黄芪多糖对氢化可的松氧化应激状态下肉仔鸡生长性能、脏器指数及抗氧化能力的影响

魏炳栋 陶 浩 于 维 陈 群* 李 林

(1.吉林省农业科学院畜牧分院，公主岭 136100;2.吉林农业大学动物科技学院，长春 130118)

植物多糖是从天然植物中分离而出的高效活性物质，它不仅是植物体的功能和结构物质，而且还参与了生命现象中的各种活动，在提高机体免疫力、抗氧化能力等方面起到了十分重要的作用［1－4］。动物在正常生理状态下，体内活性氧产生和清除处于动态平衡中，但是许多内源或外源性的刺激均可使体内氧化还原状态失去平衡，使机体处于氧化应激状态［5－6］。常见的应激源有:环境、疾病、饲养管理和心理等，应激时动物体内一些理化指标产生变化，这些变化的理化指标也可以作为应激因子，反过来刺激动物产生应激。因为应激均有肾上腺皮质激素的参与，氢化可的松和皮质酮属于糖皮质激素，作用机理相似［7－9］。因此，本试验采用氢化可的松为应激源，诱导产生氧化应激，研究在饲粮中添加黄芪多糖(Astragalus polysaccharide，APS)对氧化应激状态下肉仔鸡生长性能、主要脏器指数和血清、肝脏中氧化还原状态的影响。

1 材料与方法

1.1 试验动物及试验设计

选用1日龄爱拔益加(AA)肉仔鸡256只，随机分为4个组，每组8个重复，每个重复8只鸡，公母各占1/2，重复之间体重接近。对照组(A组)和模型组(B组)饲喂不添加APS的基础饲粮，基础饲粮为参照美国NRC(1994)家禽营养需要配制的粉状配合饲料，其组成及营养水平见表1。试验1组(C组)和试验2组(D组)饲喂在基础饲粮中分别添加0.4%和0.8%APS的试验饲粮。试验预试期7 d，从第8天开始除A组外，其余各组均在饮水中添加20 mg/L氢化可的松造模，连续5 d，A组饮用蒸馏水;同时C组和D组饲喂添加APS的试验饲粮至第21天，具体的试验设计见表2。试验鸡采用笼养，每个重复单独给料，试验期间肉仔鸡自由采食，充足饮水，按正常免疫程序进行免疫接种。

1.2 试验材料

APS购自陕西中鑫生物技术有限公司，为黄色精细粉末，多糖含量50%;氢化可的松购自山西晋新双鹤药业有限责任公司，为白色粉末，纯度≥99%。

1.3 样品采集与制备

分别于肉仔鸡14、21日龄，每重复按平均体重选取3只鸡，颈部采血10 mL/只，3 500 r/min离心10 min制备血清，于－20℃条件下保存，备测血清抗氧化指标。同时，进行屠宰试验，摘取肝脏、胰腺、脾脏、法氏囊和胸腺，除去血液，滤纸吸干，称重，计算脏器指数。另取肝脏0.5 g，加9倍冰冷生理盐水，剪碎，置玻璃匀浆器中研磨，制成10%的组织匀浆液，2 000 r/min离心15 min，取上清液于－20℃条件下保存，备测肝脏抗氧化指标。

1.4 检测指标

分别于肉仔鸡14和21日龄空腹12 h后称重，记录体重，计算平均日增重。

血清和肝脏抗氧化指标的测定:血清和肝脏总超氧化物歧化酶(T－SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH－Px)活性以及丙二醛(MDA)含量均用Specord S600紫外可见光光度计进行测定，抗氧化指标测定试剂盒购自南京建成生物工程研究所。

1.5 数据处理

结果以平均值±标准差表示，数据处理与分析采用 SPSS 13.0软件的 one－way ANOVA程序进行方差分析，以P＜0.05作为差异显著性判断标准，差异显著时，以LSD法进行多重比较。

2 结果

2.1 APS对氢化可的松氧化应激状态下肉仔鸡生长性能的影响

从表2可以看出，C、D组14日龄体重和1～14日龄平均日增重均极显著高于A、B组(P＜0.01);D组21日龄体重和1～21日龄平均日增重均显著高于B组(P＜0.05)。

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础)Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet(air－dry basis) %

