P57KIP2在子宫内膜癌及子宫内膜不同病变组织中表达的意义

肖庆邦，罗祖强，周正平

(遵义医学院附属医院 病理科，贵州 遵义 563099)

·临床医学研究·

P57KIP2在子宫内膜癌及子宫内膜不同病变组织中表达的意义

肖庆邦，罗祖强，周正平

(遵义医学院附属医院 病理科，贵州 遵义 563099)

目的通过检测p57KIP2蛋白在子宫内膜癌及子宫内膜不同病变组织中的表达情况，探讨p57KIP2在子宫内膜癌发生、发展中的作用。方法选取100例子宫内膜样腺癌(endometrioid adenocarcinoma，EA)，以及子宫内膜增生期、分泌期、单纯性增生、复杂性增生组织各10例，子宫内膜上皮内瘤变(Endometrial intraepithelial neoplasia,EIN) 20例，用免疫组织化学Elivision法检测这些病变组织中p57KIP2蛋白的表达情况。结果p57KIP2蛋白在EA、子宫内膜增生期、分泌期、单纯性增生、复杂性增生、EIN组织中的阳性表达率分别为26.00%、0.00%、60.00%、0.00%、10.00%、40.00%。p57KIP2蛋白在EA组织中的阳性表达与在分泌期组织中的阳性表达比较，在分泌期组织中的阳性表达与在复杂性增生中的阳性表达比较，差异均有显著性(P<0.05)；在EA中，p57KIP2蛋白的阳性表达与组织学分级有关(P<0.05)，与年龄大小、盆腔淋巴结有无转移等无关(P>0.05)。结论p57KIP2参与了子宫内膜癌的发生发展过程。

子宫内膜癌；子宫内膜样腺癌，免疫组织化学；p57KIP2

子宫内膜癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤之一，在发达国家，其发病率已高居女性生殖系统恶性肿瘤之首[1]，其组织学类型以子宫内膜样腺癌(endometrioid adenocarcinoma，EA)最为常见，其确切的癌变机制至今仍无定论。本实验应用免疫组织化学Elivision法，通过检测 p57KIP2蛋白在子宫内膜样腺癌及子宫内膜不同病变组织中的表达情况，探讨其在子宫内膜癌发生发展过程中的作用。

1 材料与方法

1.1 标本来源 收集遵义医学院附属医院病理科2006年1月至2010年12月确诊的EA标本100例(I级38例，II级41例，III级21例)，均经10%中性福尔马林固定，石蜡包埋，HE染色重新阅片进一步明确诊断。检出盆腔淋巴结肿大46例，其中伴盆腔淋巴结转移16例；患者年龄：32～76岁，中位年龄54岁(≤50岁26例，>50岁74例)。患者术前均未作放、化疗等治疗。随机选取子宫内膜增生期、分泌期、单纯性增生、复杂性增生组织各10例，子宫内膜上皮内瘤变(Endometrial intraepithelial neoplasia,EIN) 20例作为试验对照组。

1.2 试剂 鼠抗人 p57KIP2单克隆抗体(工作浓度为1∶75)、EliVision试剂盒及其他配套试剂均购自福州迈新生物技术开发有限公司。

1.3 方法 将存档蜡块4 μm厚连续切片，行HE染色和EliVision免疫组化染色。免疫组化实验过程严格按照说明书操作步骤进行，DAB显色，苏木精复染。用迈新生物技术有限公司提供的阳性切片作阳性对照，以PBS代替一抗作空白对照。组织抗原采用高压修复处理。

1.4 结果判断 p57KIP2蛋白阳性信号呈棕黄色或棕褐色，主要定位于细胞核。将阳性细胞百分比分成5级：无阳性细胞为0分，阳性细胞≤25%为1分，26%～50%为2分，51%～75%为3分，>75%为4分。着色强度：无色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。着色强度积分与数量积分相加：0分为(-)，2～3分为(±)，4～5分为(+)，6～7分为(++)，其中(+)和(++)判为阳性。

