对氧磷脂酶1与2型糖尿病血管并发症的关系研究

郭建政

对氧磷脂酶1与2型糖尿病血管并发症的关系研究

郭建政

目的 探讨血清对氧磷脂酶1活性与2型糖尿病血管并发症的关系。方法 以对氧磷为底物测定2型糖尿病各组患者及健康老年人血清对氧磷脂酶1活性。结果 2型糖尿病组与健康对照组血清对氧磷脂酶1活性差异有统计学意义(P＜0.01);2型糖尿病合并血管病变组与2型糖尿病组血清对氧磷脂酶1活性差异有统计学意义(P＜0.01)。结论 对氧磷脂酶1活性在2型糖尿病及并发血管病变患者中均显著降低，提示对氧磷脂酶1活性的降低参与了糖尿病血管并发症的发生。

对氧磷脂酶1; 糖尿病;2型糖尿病; 糖尿病血管病变

对氧磷脂酶(Paraoxonase，PON)于1953年被发现，因能水解神经毒杀虫剂对氧磷(Paraoxon)而命名为对氧磷脂酶。PON1是PON的同工酶，90年代初发现血清PON1活性与动脉粥样硬化的发生有密切关系。本研究观察PON1活性与老年人2型糖尿病的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2009年10月～2010年3月笔者所在医院2型糖尿病患者108例，符合WHO(1999年)的DM诊断标准［1］。其中男49例，女 59例，年龄 60～81岁，平均(66.81±4.59)岁，病程(8.60±5.01)年。根据有无DM并发症分为三组:2型糖尿病组29例，DM并心脑病变组37例，DM并肾脏病变组42例。心脑血管病变确定依据为有下列情况之一者:曾有心绞痛或心肌梗死病史或经心电图、超声心动图、Holter证实为冠心病者;有脑血管意外病史，颅脑CT或MRI扫描有缺血性或出血性病灶。糖尿病肾病的确诊依据Mogensen等［2］的诊断标准。

健康对照组为体检健康的老年人50例，其中男22例，女28例，年龄60～79岁，平均(66.02±4.37)岁。符合1995年中华医学会老年医学学会推荐的健康老年人标准［3］。健康对照组与DM各组在性别、年龄等方面具有可比性。

1.2 研究方法 各组患者测身高、体重，计算体重指数(BMI)=体重(kg)/身高2(m2)。甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL－C)用酶法测定，低密度脂蛋白(LDL－C)按Friedewald公式计算。空腹血糖(FBG)用葡萄糖氧化酶法测定。

PON 1活性测定［4］，空腹取血，离心分离血清，－20℃保存，以对氧磷为底物(paraoxonase)，3周内同批测定。用血清10 μl、对氧磷应用液 0.4 ml、甘氨酸缓冲液 1.2 ml、0.1 MEDTA在25℃分别配制对照管和PON 1活性管。准备完毕后置于5 ml比色杯中，412 μm波长处，以水为参比，读取吸光度A值。由光密度换算为活性单位。PON 1活性管A1与对照管A0差值查标准曲线得血清PON 1活性单位。酶活性在0～1600单位内与吸光度值呈线性。以每分钟每升血清水解生成对硝基酚1 μmol为1个国际单位(IU/L)。

1.3 统计学处理 采用SPSS 10.0统计软件包进行多样本两两比较q检验、单因素方差分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组一般情况及FBG、血脂测定结果 DM各组患者与健康对照组FBG均值间差异有统计学意义(P＜0.01);DM各组与健康对照组及DM各组间TC均值间差异均有统计学意义(P＜0.01);DM并心脑病变组、DM并肾脏病变组与健康对照组TG、TC、LDL、HDL的均值间差异均有统计学意义(P＜0.05或 P＜0.01)。见表1、2。

表1 健康对照组与2型DM各组的基本临床特征(±s)

表1 健康对照组与2型DM各组的基本临床特征(±s)

组别 例数 男/女 年龄(岁)BMI(kg/m2)FBG(mmol/L)TG(mmol/L)TC(mmol/L)LDL(mmol/L)HDL(mmol/L)8±0.75 3.76±1.12 3.10±0.73 1.16±0.21单纯DM组(2) 29 14/15 66.14±4.85 25.53±2.98 10.19±3.96 1.61±0.62 5.12±0.78 3.23±0.55 1.06±0.29 DM并心脑病变组(3) 37 15/22 67.16±5.30 24.20±2.70 10.28±6.01 1.88±0.55 6.06±0.64 3.43±0.54 0.98±0.30 DM并肾脏病变组(4) 42 20/22 66.98±3.72 24.21±1.98 10.06±3.61 2.05±0.54 5.69±0.78 3.53±0.54 0.92±0.21 F值 0.65 1.86 19.86 9.52 60.14 4.54 7.32 59.69 P值 ＞0.05 ＞0.05 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01健康对照组(1) 50 22/28 66.02±4.37 25.09±3.72 5.07±0.69 1.3

表2 健康对照组与2型DM各组基本临床特征的两两比较

2.2 PON1活性、PON1/HDL－C活性 健康对照组与DM各组患者PON1活性及PON1/HDL－C间差异均有统计学意义(P ＜0.01)。见表3、4。

表3 健康对照组与2型DM各组PON1活性、PON1/HDL－C(±s)