表2 试验设计Table 2 Design of this experiment

表2 APS对氢化可的松氧化应激状态下肉仔鸡生长性能的影响Table 2 Effects of APS on growth performance of broilers under oxidative stress by hydrocortisone induction

2.2 APS对氢化可的松氧化应激状态下肉仔鸡脏器指数的影响

从表3可以看出，14日龄的肝脏指数A组显著高于其他3组(P＜0.05)，B、C和D组间差异不显著(P＞0.05)，胰腺指数A、B组显著高于C组(P＜0.05)，但与D组差异不显著(P＞0.05)，脾脏指数B组显著低于A、C组(P＜0.05)，但与D组差异不显著(P＞0.05)，法氏囊指数各组间差异均不显著(P＞0.05)，D组胸腺指数极显著高于A、B组(P＜0.01)，显著高于 C组(P＜0.05)，A、C组显著高于B组(P＜0.05)，A、C组间差异不显著(P＞0.05)。21日龄的肝脏指数A、B组显著高于D组(P＜0.05)，胰腺指数和胸腺指数各组间差异均不显著(P＞0.05)，C、D组脾脏指数极显著低于 A、B组(P＜0.01)，且 A、B组间和C、D组间差异均不显著(P＞0.05)，C组法氏囊指数显著低于D组(P＜0.05)，而A、B、D组间差异均不显著(P＞0.05)。

2.3 APS对氢化可的松氧化应激状态下肉仔鸡血清抗氧化指标的影响

从表4可以看出，14日龄C、D组 T－SOD和GSH－Px活性高于A、B组，但未达到差异显著水平(P＞0.05)，A、B组MDA含量显著高于D组(P＜0.05)，但与C组差异不显著(P＞0.05)。21日龄各组间T－SOD活性差异不显著(P＞0.05)，C、D组 GSH－Px活性显著高于 A、B组(P＜0.05)，且 C、D组 MDA含量极显著低于 B组(P＜0.01)。

2.4 APS对氢化可的松氧化应激状态下肉仔鸡肝脏抗氧化指标的影响

从表5可以看出，14日龄肝脏 T－SOD和GSH－Px活性各组间差异不显著(P＞0.05)，C、D组MDA含量极显著低于A、B组(P＜0.01)。21日龄，各组MDA含量各组间差异均不显著(P＞0.05)，C组 T－SOD活性显著高于 B组(P＜0.05)，且 A、C、D 组间差异不显著(P ＞0.05)，A组 GSH－Px活性显著高于 B、C、D 组(P＜0.05)，且B、C、D组间差异不显著(P＞0.05)。

3 讨论

3.1 APS对氢化可的松氧化应激状态下肉仔鸡生长性能的影响

当应激发生时，肌肉、血浆中不稳定蛋白质贮存组织分解能力加强，血浆尿酸和尿酸氮含量增加，分解氨基酸通过糖异生作用生成葡萄糖，从而使氮存留受到损害，蛋白质合成降低伴随着肉鸡生长性能下降［10］。大多数研究认为，应激会影响动物的生产性能，Puvadolpirod等［8］报道，促肾上腺皮质激素(ACTH)处理后，4和7 d的增重均低于对照组;柏华［11］的研究结果表明，慢性氧化应激不同程度地降低了肉仔鸡日增重，增加了饲粮的耗料量和料重比，对生产性能有影响，但差异不显著。在本试验结果中，通过在饲粮中添加APS，可显著改善氢化可的松产生的氧化应激状态，促进动物生长。

表3 APS对氢化可的松氧化应激状态下肉仔鸡脏器指数的影响Table 3 Effects of APS on viscera indexes of broilers under oxidative stress by hydrocortisone induction mg/g

表4 APS对氢化可的松氧化应激状态下肉仔鸡血清抗氧化指标的影响Table 4 Effects of APS on serum antioxidant indices of broilers under oxidative stress by hydrocortisone induction

表5 APS对氢化可的松氧化应激状态下肉仔鸡肝脏抗氧化指标的影响Table 5 Effects of APS on hepatic antioxidant indices of broilers under oxidative stress by hydrocortisone induction