1.5 统计学处理 所得数据采用SPSS13.0统计软件，应用行×列表2检验、配对四格表2检验及Fisher确切概率法进行统计学处理。如P≤0.05，结果有统计学意义。

2 结果

2.1 p57KIP2蛋白在子宫内膜癌及子宫内膜不同病变组织中的表达情况 在子宫内膜EA、增生期、分泌期、单纯性增生、复杂性增生及EIN中，p57KIP2蛋白阳性表达率分别为26.00%(26/100)、0(0/10)、60.00% (6/10)、0(0/10)、10.00%(0/10)、40.00%(8/20)。统计分析表明，p57KIP2蛋白在EA组织中的阳性表达与在分泌期组织中的阳性表达比较，在分泌期组织中的阳性表达与在复杂性增生中的阳性表达比较，差异均有显著性(P<0.05)；p57KIP2蛋白在EA组织中的阳性表达与在不同增生性病变中的阳性表达比较，p57KIP2蛋白在分泌期组织的阳性表达与其余增生性病变的阳性表达比较，差异均无显著性(P>0.05)(见表1及图1～2)。

表1 p57KIP2蛋白在子宫内膜癌及子宫内膜不同病变组织中的表达情况

注：◆p57KIP2蛋白在EA与分泌期表达比较，◆◆在分泌期与复杂性增生表达比较，P<0.05。

图1 分泌期子宫内膜，上皮细胞表达 p57KIP2,EliVision法×200图2 EA，肿瘤细胞表达 p57KIP2,EliVision法×200

2.2 p57KIP2在EA组织中阳性表达与临床病理特征的关系 在EA中，p57KIP2蛋白在组织学Ⅰ级与Ⅲ级之间的阳性表达比较，差异有统计学意义(P<0.05)；但与患者年龄大小、盆腔淋巴结有无转移无关(P>0.05)(见表2)。

表2 p57KIP2在EA组织中阳性表达与临床病理特征的关系

注：◆p57KIP2蛋白在组织学Ⅰ级与Ⅲ级之间表达比较，P<0.05。

3 讨论

p57KIP2是1995年由Masuoka等[2]用双杂交系统克隆出来，是最迟被发现的CKIs家族成员，为细胞周期负性调控因子，是一种候选的抑癌基因。Guo等[3]通过研究 p57KIP2在肝癌组织及人肝癌细胞株中的表达情况，发现 p57KIP2mRNA和蛋白在肝癌组织中的表达显著低于邻近非癌组织，其表达下调与cyclin D1的高表达相关，且与肿瘤大小、TNM分期、肝外转移及较低的生存时间有关。周正平等[4，5]通过检测乳腺癌、宫颈癌组织中 p57KIP2蛋白的表达情况，发现 p57KIP2蛋白在乳腺癌、宫颈癌组织中的表达均低于良性病变，p57KIP2蛋白低表达可能是乳腺或宫颈组织恶性转变、肿瘤组织发生淋巴结转移的重要生物学标志。

本研究结果显示，p57KIP2蛋白在子宫内膜分泌期组织中的阳性表达最高，在EA组织中的阳性表达低于在分泌期、EIN组织中的阳性表达而高于在增生期、单纯性增生组织中的不表达、复杂性增生组织中的阳性表达，但仅在EA组织与分泌期、分泌期与复杂性增生组织中的阳性表达之间比较，差异有统计学意义(P<0.05)；在其余各组之间两两比较，由于观察结果出现不表达(0.00%)，差异无统计学意义。在EA中，p57KIP2蛋白随着组织学分级的增加，阳性表达下降,但仅在组织学Ⅰ级与Ⅲ级之间的阳性表达比较,差异有显著性(P<0.05)；其阳性表达与年龄大小、淋巴结有无转移无关(P>0.05)。提示 p57KIP2参与了子宫内膜癌的发生发展过程。

