高效液相色谱法测定乙肝扶正胶囊中丹参酮IIA的含量

吴德明 董茂臣 唐文君

(哈尔滨华瑞生化药业有限责任公司·150001）

乙肝扶正胶囊补肝肾，益气活血。用于乙型肝炎，辨证属于肝肾两虚证候。临床表现为：肝区隐痛不适，全身乏力，腰膝酸软，气短心悸，自汗、头晕、纳少，舌淡，脉弱。其现行中药部颁标准中未规定含量测定项目，为了更好的控制该品的质量，本文采用高效液相色谱法建立了乙肝扶正胶囊中主要成分丹参酮IIA的含量，该方法简便、快速、灵敏度高，结果准确可靠，可用于该品的质量控制。

1 仪器与试剂

高效液相色谱仪：美国Watets6000E 高效液相色谱仪，Brebz、MillenRidm32 数据处理系统。电子分析天平AB204：梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司。甲醇为色谱纯，其它为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

YWG—C18ODS反相柱(4.6mm*200mm)，粒度5um；流动相：甲醇水(75：25)；检测波长为270nm；流速1.Oml/min。理论板数按丹参酮IIA，峰计算应不低于2000。出峰时间17～21min左右。

2.2 供试品溶液的制备

取乙肝扶正疫囊20 粒，倾出内容物，混匀，取约1g，精密称定，置索氏提取器中，加乙醚适量提取3 小时至溶液无色，将提取液水浴蒸干，残渣加甲醇溶解，溶液转移至25ml 量瓶中，并用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

2.3 对照品溶液的制备

精密称取丹参酮IIA，对照品5mg，置100m1量瓶中，加甲醇溶解，并稀释至刻度，精密吸取10ml，置50ml 量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

2.4 线性关系

取丹参酮IIA，对照品约30mg，精密称定，置50ml 量瓶中，加甲醇适量溶解，并稀释至刻度，摇匀。再精密量取lml、2ml、3ml、4ml、5m1 分别置lOml量瓶中加甲醇稀释至刻度，摇匀，进样10u1 测定，以浓度C(ug/ml)为横坐标，峰面积A（uv.s)为纵坐标，求回归方程，丹参酮IIA，在0.06ug/ml～0.3ug/ml范围内，峰面积与浓度呈良好的线性关系，回归方程为A=3790063.3C+72702 崐(r=0.9997)，见表1。

表1 丹参酮IIA 线性关系考察表

2.5 精密度试验

取同一供试品溶液，重复测定6 次。测得丹参酮IIA，积分值RSD=1.3%

2.6 稳定性试验

取同一供试品溶液，分别在0h、1h、2h、3h、4h 测定， RSD=2.2%

2.7 重现性试验。

取同一批样品6 份测定含量，计算重现性，结果：RSD=1.2%。

2.8 回收率试验

精密称取已知含量的样品0.5g，按供试品溶液制备方法制备溶液，再分别加入已配制好的丹参酮IIA 对照品溶液(0.259mg/m1)，混匀。再按本文色谱条件下测得丹参酮IIA 的平均回收率为100.1%，测得精密度RSD=1.65%。见表2。

表2 回收率试验(n=2)

2.9 乙肝扶正胶囊含量测定结果取乙肝扶正胶囊五批样按2.1 色谱条件测定。丹参酮IIA的平均含量每粒不得低于0.06mg/粒。

3 讨论

（1）根据对乙肝扶正胶囊五批含量测定结果，每粒中含丹参酮IIA，为0.075 mg/粒～0.084mg/粒之间，因此在质量控制中，确定本品每粒中丹参酮IIA，含量应不低于0.06mg/粒。

（2）通过对高效液相色谱法测定乙肝扶正胶囊中丹参酮IIA，含量的研究，证明本方法可行，可以更好的控制该品的质量，填补了部颁标准中无含量测定指标的空白。采用本文方法简便、快速、灵敏度高，结果准确可靠，可用于该品的质量控制。

[1］中国药典2010 版一部.中国医药科技出版社.

[2］王宝琴.中成药质量标准与标准物质研究.中国医药科技出版社，1994.

[3］陈发奎,等.常用中草药有效成分含量测定.人民卫生出版，1997.