新疆地区6县棘球蚴病流行病学调查
2012-08-21马力克艾则孜
马力克·艾则孜
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 检查样品 2010年4月至2010年11月对6个县进行屠宰场采集牛羊肝脏、肺脏,并收集犬的新鲜粪便,记录后置于4℃冰箱中保存待检。
1.1.2 主要试剂 细粒棘球绦虫粪抗原抗体夹心酶联免疫吸附试验试剂盒由新疆畜牧科学院兽医研究所提供,批号:20100525。
1.2 方法
1.2.1 调查对象 根据牧区、半农半牧区等不同养殖方式以及疫情分布情况,选定6个县进行调查。每县调查3个乡每乡3个村,每村调查10户,了解犬、牛、羊的动物养殖、感染状况及防控情况等方面,问卷调查、座谈、走访等调查记录。
1.2.2 牛羊棘球蚴病荷囊情况调查 每县在定点屠宰场检疫不同年龄段的屠宰牛105头,羊105只,牛羊分为2岁以下、2~4岁、5岁以上,3个年龄组,每组分别检查35头(只)牛羊,检查肝、肺棘球蚴病荷囊数,棘球蚴病荷囊数的多少表明其感染强度的强弱。
1.2.3 犬新鲜粪便采集 每县选3个有代表性乡,每乡选3个有代表性村,每村对20条1岁以上当地成年犬(小宠物犬除外),采集新鲜粪便2 g/条,置带盖15 m L离心管中,清楚标记,-20℃保存,送实验室进行检测。
1.2.4 犬的粪便检查 将采集的粪样置于干烤箱中进行无害化处理,70℃、12 h。称取干烤后粪样3~5 g,与1%福尔马林按1∶4的比例混合,取出内含0.5 g粪样的混合液,加入含0.3%Tween-20的1%福尔马林至15 m L,8 000 r/min离心5 min、收集上清即为抗原。
采用细粒棘球绦虫抗原抗体夹心酶联免疫吸附试验方法检测[4],具体步骤参照试剂盒说明书:ELISA板 A1-F1加入保护液,100μL/孔;向 G1-H1加入标准阳性样品,100μL/孔;加标准阴性样品 N1-N30和待检样品,每样双孔,100μL/孔,37℃湿盒孵育1 h;将酶标板拍干,再用洗涤工作液洗涤酶标板,300μL/孔,洗涤3次,拍干。A1-B1加入保护液,100μL/孔;其余孔加羊抗Eg的IgG液,100μL/孔,37℃湿盒孵育1 h;酶标板拍干,再用洗涤工作液洗涤酶标板,300μL/孔,洗涤3次,拍干。A1-B1加入保护液,100μL/孔;其余孔加酶结合物,100μL/孔,37℃湿盒孵育1 h;酶标板拍干,再用洗涤工作液洗涤酶标板,300μL/孔,洗涤5次,拍干;加入显色液,100μL/孔,37℃湿盒孵育30 min,用酶标仪测定在405 nm波长的OD值。
阳性临界值=所有标准阴性样品的平均OD值+3×SD(标准阴性样品OD值的标准差)
阳性:待检样品的平均OD值≥阳性临界值阴性:待检样品的平均OD值<阳性临界值
2 结 果
2.1 羊的感染情况 在6个县共抽查羊604只,检查结果见表1。乌鲁木齐市华菱屠宰场共检查绵羊110只,肝脏感染率为44%、肺脏感染率为14%;昭苏县检查绵羊67只,肝脏感染率为75%、肺脏感染率37%;特克斯县检查绵羊105只,肝脏阳性率为76%、肺脏感染率38%;温宿县共检查绵羊112只,肝脏感染率为26.78%、肺脏感染率14%;乌恰县检查绵羊105只,肝脏感染为25.71%、肺脏感染率25%。肝脏棘球蚴平均感染率为45.58% ,包囊数1~80,包囊大小为0.5~50 mm;肺脏棘球蚴平均感染率为23%,包囊数1~50,包囊大小为0.5~65 mm;棘球蚴病感染率超过60%的有昭苏县、特克斯县。
表1 6县绵羊棘球蚴病调查统计表Tab.1 Infection of echinococcosis in sheep in 6 counties of Xinjiang
2.2 牛的感染情况 在6个县共抽查牛582头,检查结果见表2。乌鲁木齐市华菱屠宰场共检查牛105头,肝脏感染为4%、肺脏感染率0%;昭苏县检查牛57头,肝脏感染率为22%、肺脏感染率16%;特克斯县检查105头牛,肝脏阳性率为32%、肺脏感染率18%;温宿县检查的牛共105头,肝脏感染为0%、肺脏感染率0%;乌恰县检查牛105头,肝脏感染为50%、肺脏感染率29%;巴里坤县检查牛105头,肝脏感染为17%、肺脏感染率8%。肝脏棘球蚴平均感染率为20.83% ,包囊数1~15,包囊大小为0.5~8 mm;肺脏棘球蚴平均感染率为11.83%,包囊数1~8,包囊大小为0.5~8 mm;棘球蚴病感染率50%的有乌恰县。
2.3 犬的感染情况 在6个县共抽查犬1 080条,乌鲁木齐县检测180条犬,阳性数45条,感染率为25%;昭苏县检测180条犬,阳性数31条,感染率为17.22%;特克斯县检测180条犬,阳性数41条,感染率为23%;温宿县检测180条犬,感染数18,感染率为10%;乌恰县检测180条,感染数16,感染率为16.16%;巴里坤县检测犬180条,感染数22,感染率为12%。带虫率17%,感染强度为1~100以上。(表3)
2.4 人感染情况 在2010年6县棘球蚴病发生情况,各县当地防疫站提供的数据。(表4)
表2 6县牛棘球蚴病调查统计表Tab.2 Infection of echinococcosis in cattle in 6 counties of Xinjiang
表3 犬棘球绦虫监测调查统计表Tab.3 Infection of echinococcosis in dog in Xinjiang
表4 2010年6县棘球蚴病发生情况调查表Tab.4 Investigation of Echinococcus infection in 6 countries of Xinjiang,2010
3 讨 论
棘球蚴病在中国主要分布于新疆维吾尔自治区、西藏自治区、青海省、甘肃省、宁夏回族自治区、内蒙古自治区和四川省西部等7省区[5-6],新疆属家畜棘球蚴病重灾区。
棘球蚴病为地方流行性的寄生虫病,本病发生无明显的季节性,南疆一些地区由于地理隔离和自然环境及社会因素的影响,其感染率和感染强度均很低,属于散发性。北疆准葛尔盆地周沿的盆地绿洲区家畜棘球蚴的感染率和感染强度高于南疆塔里木盆地周沿的盆地绿洲区。另外,饲养方式、文化素质及生活习惯对棘球绦虫虫卵的散播有很大影响,且今年来我区对棘球蚴病的防治工作有所放松,如牧区犬随羊群放牧,晚间犬看守羊群。犬、人、家畜接触密切,病犬排除的虫卵易传播给家畜和人,而且患有棘球蚴的家畜脏器不进行处理,犬易吃到,造成循环链较短,发病周期快,成为一些地区棘球蚴病发病率明显回升和高发的主要原因。
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