在分泌期子宫内膜组织中，p57KIP2蛋白阳性表达较高，可能因上皮细胞在此期受孕激素作用，产生分泌现象有关，提示 p57KIP2在子宫内膜组织中发挥负向调控周期进程的作用可能与孕激素的存在有关。在子宫内膜增生期、单纯性增生、复杂性增生组织中，上皮细胞受到雌激素的作用发生增殖，p57KIP2蛋白不表达或低表达。在EIN、EA组织中，p57KIP2蛋白的阳性表达低于在分泌期内膜组织中的表达，提示可能随着子宫内膜由分泌状态转入各种增生性状态，上皮细胞由受孕激素作用为主逐渐转为以雌激素作用为主，p57KIP2蛋白表达下调甚至不表达，丧失其负向调节细胞增生的能力，使子宫内膜上皮细胞出现增生、异常增生，甚至发生恶性转变；关于p57KIP2蛋白在EIN、EA组织中的阳性表达高于良性增生性病变组织中的阳性表达，有待进一步研究。

[1] Amant F,Moerman P,Neven P,et al.Endometrial ancer[J].Lancet,2005,366:491-505.

[2]Matsuoka S,Edwards MC,Bai C,et al.p57KIP2,a structurally distinct member of the p21CIP1 Cdk inhibitor family,is a candidate tumor suppressor gene[J].Genes Dev,1995,9:650-62.

[3]Guo H,Liu Y,Tian T,et al.Downregulation of p57 accelerates the growth and invasion of hepatocellular carcinoma[J].Carcinogengsis,2011,32:1897-904.

[4]周正平,王进京,苏俊,等.乳腺浸润性导管癌中 p57KIP2、cyclin D1和cyclin E的表达及意义[J].临床与实验病理学杂志,2005,21:282-285.

[5]周正平,肖庆邦,冉丰丰,等.p57KIP2、cyclin D1和cyclin E在宫颈鳞癌中的表达及意义[J].肿瘤防治研究,2007,34:511-513.

Expressionandsignificanceofp57KIP2inendometrialcarcinomaandendometrialdifferentlesions

Xiaoqingbang,Luozuqiang,Zhouzhengping

(Department of Pathology,the Affiliated Hospital of Zunyi Medical College,Guizhou Zunyi 563099,China)

ObjectiveTo investigate the expressions of p57KIP2protein in endometrial carcinoma and endometrial different lesions and further explore the role of p57KIP2in the occurrence and development of endometrial carcinoma.MethodsThe expressions of p57KIP2protein in 100 cases of endometrial adenocarcinoma (EA),10 cases of endometrial proliferative phase,10 cases of secretory phase,10 cases of simple hyperplasia,10 cases of complex hyperplasia tissues and 20 cases of Endometrial intraepithelial neoplasia (EIN) were detected by immunohistochemical Elivision methods,respectively.ResultsThe positive expression rate of p57KIP2protein in EA,endometrial proliferative phase,secretory phase,simple hyperplasia,complex hyperplasia tissues and EIN were 26.00%,0.00%,60.00%,0.00%,10.00% and 40.00%,respectively.There was significant difference of p57KIP2protein positive expression between EA and endometrial secretory phase and between endometrial secretory phase and complex hyperplasia (P<0.05).In EA,there was correlation between the positive expression rate of p57KIP2protein and histological grade (P<0.05).However,the positive expression rate of p57KIP2protein was unrelated to age and lymph node metastasis (P>0.05).Conclusionp57KIP2participate in the occurrence and development of endometrial carcinoma.

Endometrial carcinoma; endometrioid adenocarcinoma; immunohistochemistry; p57KIP2

贵州省教育厅自然科学研究基金(NO:黔教科2010047)。

周正平，女，教授，硕士生导师，研究方向：肿瘤病理，E-mail:zhouzp66@163.com。

R737.33

A

1000-2715(2012)03-0206-03

[收稿 2012-04-12；修回 2012-05-13]

(编辑：谭秀荣)