蔬菜中杀扑磷农药残留的气相色谱-串联质谱法测定的新方法研究

林慧纯，胡祥娜，禹绍周

（深圳市农产品质量安全检验检测中心，广东 深圳 518040）

杀扑磷（Methidathion）是一种广谱的有机磷杀虫剂，具有触杀、胃毒和渗透作用，能渗入植物组织内，对咀嚼式和刺吸式口器害虫均有杀灭效力，尤其对防治介壳虫有特效，同时对螨类也有一定的控制作用[1]。杀扑磷是高毒农药，日本对杀扑磷在蔬菜中的限量为0.1 mg/kg，美国已停止了杀扑磷登记[2]。在国内，杀扑磷农药价格便宜，使用范围比较广泛，农业部监测已把杀扑磷作为必检项目，在日常监测中，杀扑磷的检出率也比较高。目前常用的检测方法有气相色谱法[3-4]和气相色谱-质谱法[5-6]，但这两种方法都存在一定的缺陷，气相色谱法需要其他辅助手段进行定性，气相色谱-质谱法会出现基质干扰，常出现假阳性。因此，笔者尝试用气相色谱-串联质谱法测定蔬菜中的杀扑磷农药残留，此方法能有效排除基质干扰，提高灵敏度，定性准确，定量能满足残留限量的要求。

1 材料与方法

1.1 材料

选用三种比较有代表性的蔬菜：茄子（茄果类蔬菜）；结球甘蓝（甘蓝类蔬菜）；奶白菜（绿叶类蔬菜）。其中，茄果类蔬菜本底相对比较干净；甘蓝类蔬菜属于含硫蔬菜，容易对分析目标物产生干扰；绿叶类蔬菜的叶绿素含量高，其色素干扰极大的增加了分析的难度。这三类蔬菜具有不同性质，如果能从这三类蔬菜的检测分析中获得满意的回收率结果，那么将会解决绝大多数蔬菜的检测分析问题。

1.2 仪器设备与试剂

气相色谱-串联质谱仪（Agilent 7890A-7000QQQ）、MassHunter工作站；匀浆机（IKA ULTRA TURRAX T25，IKA公司）；氮吹仪（N-EVAP Nitrogen Evaporation System Models 112，Organomation Associates.Inc.，美国）；食品搅碎机（PHILIPS HR 1724）旋涡混合器（姜堰市康健医疗器具有限公司）。杀扑磷标准品（农业部环境保护科研监测所）；二氯甲烷、甲醇、丙酮均为色谱纯。

1.3 样品前处理

准确称取25.0 g试样放入锥形瓶中，加入50.0 mL乙腈，匀浆机高速匀浆2 min，用滤纸过滤，滤液用5～7 g氯化钠盐析，室温下静止30 min，使乙腈相和水相分层，吸取10.00 mL乙腈溶液用氮吹仪蒸发至近干，加入2 mL二氯甲烷-甲醇（95∶5，V/V），待净化。将此溶液上样于预先用5 mL二氯甲烷-甲醇（95∶5，V/V）条件化的石墨炭黑氨基固相萃取小柱，以 10 mL 二氯甲烷-甲醇（95∶5，V/V）分 3次淋洗，收集淋洗液，用氮吹仪蒸发至近干，用丙酮准确定容至5.00 mL，过0.2 μm滤膜后进行测定。

1.4 仪器检测条件

色谱柱 HP-5MS（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；载气氦气（He）；流速1.0 mL/min；进样口温度 250℃；不分流进样；离子源（EI）；碰撞气体N2，淬灭气体He，离子源温度 230℃；四极杆温度 150℃；加热器温度 280℃；升温程序 90℃（15℃/min）～280℃（保持10 min）。多反应监测（MRM）参数：母离子（m/z）为145，定量子离子（m/z）为 85.1，碰撞能量为 5 V；定性子离子（m/z）为58.1，碰撞能量为10 V。选择离子监测（SIM）参数：定量离子（m/z）为 145，定性离子（m/z）为157，302。

