黑顺片中胆巴残留量的测定△

周林，任玉珍，杜杰，张晓莉

（1.北京中医药大学中药学院，北京 100102；2.中国药材公司，北京 100195；3.四川江油中坝附子科技发展有限公司，四川 江油 621700）

黑顺片中胆巴残留量的测定△

周林1，2*，任玉珍2，杜杰2，张晓莉3

（1.北京中医药大学中药学院，北京 100102；2.中国药材公司，北京 100195；3.四川江油中坝附子科技发展有限公司，四川 江油 621700）

目的：测定黑顺片中胆巴的残留量，考察不同中药饮片企业生产的黑顺片中胆巴残留量差异，为附子质量控制提供科学依据。方法：采用Na2EDTA滴定法测定。结果：不同中药饮片生产企业的黑顺片中胆巴残留量差异显著，其中最高为10.36%，最低为4.38%。结论：所建立的测定方法操作简单，重复性好，结果准确可靠，可用于附子饮片中胆巴的限量控制。

黑顺片；滴定法；胆巴残留量；含量测定

附子为毛茛科植物乌头Aconitum carmichaeliiDebx.的子根的加工品，6月下旬至8月上旬采挖，除去母根、须根及泥沙，习称 “泥附子”，可以加工成黑顺片。《中国药典》2010年版［1］附子项下收载的黑顺片炮制工艺中需要浸入食用胆巴（主要成分含有Ca2＋和Mg2＋的化合物）［2］的水溶液中数日，此工艺最早见于明代 《景岳全书》［3］中 “土人腌以重盐”、“腌者大咸”。附子经胆巴腌制后，附子饮片中有胆巴残留，作为临床上配伍率较高的一味常用中药，胆巴残留量究竟多少，未见报道， 《中国药典》2010年版中也未对附子饮片中胆巴的残留量进行规定。我们在食品中钙离子相关检测方法的基础上进行了改进［4］，选用乙二胺四乙酸二钠络合滴定法测定了黑顺片中胆巴的残留量。

1 试药与仪器

Na2EDTA（北京化学试剂公司，分析纯，纯度≥99.0%，批号：T20090108），碳酸钙 （纯度99.99%以上，国药集团化学试剂北京有限公司）、氢氧化钾、硝酸、钙羧酸指示剂（均为分析纯，北京化学试剂公司）。

氢氧化钾试液：配制参照 《中国药典》2010年版（一部）试液（附录ⅩⅤB）。

钙标准溶液：精密称取碳酸钙粉末0.6 g（纯度99.99%以上，105℃干燥2 h），加适量稀盐酸，使碳酸钙完全溶解，静置，待除去二氧化碳气泡，转移至500 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。

钙指示剂溶液：称取0.05 g钙羧酸指示剂于50 mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得。

50%硝酸溶液：准确量取250mL硝酸于500mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。

Na2EDTA溶液配制与标定：精密称取Na2EDTA粉末1 g于500 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。

SX3-4-10箱式电阻炉（武汉格莱莫检测设备有限公司）、DENVER电子分析天平（北京赛多利斯仪器系列有限公司）等。

2 含量测定

2.1 Na2 EDTA溶液的标定

精密移取钙标准溶液5 mL于三角瓶中，加水25 mL，摇匀，再加氢氧化钾试液10 mL，摇匀，调pH值在12以上，加指示剂5滴，用Na2EDTA溶液滴定，至指示剂由紫红色变蓝为止。

2.2 供试品溶液的制备

精密称取黑顺片粉末1 g（过四号筛）于坩埚中，置马弗炉中缓缓炽热，注意避免燃烧，至完全炭化时，逐渐升高温度至600～700℃，灰化6～7 h，使完全灰化并至恒重，取出冷却，加50%硝酸溶液分两次溶解（灰化不完全者，加硝酸溶液适量，于电热板上低温加热，反复多次直至灰化完全），每次5 mL，并转移至50 mL容量瓶中，用水洗涤坩埚，洗液合并于量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。

2.3 测定方法

精密移取供试品溶液及空白（水）5 mL于三角瓶中，加水25 mL，摇匀，再加氢氧化钾试液10 mL，摇匀，pH在12以上，加指示剂5滴，用Na2EDTA溶液滴定，至指示剂由紫红色变蓝为止。每毫升Na2EDTA溶液相当于约0.63 mg氯化钙。

2.4 精密度考察

精密移取钙标准溶液5 mL，按2.3项下的测定方法，平行6份，按上述方法测得消耗Na2EDTA溶液体积的RSD＝1.15%，表明本法精密度良好。

2.5 重复性考察

精密称取黑顺片粉末（批号061203）约1 g，平行6份，按2.2项下方法分别制成供试品，进行测定。结果样品中胆巴平均残留量为7.56%，RSD＝3.96%，表明该方法重复性良好。

