锌对仔猪采食量、消化酶活性及抗氧化性能的影响研究

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(1.浙江欣欣饲料股份有限公司，浙江嘉兴 314005；2.浙江维丰生物科技有限公司)

仔猪断奶后受环境、营养、管理等因素的影响，容易发生“仔猪早期断奶综合征”，主要表现为食欲减退，采食量下降，进而导致生长受阻、疾病甚至死亡。

大量研究表明，高锌日粮可显著提高仔猪的采食量，缓解断奶应激，促进生长[1]。因此，锌作为一种有效的饲料添加剂已被广泛应用于养猪业中。

本试验通过采用硫酸锌溶液活体注射技术，研究锌对仔猪采食量、消化酶活性以及肝脏抗氧化性能的影响，为锌在养猪业中的广泛使用提供试验和理论依据。

1 材料与方法

1.1试验材料 ZnSO4·7H2O，纯度≥99%，购自Sigma公司。

1.2试验设计 随机选择平均体重9.57 kg的“杜×长×大”三元杂种健康断奶仔猪18头，按试验要求分为3组(各组仔猪体重差异不显著)，对照组、试验Ⅰ组和试验Ⅱ组。

试验Ⅰ组和试验Ⅱ组按照单位体重分别耳静脉注射锌浓度为2 mg/kg和4 mg/kg的硫酸锌溶液，对照组注射生理盐水，试验期为14 d。

1.3饲养管理 试验期间按常规饲养管理，免疫消毒程序一致，按猪场常规方法进行。基础日粮组成及营养水平见表1。

表1 基础饲粮配方及主要营养成分

1.4样品采集 试验结束后，供试猪全部屠宰取样测定，屠宰前禁食24 h，禁水30 min。

1.5生理生化指标测定

1.5.1锌含量测定 准确称取组织样品0.5～1.0 g,置电炉上低温炭化，待炭化至无烟时转移至马福炉中500℃干法灰化6 h，在干燥器中冷却后用6M盐酸溶解，用去离子双蒸水定容，在AA6501原子吸收仪上测定；血清中锌含量的测定采用直接稀释法，取血清1.0 mL加入10%硝酸10 mL，用去离子双蒸水稀释定容后在原子吸收仪上测定。

1.5.2消化酶活性测定 蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶测定按照试剂盒说明书操作，试剂盒购自南京某生物工程研究所。

1.5.3碱性磷酸酶和肝脏指标测定 碱性磷酸酶、Cu-Zn SOD、MDA和MT测定按相关试剂盒说明书操作，其中碱性磷酸酶、Cu-Zn SOD和MDA试剂盒购自南京某生物工程研究所，MT试剂盒购自美国某公司。

1.6数据处理与分析 试验数据采用SPSS 16.0软件中的单因素方差分析，采用LSD法进行多重比较，以P<0.05为差异性显著。

2 试验结果

2.1锌对仔猪采食量的影响 详见图1。

注：柱型图上方标有不同小写字母者表示差异显著(P<0.05)。

由图1可见，不同水平的锌处理对仔猪采食量有明显影响。与对照组相比，试验Ⅰ组仔猪的采食量提高36.67%(P<0.05)，试验Ⅱ组仔猪的采食量降低26.93%(P<0.05)；试验Ⅰ组和试验Ⅱ组之间差异显著(P<0.05)。

2.2锌对仔猪体内锌水平的影响 详见表2。

表2 锌对仔猪血清和组织锌水平的影响

由表2可见，锌对仔猪不同组织锌和血清锌水平的影响存在明显差异。与对照组相比，试验Ⅱ组血清锌含量提高134.6%(P<0.05)，试验Ⅰ组与对照组之间差异不显著(P>0.05)；试验Ⅰ组和试验Ⅱ组肝脏锌含量分别比对照组提高22.87%(P<0.05)和46.30%(P<0.05)；肾脏锌含量分别比对照组提高25.01%(P<0.05)和43.37%(P<0.05)；空肠锌含量分别比对照组提高28.1%(P<0.05)和30.99%(P<0.05)。脾脏、股骨和肌肉中锌含量各组差异不明显(P>0.05)。

2.3锌对仔猪消化酶的影响 详见表3。

表3 锌对仔猪胃、十二指肠、胰腺组织中酶活的影响

由表3可见，与对照组相比，试验Ⅰ组和试验Ⅱ组的胃蛋白酶分别提高18.78%(P<0.05)，13.39%(P<0.05)；试验Ⅰ组十二指肠淀粉酶比对照组提高33.91%(P<0.05)，而试验Ⅱ组与试验Ⅰ组及对照组相比，差异不显著(P>0.05)；试验Ⅰ组和试验Ⅱ组十二指肠脂肪酶则分别比对照组提高26.93%(P<0.05)和16.02%(P<0.05)；试验Ⅰ组的胰腺淀粉酶比对照组提高36.66%(P<0.05)，试验Ⅱ组则差异不显著(P>0.05)；十二指肠总蛋白水解酶、胰脂肪酶和胰蛋白酶各组之间差异不显著(P>0.05)。

2.4锌对仔猪血清和肝脏生理生化指标的影响 详见表4。

表4 锌对仔猪血清和肝脏生理生化指标的影响

由表4可见，与对照组相比，试验Ⅰ组和试验Ⅱ组血清ALP活性分别提高19.29%(P<0.05)和52.18%(P<0.05)；而试验Ⅱ组的Cu-Zn SOD活性则比对照组降低9.93%(P<0.05)，试验Ⅰ组与对照组之间差异不明显(P>0.05)；试验Ⅰ组和试验Ⅱ组的MT含量分别比对照组提高13.83%(P<0.05)和12.39%(P<0.05)，而MDA含量分别比对照组降低25.30%(P<0.05)和25.92%(P<0.05)。