3.2 APS对氢化可的松氧化应激状态下肉仔鸡主要脏器指数的影响

动物的脏器指数是其重要的生物学特性指标之一，脏器指数的相对大小，从一定程度上可说明其功能的强弱［12］。肝脏和胰腺是体内重要的代谢器官和消化器官，胸腺、法氏囊和脾脏是重要的免疫器官。一般认为，动物免疫器官重量的增加是由其自身细胞生长发育和分裂增殖所致。

本试验结果说明氢化可的松氧化应激对14日龄的肉仔鸡脏器指数有影响，但是随着试验时间的延长，这种影响逐渐变得不明显。同样，APS对14日龄肉仔鸡应激产生的脏器指数损伤有一定的缓解作用，尤其能改善脾脏和胸腺等免疫器官指数，但是对21日龄的大多脏器指数影响不显著。国内外关于应激对器官指数影响的报道结果也不尽一致。武书庚［6］的研究结果表明，在应激处理10 d之前，可的松饮水对肉仔鸡胸腺指数无显著影响，应激处理10 d后，试验组胸腺指数显著低于对照组，处理2 d后，试验组的脾脏指数显著低于对照组，但是在其他时间未见显著差异，且对肉仔鸡的肝脏指数无显著影响;Puvadolpirod等［8］报道，ACTH诱导的氧化应激处理4和7 d后，降低了肉仔鸡的免疫器官指数，显著增加肝脏的绝对重量和相对重量。

关于APS对肉仔鸡脏器指数的报道较多。魏炳栋［13］报道，在肉仔鸡饲粮中添加 APS对1～7日龄肝脏、胰腺及免疫器官指数的影响显著，但是对1～14日龄影响不显著，这可能是由于肉仔鸡在1～7日龄时内脏器官发育还不完善，功能也不健全，添加APS可促进体内器官细胞的发育和增殖，使得重量增加，而1～14日龄时，器官发育较为完善，添加效果就不明显;李树鹏［14］的研究表明，APS可使肝细胞排列紧密有序、枯否氏细胞核小叶间动静脉增多，有助于增强肝功能;石达友等［15］的研究中指出，黄芪提取浓缩粉能增加粤黄鸡的胸腺、脾脏和法氏囊指数。

3.3 APS对氢化可的松氧化应激状态下肉仔鸡血清和肝脏抗氧化指标的影响

动物处于应激状态时，肾上腺髓质部大量分泌儿茶酚胺，Haggendal等［16］报道，试验性应激(束缚)导致交感－肾上腺系统的反应而大量释放儿茶酚胺类激素，特别是肾上腺素能促使神经末梢释放去甲肾上腺素，可导致自由基产量增加而造成心肌损伤，自由基产生的增加会导致组织细胞内的脂质过氧化现象发生。MDA是脂质过氧化反应的最终产物，能够间接反映细胞的损伤程度;SOD和GSH－Px是自由基损害的主要防御酶，清除自由基，同时，这2种酶之间还能起相互保护作用［6］。

本试验通过测定肉仔鸡血清和肝脏匀浆中TSOD、GSH－Px活性和MDA的含量，间接地反映了细胞的脂质过氧化程度。结果表明，氢化可的松可诱导产生氧化应激，使细胞产生不同程度的氧化损伤，通过在饲粮中添加APS后，可以看出，14日龄C、D组血清T－SOD和GSH－Px活性、21日龄血清GSH－Px活性以及14和21日龄肝脏 T－SOD活性均高于A、B组，且21日龄血清和14日龄肝脏MDA含量极显著低于A、B组，说明APS对氢化可的松诱导的氧化应激有一定的干预作用，能够提高T－SOD和GSH－Px活性，减少脂质过氧化产物MDA的含量。

武书庚［6］研究结果表明，饮用可的松可使肉仔鸡血清MDA含量明显升高，而SOD活性下降，而且还随着可的松浓度的增加，机体发生脂质过氧化反应增强，同样，心脏和肝脏中MDA含量与SOD活性之间存在负相关，且对肝脏的损伤比心脏明显;柏华［11］研究结果表明，慢性氧化应激可显著升高肉仔鸡心脏和肝脏MDA含量，降低SOD和GSH－Px活性;同样，丛杰等［17］和方志宏等［18］相继报道了辐射、冷应激和急性热应激可引起组织中过氧化现象的发生;魏炳栋等［13］报道，在饲粮中添加APS可显著提高1～14日龄肉仔鸡血清和肝脏中T－SOD和 GSH－Px活性，降低 MDA含量，说明APS对1～14日龄肉仔鸡具有较强的抗氧化作用;吕美［19］和徐小芳等［20］的研究中指出，APS 能够提高肉仔鸡血清中GSH－Px和SOD活性，降低MDA含量，具有较强的抗氧化活性。本试验结果与上述报道一致，APS对氢化可的松诱导产生的氧化应激具有一定的干预作用，能够提高血清和肝脏中 T－SOD和 GSH－Px的活性，减少 MDA的含量。

