底物因素对化学发光法检测促甲状腺激素的影响

田军 权城 王丽彬 宋小海

在临床实验中，要求所有项目均应该严格按照标准化操作程序(SOP)进行操作，但实际工作中由于人为或外界因素，实验进程往往会受到干扰，对结果造成一定影响。促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone，TSH)是判断甲状腺功能是否正常的首选指标，化学发光法因具有快速、准确、灵敏度高等特点而被临床普遍接受，但在全自动仪器没有普及的情况下，试剂加注过程通常会有人为因素的存在。底物加注为测量的最后一步，关系到最终的检测结果，因此，笔者对本院部分甲状腺疾病患者的血液标本进行了分组研究，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 试剂 北京科美东雅生物技术有限公司生产的化学发光促甲状腺激素(TSH)定量试剂盒(批准文号，国药准字S20040080)。两个level质控由同一厂家提供。

1.2 仪器 GloRunner化学发光检测仪(美国原装);DEMII型自动酶标洗板机(北京产);BL－ZDQ－OA微量振荡器(北京产)。

1.3 检测 留取25份甲状腺疾病患者血液，按不同方式分组，同时进行检测。两个level质控在控，证明本次试验TSH检测结果准确可靠。

1.4 统计学处理 由操作软件自动得出TSH具体数值，组间差异由于数据不符合正态分布，采用秩和检验，所有结果均由SPSS 11.5软件计算所得。

2 结果

测试阶段的底物分别为1 h、30 min和10 min前配置，并各自在加注后5 min、10 min、30 min、1 h和 2 h检测，得出各组促甲状腺激素的结果，其检测结果见表1。

以底物10 min前配置，加注后10 min检测为标准组，各分组与其进行秩和检验，差异有统计学意义(P＜0.05)的部分检测结果如下:底物配置时间1 h检测延迟时间1 h(P=0.040);底物配置时间1 h检测延迟时间2 h(P=0.000);底物配置时间30 min检测延迟时间1 h(P=0.027);底物配置时间30 min检测延迟时间2 h(P=0.000);底物配置时间10 min检测延迟时间1 h(P=0.000);底物配置时间10 min检测延迟时间2 h(P=0.000)。

表1 不同分组下TSH的检测结果中位数(μIU/ml)

3 讨论

TSH是垂体前叶分泌的一种糖蛋白激素，其主要作用是调控甲状腺细胞生长和甲状腺激素合成与分泌。甲状腺功能改变时，TSH的波动较甲状腺激素更迅速显著，是反映下丘脑－垂体－甲状腺轴功能的敏感指标。临床上多用于甲状腺功能亢进(甲亢)和减退(甲减)的诊断、原发与继发性甲减的鉴别诊断、检测甲亢和甲减的治疗效果、亚临床甲亢的诊断以及垂体TSH瘤的实验室诊断等。特别是对甲低的诊断，其价值约等于 FT4，好于 TT4、FT3和 TT3。

通过对以上数据的比较不难看出，测定促甲状腺激素时，加注底物后检测延迟时间对测定结果的影响是显著的。本实验中，所有1 h和2 h检测组，其结果与标准组比较差异均有统计学意义(P＜0.05)。其余分组无论底物何时配置(≤1 h)均与标准组较为一致(P＞0.05)。因此，笔者认为，在化学发光法检测促甲状腺激素的实验中，无论底物何时配置(≤1 h)，都应在底物加注后规定时间内(≤30 min)进行检测，否则都将会对结果造成影响。

笔者所采用的试剂盒，其说明书中关于底物的内容是:“化学发光底物液A、B使用前根据需要量等体积(1∶1)混合，现用现配。”及“必须于加化学发光底物液后的第5～30 min内测量。”说法较为含糊，不利于标准化操作的执行。通过本次试验，说明笔者在测试中不按操作规程进行，不注重保养及试剂的混匀准备，其结果的偏差显著，有统计学意义(P＜0.05)。

化学发光免疫测定敏感度高，甚至超过放射免疫分析。操作上的微小误差也会导致结果上的偏离［1］。因此，笔者认为应该严格按照标准化操作程序(SOP)去做，选择适当的底物配置时机，尽量避免检测中系统误差的出现。

［1］陶义训．免疫学和免疫学检验［M］．第2版．北京:人民卫生出版社，1997:174．