恶性肿瘤患者化疗前后免疫学指标的变化及临床应用探讨

黄晶

恶性肿瘤患者常伴有机体免疫功能异常，在抗肿瘤免疫效应中细胞免疫比体液免疫起更为重要的作用。为了解恶性肿瘤患者的细胞免疫功能及化疗药对恶性肿瘤患者免疫功能的影响，笔者采用流式细胞仪对100例恶性肿瘤患者化疗前后的T淋巴细胞亚群进行检测和分析。

1 资料与方法

1.1 一般资料 100例患者均为经病理学或细胞学确诊为恶性肿瘤，男63例，女37例，年龄21～79岁，平均53岁。其中恶性淋巴瘤19例，肺癌35例，乳腺癌25例，肠癌13例，胃癌8例。对照组选择本院职工、健康体检者，共60例，男25例，女35例，年龄19 ～76岁，平均52.3岁。

1.2 治疗方法 所有患者治疗前血常规、肝肾功能、心电图均正常，均无免疫系统疾病，在接受本次治疗前1个月未接受化疗、放疗及使用其他影响免疫功能的药物。依据肿瘤不同类型接受不同的化疗方案。药物主要有表阿霉素、5－氟尿嘧啶、长春新碱、顺铂、紫杉类等，化疗前后做CT或MRI判定疗效。

1.3 检测方法 化疗开始前1周及化疗2周期结束后1周分别检测患者外周血 T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+)，B淋巴细胞(CD19+)及 NK细胞(CD3－/CD16+56+)。

所有患者均于清晨抽空腹血1.5 ml，EDTA－2K抗凝，用型号为FACSCalibur(美国BD公司生产)流式细胞仪测定，试剂均采用美国BD公司产品，包括荧光标记单克隆抗体试剂盒，溶血素(FACSLying)等。严格按照说明书处理标本，通过四色荧光微球校准流式细胞仪后，用MultiSET软件获取并分析。

1.4 统计学处理 用PEMS 3.1统计学软件对数据进行统计学处理，计量资料采用均数和标准差(±s)表示，组间比较采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

恶性肿瘤患者化疗前CD3+、CD4+、CD8+均显著低于对照组。CD4+/CD8+较对照组高，差异无统计学意义(P＞0.05)，B细胞高于对照组，差异无统计学意义(P＞0.05)。化疗后CD3+、CD4+细胞升高，CD4+/CD8+比值增高，与治疗前比较差异有统计学意义(P＜0.05);CD8+表达治疗前后差异无统计学意义(P＞0.05);CD3－/CD16+56+表达较化疗前降低，较对照组亦降低，差异均有统计学意义(P＜0.05);CD19+表达治疗前后差异无统计学意义(P＞0.05)。见表1。

表1 两组化疗前后免疫指标检测结果(x ± s，%)

3 讨论

肿瘤的发生、发展以及肿瘤的消退与机体自身的免疫功能状态密切相关，T淋巴细胞在抗肿瘤免疫中引起到了重要作用［1］。T淋巴细胞由不同的亚群组成，不同亚群的T细胞具有不同的白细胞分化抗原(cluster of differentiation CD)，其细胞表面不同的白细胞分化抗原是反映其功能的重要标志，并随着疾病的转归发生变化［2］。体液免疫通常仅在某些情况下起协同作用。近年来，随着免疫学的深入研究，肿瘤与免疫的关系越来越引起临床重视。检测T淋巴细胞亚群及NK细胞活性是临床观察机体细胞免疫功能的重要方法之一。在外周血中，CD3抗原分子通常分布在成熟T细胞表面，故CD3+T细胞数量可代表机体总T细胞数量，CD4+T细胞通常代表T辅助细胞，CD8+T细胞通常代表具有抑制作用的抑制细胞，CD4+/CD8+比值反映了机体免疫功能状态是否稳定，只有两者在适当的比例，才能发挥正常的抗肿瘤作用［3，4］。CD4+/CD8+比例降低说明细胞免疫功能降低，机体存在免疫抑制和免疫调节功能紊乱。恶性肿瘤多存在不同程度的免疫功能低下。国外学者研究发现，恶性肿瘤患者免疫功能的下降与肿瘤细胞分泌的免疫抑制因子(TDSF)有关，TDSF可广泛抑制NK等免疫细胞的活性，是恶性肿瘤患者免疫功能障碍的主要原因之一［5］。

化疗是肿瘤治疗的主要手段之一。化疗药物均为细胞毒性药物，它不仅杀伤肿瘤细胞，对人体正常增殖和分化细胞也有杀伤作用，能够导致淋巴细胞减少。因此，以往人们认为肿瘤患者在化疗的同时机体的免疫功能进一步降低［6］。

本组结果显示，恶性肿瘤患者CD3+、CD4+、CD8+低于对照组，CD4+/CD8+也高于对照组，说明肿瘤患者的细胞免疫处于抑制状态。CD4+/CD8+比值的高低，可提示恶性肿瘤患者预后的好坏，化疗药物有效与对照组结果相一致。化疗后CD3+、CD4+均明显增高，可见化疗可以提高肿瘤患者的细胞免疫功能，但比值＞2.0，仍然提示化疗可致免疫调节功能紊乱。

NK细胞具有非特异地直接杀伤靶细胞的功能，是抗肿瘤免疫的第一道防线［7］。本组化疗后NK细胞继续减少，NK细胞显著低于正常对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)，可能与化疗后检测时间较早，骨髓抑制尚未完全恢复有关。B细胞参与体液免疫，本组肿瘤患者B细胞的表达差异无统计学意义，说明化疗可能对患者的体液免疫功能无明显影响。

综上所述，肿瘤患者免疫功能低下，以细胞免疫损害为主，有效的化疗可使免疫功能得到一定程度的改善，但免疫调节紊乱尚不能得到纠正。这可能会改变以往认为化疗可使免疫功能完全损害的观点。

［1］杨镇．肿瘤免疫学［M］．武汉:湖北科学技术出版社，1998:31－36．

［2］刘莉，丁乾，曹如波，等．恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+调节T细胞的检测及其临床意义［J］．临床肿瘤学杂志，2005，10(4):342．

［3］付尚志．肿瘤的免疫功能研究现状［J］．临床军医杂志，2002，30(5):95．

［4］Yasutomo K．The cellular and molecular mechanism of CD4+/CD8+Lineage commitmeht［J］．J Med Invest，2002，49(1 ～2):1．

［5］Illing R O，Kennedy J E，Wu F．The safety and feasibility of extracorporeal high－imtensity focused ultrasound(HIFU)for the treatment of liver and kidney tumours in a western population［J］．Br J cancer，2005，17:890．

［6］黎建军，徐国良，罗广裕，等．高强度聚焦超声治疗肝左叶癌的临床研究［J］．中国超声医学杂志，2006，22;156．

［7］孙燕．内科肿瘤学［M］．北京:人民卫生出版社，2001:134－137．