3 小结与讨论

3.1锌对仔猪采食量的影响 锌是仔猪体内多种酶组成成分，参与味觉素的组成，促进味蕾的生长发育。本试验结果表明，注射2 mg/kg锌可显著促进仔猪采食，注射4 mg/kg锌则可显著抑制仔猪的采食。

Hahn等(1993)[2]报道，在早期断奶仔猪日粮中添加高锌，能明显提高仔猪的采食量和日增重，且发现在血浆锌浓度为1.5 mg/L左右时能促进仔猪的随意采食量，在此范围之外就可引起营养不足或中毒。本试验4 mg/kg体重锌的注射剂量可能超出了仔猪的生理耐受力，导致仔猪应激反应，造成采食量下降。

由此可见，给仔猪注射适量的硫酸锌有提高采食量的明显作用，超过一定范围则可引起采食量下降、营养不足，甚至中毒。

3.2锌对仔猪血清锌和组织锌含量的影响 目前，血浆锌是评价动物机体锌营养状况最常用的指标之一，血浆锌含量降低是锌营养性缺乏的一个早期和持续征候。本试验结果表明，注射硫酸锌能显著提高仔猪血清锌和肝、肾、空肠中的锌水平，对脾脏和股骨锌水平则无显著影响。

张彩英等(2010)[3]报道，高剂量(3 000 mg/kg)氧化锌可明显提高仔猪肝、肾和十二指肠的锌含量。冷静等(2003)[4]报道，添加高锌可明显提高肝、肾、趾骨、血清、毛发和粪便中的锌含量，而脾脏锌含量则随高锌添加量的变化差异不显著。

3.3锌对仔猪消化酶的影响 动物采食不仅受饲料成分、气味、性质和饲养管理制度等的影响，而且还受胃肠道的消化能力，如胃肠运动和消化酶活性等因素以及机体代谢状态的影响。肠道中的消化酶主要来自小肠液和胰液，其中淀粉酶、脂肪酶和蛋白水解酶是3类重要的消化水解酶。

本研究结果表明，试验Ⅰ组(2 mg/kg)与对照组相比显著提高了胃蛋白、十二指肠淀粉酶、脂肪酶以及胰淀粉酶的活性，而十二指肠总蛋白水解酶、胰脂肪酶和胰蛋白酶的活性则无显著影响。

3.4锌对仔猪血清ALP和肝脏生理生化指标的影响 据资料报道，锌参与动物体内200多种酶的组成，与300多种酶的活性有关。其中碱性磷酸酶(ALP)是机体内一个重要的锌依赖酶，其活性的发挥与血液锌含量密切相关。ALP在骨骼和营养物质代谢中发挥着重要作用，当ALP活性升高时，可提高成骨细胞的活性，促进钙、磷沉积。缺锌时可使ALP活性降低，导致骨钙化代谢障碍，进而抑制骨骼的生长发育。

本试验结果表明，注射硫酸锌可显著提高ALP的活性。铜锌超氧化物歧化酶(Cu-Zn SOD)是机体内一类重要的抗氧化剂，能清除体内的超氧阴离子自由基，保护细胞免受损伤，在机体的氧化和抗氧化平衡中发挥着重要作用。本研究结果还表明，注射4 mg/kg硫酸锌可使Cu-Zn SOD活性下降，而注射2 mg/kg硫酸锌则无明显影响。

据Carlson等(1999)[5]报道，早期断奶仔猪饲喂高锌日粮1～2周后对Cu-Zn SOD活性无显著性影响，推测Cu-Zn SOD可能对高锌不敏感。在本试验中，4 mg/kg锌使Cu-Zn SOD活性下降可能是导致仔猪采食量下降的重要原因之一。

金属硫蛋白(MT)的主要作用是参与微量元素的储存、运输和代谢，清除自由基，重金属解毒、增强机体的免疫力和抗应激能力，参与DNA的转录、翻译等基因表达过程。本试验结果表明，注射硫酸锌可显著提高肝脏MT的含量。

另外，机体通过酶系统和非酶系统产生氧自由基，后者能攻击生物膜中的不饱和脂肪酸，引发脂质过氧化作用，形成丙二醛(MDA)等脂质过氧化物，因而测试MDA水平常常可反映机体内脂质过氧化的程度，间接反映出细胞损伤程度。本试验结果表明，注射锌组可显著降低MDA含量。

[1]许梓荣,王敏奇.高剂量锌促进猪生长的机理探讨[J].畜牧兽医学报，2001,32(1):11-17.

[2]Hahn J D, Baker D H. Growth and plasma zinc responses of young pigs fed pharmacologic level of zinc[J]. Journal Animal Science, 1993,71:3020-3024.

[3]张彩英,曹华斌,胡国良等.日粮锌源和添加锌水平对断奶仔猪组织锌及粪便排泄锌含量的影响[J].饲料工业，2010,31(22):1-4.

[4]冷静,朱仁俊,马黎.新添加水平对断奶仔猪不同组织中锌沉积的影响[J].河南农业科学，2003,11:48-50.

[5]Carlson MS, Hill GM, Link JE. Early and traditionally weaned nursery pigs benefit from phase-feeding pharmacological concentrations of zinc oxide: effect on metallothionein and mineral concentrations[J]. J. Anim. Sci，1999,77(5):1199-1207.