4 结论

APS可通过提高肉仔鸡血清和肝脏中T－SOD和GSH－Px活性，减少MDA的含量，缓解氢化可的松诱导的氧化应激，从而上调肉仔鸡脏器指数，保证动物生长。

［1］冯婷，何聪芬，赵华，等.植物多糖的研究进展［J］.北京工商大学学报，2004，22(5):1－4.

［2］丁保全，金丽琴，吕建新.多糖生物活性研究进展［J］.中国药学杂志，2004，39(8):561 －564.

［3］唐小红，祝寿芬.国内外对高等植物多糖的研究进展［J］.山西医科大学学报，1998，29(1):95 －96.

［4］罗祖友，吴季勤，吴谋成.植物多糖的抗氧化与抗病毒活性［J］.湖北民族学院学报，2007，25(1):77－81.

［5］陈群.氧化应激对动物消化道结构功能影响的研究［D］.博士学位论文.无锡:江南大学，2007:11－13.

［6］武书庚.肉仔鸡氧化应激模型的研究［D］.博士学位论文.北京:中国农业科学院，2007:1－3.

［7］POST J，REBEL M J，TER HUURNE A A.Physiological effects of elevated plasma corticosterone concentrations in broilers chickens.An alternative means by which to access the physiological effects of stress［J］.Poultry Sciences，2003，82:1313 － 1318.

［8］PUVADOLPIROD S，THAXTON J P.Model of physiological stress in chickens 1.Response parameters［J］Poultry Science，2000，79:363 －369.

［9］梁礼成，刘建华，金久善，等.ACTH和地塞米松对鸡血浆纤维连接蛋白及血清生化指标的影响［J］.中国农业大学学报，2000，5(3):106－110.

［10］刘铀，刘艳芬，林红英，等.VE防治肉鸡热应激机理的初步研究［J］.中国家禽，1999，21(6):6 －10.

［11］柏华.慢性氧化应激对肉仔鸡肉品质及消化代谢的影响［D］.硕士学位论文.杨凌:西北农林科技大学，2007:40－42.

［12］马得莹，单安山，李群道.中草药添加剂对蛋雏鸡生长性能和免疫功能的影响［J］.动物营养学报，2004，16(2):36 －40.

［13］魏炳栋，于维，陶浩，等.黄芪多糖对1～14日龄肉仔鸡生长性能、脏器指数及抗氧化能力的影响［J］.动物营养学报，2011，23(3):486 －491.

［14］李树鹏.黄芪多糖益生菌合生元对雏鸡生长和免疫作用的研究［D］.硕士学位论文.杨凌:西北农林科技大学，2005:32－41.

［15］石达友，刘汉儒，卓曲，等.中药提取物对鸡免疫器官发育和新城疫抗体水平的影响［J］.中兽医杂志，2004(2):4－5.

［16］HAGGENDAL J，JONSSON L，JOHANSSON G，et al.Catecholamine induce free radicals in myocardial cell necrosis on experimental stress in pigs［J］.Acta Physiologica Scandinavica，1987，131:447 －452.

［17］丛杰，方允中.应激反应引起的氧化损伤［J］.自由基生命学进展，1993，1:28 －34.

［18］方志宏，高应.沙棘油和VE对冷暴露大鼠脂质过氧化物作用的影响［J］.营养学报，1995，17:27－31.

［19］吕美.黄芪多糖粗提物对肉仔鸡生长及代谢调控的研究［D］.硕士学位论文.郑州:河南农业大学，2005:16－19.

［20］徐小芳，罗燕，赵民，等.中药复方多糖对鸡抗氧化功能的影响［J］.中国农业科学，2009，42(2):706 －713.