2.6 稳定性考察

按2.2项下方法制备供试品溶液，每隔2 h测定1次，共测6次，结果表明胆巴在10 h内稳定，RSD＝1.36%，符合要求。

2.7 加样回收率试验

取已知胆巴含量的黑顺片粉末（批号061203）约0.5 g，精密称定，平行6份，分别加入一定量的CaCO3对照品。按2.2项下方法制成供试液，结果见表1，表明该方法的加样回收率符合要求。

表1 黑顺片中胆巴回收率试验（以CaCl2计）

2.8 样品测定

取不同企业10批黑顺片粉末各约1 g，精密称定重量，按2.2项下方法制备供试品溶液，测定黑顺片中胆巴的残留量。结果表明，不同中药饮片生产企业生产的黑顺片中胆巴的残留量差异较大，最高为10.36%，最低为4.38%，高低残留量之间相差近60%，结果见表2。

表2 不同厂家黑顺片中胆巴残留量测定结果

3 讨论

目前钙镁离子的主要检测方法有Na2EDTA滴定法［5］、电感耦合等离子体发射光谱仪测定法［6］、离子色谱法［7］、原子吸收光谱法［8］等。仪器分析方法测定，灵敏度高，选择性好，对钙镁离子测定更有优势，但这些方法都需要借助分析仪器，不适合我国大部分中药饮片生产企业的日常检测。本实验首次采用Na2EDTA滴定法测定中药饮片中辅料胆巴的残留量，干扰因素少，测定范围宽。

样品的提取方法有高氯酸-硝酸消解［8］、微波消解仪消解［6，8］、马弗炉灰化法［8］等，经过提取方法考察，发现采用高氯酸-硝酸消解，操作危险度高，样品消化不完全，提取液颜色过深，对实验结果有明显的干扰；本实验采用马弗炉灰化法，结果可靠，重复性好，平均加样回收率达到98.04%。

附子中胆巴含量高低引起社会对附子饮片质量产生怀疑，现行的 《中国药典》2010年版中未对附子饮片中胆巴的限量做出规定。企业生产附子产品中胆巴含量高低差异较大，导致市场销售附子饮片质量不稳定，直接影响到临床应用的安全性，为了保证附子饮片安全、有效、稳定、可控的目的，建议制定胆巴的限量标准，并纳入到相关的规范和标准中，以严格控制附子饮片的质量。笔者拟在下一步研究中搜集全国各企业的黑顺片样品，进行胆巴含量测定，为制定黑顺片相应的质量标准提供依据。

［1］国家药典委员会.中国药典［S］.一部.北京：中国医药科技出版社，2010：177-178.

［2］王诒纯.川产道地药材附子的品质研究［D］.成都：成都中医药大学，2011：32-33.

［3］李志庸.张景岳医学全书［M］.北京：中国中医药出版社，1999：1553.

［4］中华人民共和国卫生部.GB/T 5009.92-2003食品中钙的测定［S］.2003.

［5］杨兰泽，高静，等.血清钙EDTA Na2滴定法的改进［J］.中国卫生检验杂志，2002.12（3）：362.

［6］马强，李晓晶，丁海东，等.不同配伍条件下麻杏石甘汤中钙离子溶出规律［J］.中国实验方剂学杂志，2011，17（8）：67-70.

［7］卢中明，沈才洪，张宿义，等.离子色谱法测定白酒中钠、钾、镁、钙离子含量的研究［J］.酿酒科技，2009，（12）：35-37.

［8］陈晖，戴红霞，蔡洋，等.3种消解方法测定西北9种道地药材中微量元素含量比较［J］.甘肃中医学院学报，2009，26（6）：42-45.

Determ ination of Danba Residual Amount in Aconiti Lateralis Praeparata

ZHOU Lin1，2，REN Yu-zhen2，DU Jie2，ZHANG Xiao-li3
（1.Beijing University of Chinese Medicine，Beijing100102，China；2.China National Corp.of Traditional＆Herbal Medicine，Beijing100195，China；3.Sichuan Jiangyou Zhongba T＆SDevelopment Co.LTD of Aconite Lateralis Praeparata，Jiangyou621700，China）

Objective：To establish a method for the determination of Danba residual amount in Aconiti Lateralis Praeparata from different companies，and to provide a scientific evidence for quality evaluation of Aconiti Lateralis Praeparata.Methods：Na2EDTA titration method was applied for the quantitative analysis.Results：There were obvious differences in residual quantity of alum in Aconiti Lateralis Praeparata from different companies.Conclusion：Themethod is simple，reproducible and special，it can be used for the determination of Danba residual amount in Aconiti Lateralis Praeparata.

Aconiti Lateralis Praeparata；Titration method；Danba residual amount；Content determination

2011-07-20）

中医药行业科研专项——附子等中药炮制方法传承与规范化应用研究（201107008）

* ［通讯作者］周林，Tel：（010）61252955，Email：zhoulin415＠163.com