2 结果与分析

2.1 线性关系和方法检出限

将杀扑磷标准储备液稀释至 1、0.4、0.1、0.05、0.02 mg/kg，按照1.4的仪器条件进行测定，以杀扑磷的质量分数为横坐标，以峰面积为纵坐标作图得标准曲线，通过标准曲线可得线性回归方程为y=679 230 x+153 08，相关系数 r=0.992 6。

用信噪比S/N=3来计算方法的检出限，将峰面积换算成杀扑磷的质量分数，得出杀扑磷的最低检出限为0.001 8 mg/kg。

2.2 分析方法的准确度

分别称取一定量的茄子、结球甘蓝、奶白菜空白样品，准确加入三个质量分数水平的杀扑磷标样，每个水平做三个平行样，按照1.3和1.4的方法进行测定，通过外标法定量，标样采用对应的样品基质溶液配制，得到相应水平的平均回收率及相对标准偏差，回收率在92.2%～109.3%之间，RSD在1.1%～7.3%范围内，详见表1。

表1 三种蔬菜中杀扑磷的回收率和相对标准偏差（%）

2.3 分析方法的精密度

分别在茄子、结球甘蓝、奶白菜空白样品中添加0.1 mg/kg水平的杀扑磷标样，经前处理后定量重复测定6次，RSD值（n=6）分别为3.8%、4.2%、3.2%。

2.4 气相色谱-质谱法与气相色谱-串联质谱法比较

图1为杀扑磷多反应监测下的质谱图。图2为茄子、结球甘蓝、奶白菜空白样品添加0.4mg/kg杀扑磷的SIM选择离子色谱图。图3为茄子、结球甘蓝、奶白菜空白样品添加0.02 mg/kg杀扑磷的MRM定量离子（145.0 m/z>85.1 m/z）色谱图。

图1 杀扑磷多反应监测（MRM）质谱图

由图1～图3可知，气相色谱-质谱法按照国标方法[4]，选择定量离子145 m/z，定性离子157 m/z、302 m/z，这三个离子都受到基质不同程度的干扰，即使在0.4 mg/kg的质量分数水平下也得不到好的峰型，严重影响定性与定量，甚至会出现假阳性，达不到标准要求；气相色谱-串联质谱法则没有这方面问题，添加质量分数水平为0.02 mg/kg的杀扑磷时，茄子和结球甘蓝完全没有干扰峰，奶白菜在11.173 min有一干扰峰，但对检测结果没有影响。

图2 添加杀扑磷（0.4 mg/kg）的SIM选择离子色谱图

图3 添加杀扑磷（0.02 mg/kg）的MRM子离子（145.0>85.1）色谱图

3 讨论

GC-MS/MS可从干扰严重的质谱中抽取有用数据，大大提高质谱检测的选择性，使谱图获得较平稳的基线，因此，即使在较低质量分数水平下，也能获得较高的信噪比，从而使检测灵敏度大大提高。采用气相色谱-串联质谱法检测蔬菜中杀扑磷农药残留，能够有效排除基质干扰，方法具有高灵敏度、定性准确、定性定量检测一次完成的特点，定量可满足残留限量的检测要求。

[1]刘书丽.杀介壳虫特效药——杀扑磷[J].农药市场信息，2006，（19）：35.

[2]美国停止杀虫剂杀扑磷登记[J].浙江化工，2010，41（6）：37.

[3]NY/T761-2008，蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定[S].

[4]焦琳娟.动态液相微萃取—气相色谱法检测蔬菜中有机磷农药的研究[J].安徽农业科学，2011，39（18）：11022-11023，11064.

[5]GB/T19648-2006，水果和蔬菜中500种农药及相关化学品残留量的测定气相色谱-质谱法[S].

[6]王 瑞，林敏霞，吴 淳，等.气相色谱——质谱法测定黄瓜中的啶虫脒农药残留[J].安徽农业科学，2010，38（31）：17538-17539.