表3 健康对照组与2型DM各组PON1活性、PON1/HDL－C(±s)

组别 例数 PON1(IU/L)50 183.52±49.45 162.68±49.63单纯DM组(2) 29 125.14±34.22 126.21±43.89 DM并心脑病变组(3) 37 94.49±28.87 97.00±28.74 DM并肾脏病变组(4) 42 93.26±26.81 99.10±26.24 F值 59.69 28.24 P值PON1/HDL－C健康对照组(1)＜0.01 ＜0.01

表4 健康对照组与2型DM各组PON1活性、PON1/HDL－C的两两比较

3 讨论

PON1是一类钙离子依赖的与高密度脂蛋白相关性芳香酯酶，PON1与高密度脂蛋白(HDL)紧密结合，通过水解脂质过氧化物，保护HDL与LDL免受氧化修饰［5］。90年代初发现，动脉粥样硬化、高脂血症和2型糖尿病患者PON1活性显著下降［6］。本研究显示，2型糖尿病患者PON1活性显著下降，且合并心脑血管病变、肾脏病变者其PON1活性更低。为避免HDL浓度影响，采用PON1/HDL－C比值来标化，该值也显著下降，提示PON1活性的减低参与了2型糖尿病心脑血管病变、肾脏病变的发生。

2型糖尿病患者长期处于高血糖状态，血中糖基化水平较高，PON1与HDL结合部位被不断糖基化修饰，必然影响该位点的构型，进而降低PON1活性。同时体内LDL被糖基化，使2型糖尿病患者体内ox－LDL明显增多［7］。不断增加的高浓度ox－LDL可以灭活部分PON1活性［8］。

尽管在糖尿病状态下多种机制使血管损伤，导致并加速动脉粥样硬化的发生、发展，引起心、脑、肾血管并发症，但其中更为重要的危险因素无疑是糖尿病时存在的血脂异常。糖尿病时血脂异常的特点常见为血中TG升高、LDL升高、HDL降低。而PON1活性降低正是涉及上述3个环节中的2个环节，即PON1活性降低使过氧化低密度脂蛋白(ox－LDL)增加，使HDL减少。因此，PON1活性减低是2型糖尿病血管并发症的危险因素之一。能否通过提高PON1活性来改善脂代谢异常、动脉粥样硬化有待今后进一步研究。

［1］钱荣立.关于糖尿病的新诊断标准与分型［J］.中国糖尿病杂志，2000，8(1):5.

［2］Mogensen CE.Manangement of early nephropaphy in diabetic pa-tients［J］.Annu Rev Med，1995，7(2):46 － 79.

［3］中华医学会老年医学学会.中华医学会老年医学学会对健康老年人标准的建议(修订草案，1995年)［J］.中华老年医学杂志，1996，15(1):9.

［4］周志俊，邬红梅，胡云平，等.血清对氧磷脂酶活性测定方法研究［J］.中国公共卫生，2000，16(4):303 －304.

［5］Topcuoglu A，Uzun H，Aydin S，et al.The effect of hormone replacement therapy on oxidized low density lipoprotein levels and paraoxonase activity in postmenopausal women［J］.Tohoku J Exp Med，2005，205(1):79 －86.

［6］原淑鸿，杨玉恒，夏岳.对氧磷酸酯酶1与动脉粥样硬化［J］.河北医药，2004，26(3):271.

［7］尹建丽，孙亚威，仇玉明，等.对氧磷脂酶1与2型糖尿病并发冠心病相关因素分析［J］.中国全科医学，2004，7(16):1129－1131.

［8］Aviram M，Rosenblat M，Billecke S，et al.Human serum paraoxonase(PON1)is inactivated by oxidized low density lipoprotein and preserved by antioxidants［J］.Free Radic Bio Med，1999，26:892 －904.

A study on the relationship between paraoxonase 1 and type 2 diabetes mellitus with vascular complications

GUO Jian－zheng.Handan People's Hospital，Handan056000，China

ObjectiveTo study the relationship between serum paraoxonase 1(PON1)activity and type 2 diabetes mellitus with vascular complications in the elderly.MethodsSerum PON1 activity was measured by using paraoxonase as the substrate among the elderly with type 2 diasetes and the normal healthy people.ResultsPON1 activity was much lower in the elderly groups with type 2 diabetes mellitus than that of the controls，and PON1 activity was much lower in type 2 diabetic patients combined with macroangiopathy and microangiopathy than that of the simple type 2 diabetic patients(P＜0.01).Serum PON1 activity was much lower in the elderly patients with type 2 diabetes mellitus and diabetic vascular complications.ConclusionThe lower serum PON1 activity may play a role in elderly patients with type 2 diabetes mellitus and diabetic vascular complications.

Paraoxonase 1;Diabetes mellitus;Type 2 diabetes;Diabetic angiopathies

10.3969/j.issn.1674 －4985.2012.06.002

056000河北省邯郸市人民医院

郭建政

2011－12－26)

(本文编辑:王宇)