用uv测定倍生颗粒中人参皂苷Re的含量

孙 丽，许 彦

（南通市中医院，江苏 南通 226001）

倍生颗粒为我院复方制剂，由人参、炙黄芪、丹参等八味药组成，其功效为益气养阴、补肾通瘀、振元抗衰。为使其得到更广泛的应用，我们对其进行了质量标准研究，利用紫外-可见分光光度计测定主要成分人参皂苷Re的含量，为全面控制本品的质量提供了科学依据。

1 材料

1.1 仪器

7504紫外-可见分光光度计（上海分析仪器厂）。

1.2 试剂

人参皂苷Re对照品（批号0754-9809）购自中国药品生物制品检定所，人参对照药材经市药检所鉴定，倍生颗粒（自制，批号070326），其他试剂均为分析醇，水为蒸馏水。

2 含量测定［1］

2.1 对照品溶液的制备

精密称取对照品人参皂苷Re 2.0mg，置于2mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，即得对照品溶液（称定步骤：取2mL量瓶精密称定，其重量为14.6606g，取人参单体皂苷对照品人参皂苷Re使称定的总重量为14.6627g）。

2.2 供试品溶液的制备

取倍生颗粒72g，用甲醇回流提取5次（每次50mL，加热3h），合并甲醇提取液，常压蒸馏。蒸干后用30mL水将残渣溶解，再用水饱和正丁醇50mL萃取。重复操作6次，合并正丁醇萃取液，并用30mL蒸馏水洗涤。经蒸馏后将其残渣用甲醇溶解并转移到25mL量瓶中，再用甲醇稀释至刻度，即得供试品溶液。

2.3 标准曲线的绘制

量取对照品溶液 Re60、60、90、120、150、180、210μL分别放入试管中，再加入5%（W／V）香草醛冰醋酸溶液0.5mL和70%（V／V）硫酸水溶液5mL，置于60℃恒温水浴加热15min。然后水浴冷却10min，室温下再放置10min。随行空白。用UV-7504紫外-可见分光光度计于599nm波长处测定吸收度，结果见表1。并绘制标准曲线，见图1。其线性方程为y＝0.0158x+0.0627，相关系数R＝0.9979。

表1 人参皂苷Re含量与吸收度的关系

2.4 精密度试验

精密吸取对照品溶液180μL放入试管中，再加入5%（W／V）香草醛冰醋酸溶液0.5mL和70%（V／V）硫酸水溶液5mL，置于60℃恒温水浴加热15min，然后水浴冷却10min，室温下再放置10min，测定吸光度，重复测6次，结果RSD为0.28%。

2.5 稳定性试验

精密吸取对照品溶液180μL放入试管中，再加入5%（W／V）香草醛冰醋酸溶液0.5mL和70%（V／V）硫酸水溶液5mL，置于60℃恒温水浴加热15min。然后水浴冷却10min，室温下再放置10min，每隔30min测定吸光度，RSD为0.497%。

2.6 重复性试验

用微量进样器量取已知含量的样品溶液6份，分别加入5%（W／V）香草醛冰醋酸溶液0.5mL和70%（V／V）硫酸水溶液5mL，置于60℃恒温水浴加热15min，然后水浴冷却10min，室温下再放置10min，测定吸光度。RSD＝0.825%。

2.7 回收率试验

用微量进样器量取已知含量的样品溶液6份，分别精密加入一定量的对照品溶液，再分别加入5%（W／V）香草醛冰醋酸溶液0.5mL和70%（V／V）硫酸水溶液5mL，置于60℃恒温水浴加热15min，然后水浴冷却10min，室温下再放置10min，测定含量，分别计算加样回收率，结果见表2。

2.8 样品测定

用微量进样器分别取供试品溶液10μL，加入5%（W／V）香草醛冰醋酸溶液0.5mL和70%（V／V）硫酸水溶液5.00mL，置于60℃恒温水浴加热15min。然后水浴冷却10min，室温下再放置10min。随行空白。用UV-7504紫外-可见分光光度计于599nm波长处测定吸收度，通过标准曲线可计算出样品中人参皂苷Re的含量。测得吸光度为0.342，计算得样品中人参皂苷Re含量为17.677μg，则1g样品中含人参皂苷Re 0.368mg。

3 小结与讨论

根据“君臣佐使”的方剂学术语，在该制剂中，人参为“君”，其中以人参皂苷为其主要有效成分，故最终选择对人参皂苷进行测定。用人参皂苷Re对照品进行标准曲线绘制，其线性方程为y＝0.0158x+0.0627，r＝0.9979，该单体稳定性好，平均回收率99.63%，RSD为1.05%，可作为倍生颗粒的质量标准。该制剂为医院制剂，利用紫外分光光度法作为医院制剂的含量测定是一种有效快捷的测定方法，故我们选用该方法来完善倍生颗粒的质量标准。

［1］陈发奎.常用中草药有效含量测定［M］.北京：人民卫生出版社，1997：13.