25mL。取1mL滤液，用95%甲醇来稀释到25mL，作供试品溶液，按照标准曲线制备方法操作，测定吸光度，带入下列公式，计算齐墩果酸的含量。

齐墩果酸含量（mg/g）＝（A－0.0177）（25×25）/24.393M（M为样品质量，单位：g）

1.3.3 熊果酸含量测定

1.3.3.1 标准曲线制作

精密称取熊果酸对照品6mg，置于50ml容量瓶中，加无水乙醇溶解，并定容至50mL，配成0.12mg/mL对照品溶液。分别取对照品溶液0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL、1.2mL，置于试管中，水浴挥干溶剂，分别加5%香草醛-冰醋酸溶液0.5mL，高氯酸0.8mL，置于60℃水浴中12min，冰浴冷却2min，加冰醋酸5ml，摇匀，在显色5～60min内于548nm处测定吸光度，以熊果酸毫克数（N）为横坐标，吸光度（A)为纵坐标，绘制标准曲线，得出回归方程：A＝0.8723N＋0.0282（R＝0.99965）。

1.3.3.2 样品测定

精密称取样品粉末1g，置于三角瓶中，加入95%甲醇10mL，在常温下超声提取30min，过滤，滤渣再提取1次，合并2次滤液，用95%甲醇定容至25mL。取1mL滤液，用95%甲醇来稀释到25mL，作供试品溶液，按照标准曲线制备方法操作，测定吸光度，带入下列公式，计算熊果酸的含量。

熊果酸含量（mg/g）＝（A－0.0282）×25/M

（M为样品质量，单位：g）

2 结果与分析

经测定，山东产部分品种大枣中的总黄酮、齐墩果酸与熊果酸含量如表2所示。

表2 山东产部分品种大枣中的活性成分含量（mg/g）

表2结果显示，不同品种大枣中的总黄酮、齐墩果酸及熊果酸含量差异明显。总黄酮含量以躺枣含量最高，达1.469mg/g，最低者是仲秋红，为0.373mg/g，最高者是最低者的3.94倍；齐墩果酸含量以金丝新四最高，达10.754mg/g，最低者是磨盘枣，为6.883mg/g，最高者是最低者的1.56倍；熊果酸含量以磨盘枣最高，达14.409mg/g，最低者是长枣，为7.081mg/g，最高者是最低者的2.03倍；三类活性成分总量以冬枣最高，达23.947mg/g，最低者是长枣，为17.671mg/g，最高者是最低者的1.36倍。

3 讨论与小结

大枣所以能够药用，是因为其中含有能够治疗疾病的活性成分。现代研究表明，黄酮类化合物可抗菌、消炎、抗突变、降压、清热解毒、镇静、利尿，在抗氧化、抗癌、防癌、抑制脂肪酶等方面也有显著效果；齐墩果酸、熊果酸属于三萜酸类，具有抑菌、保肝、降脂、升白细胞、增强肌体免疫等重要生理功能[6-9]。因此，大枣中总黄酮、齐墩果酸、熊果酸的含量高低，对其临床治疗效果会有显著影响，可作为大枣药材质量控制的指标。本试验结果表明，不同品种大枣总黄酮、齐墩果酸、熊果酸含量差异显著，说明其药材质量明显不同。以现有试验结果进行判断，在山东产8个品种大枣中，以冬枣、圆枣的药用价值较高。因此，药用大枣的品种问题应予以重视，但目前该领域的研究工作甚少，必须予以加强。

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