生物安全柜安全使用，维护及注意事项

赵利可

昆明市疾病预防控制中心，云南 昆明 650228

1 生物安全柜的结构原理及作用

生物安全柜由箱体、过滤器、风机系统、排气管道及电器控制系统组成。它的作用是：提供对人员、样品和环境的三重保护。

1.1 风机系统

风机在电器系统控制提供风量维持恒定气流流速。

1.2 过滤器

过滤器起到过滤细菌和灰尘颗粒的作用。目前常采用的是对0.3ìm尘埃粒子拥有截流效率为99.99%的HEPA高效过滤器，以及99.9998%的截流效率的ULPA超高效过滤器。后有更佳的过滤效率、更紧密的结构和更大的单位过滤面积，可为工作区域提供相当于ISO3级的洁净度。

1.3 控制和警报系统

安全柜的控制系统用于监控生物安全柜的各项操作数值，及时发现任何故障和误操作，以声光警报通知用户采取措施，并自动采取相应的联锁安全措施。系统带有温度补偿功能的流速传感器，可以测定真实的气流流速，包括进气流、下沉气流和外排气流（B2）；LCD液晶显示屏实时显示气流流速/流量。对气流流速过低或不安全前窗高度，系统都会发出声光警报。

2 生物安全柜依据的标准及级别

2.1 现行的生物安全柜检测主要标准依据有

①美国NSF/ANSI 49—2002《Class II(Laminar Flow)Biosafety Cabinetry》；②JG 170-2005中华人民共和国建筑工业行业标准《生物安全柜》；③欧盟 EN 12469：2000《Biotechnology-Peformance Criteria for Microbiological Safety Cabinets》；④YY 0569-2005 中华人民共和国医药行业标准《生物安全柜》。

2.2 生物安全柜的级别

目前，生物安全柜有一级生物安全柜、二级生物安全柜和三级生物安全柜3中类型。

2.2.1 一级生物安全柜 一级生物安全柜可提供对人员和环境的保护，而不保护样品，它依赖外接通风管中的风机带动气流经排气口HEPA过滤器排出。但目前使用较少，是因为一级生物安全柜不能够保护样品。

2.2.2 二级生物安全柜 由于可提供工作人员、环境和产品的保护，因此应用最广泛。按照《中华人民共和国医药行业标生物安全柜准YY0569-2005生物安全柜》中的规定，二级生物安全柜依照排气方式、循环方式和入口气流风速可分为A1型，A2型，B1型和B2型4个级别。

A1型安全柜中30%的气体通过排气口过滤排出，70%气体通过HEPA过滤器再循环至工作区，前窗气流速度最小量或测量平均值应至少为0.38m/s。

A2型安全柜中30%的气体通过排气口过滤排出，70%气体通过HEPA过滤器再循环至工作区，前窗气流速度最小量或测量平均值应至少为0.5m/s。

B1型70%气体通过排气口HEPA过滤器排除，30%的气体通过供气口HEPA过滤器再循环至工作区。

B2型为100%全排型安全柜，无内部循环气流，可以操作挥发性核放射物和挥发性化学品作为添加剂的微生物实验，又可同时提供化学性和生物性的安全控制。

2.3 三级生物安全柜

生物安全防护等级为4级实验室采用的是三级生物安全柜，其柜体完全气密，通过连接在柜体的手套，俗称手套箱，工作人员才可进行操作，为确保不受污染，试验品需通过双门的传递箱进出安全柜，适用于高风险如进行埃博拉病毒、SARS的相关实验等。

3 生物安全柜年度检测检修

生物安全柜标准规范规定在如下的情况必需做检修或检测：①实验室竣工后、投入使用前；②挪动位置后；③更换配件或滤器后；④年度常规检测。

3.1 生物安全柜年度检测的项目

生物安全柜年度检测的项目可参照JG 170-2005推荐检测项目。

3.2 生物安全柜年度维护的方式

生物安全柜的维护可采用如下的方式

①选择生物安全柜生产厂家或专业维护公司提供的定期或不定期的维保，每年定期对生物安全柜进行检测检修、更换配件并排除故障；

②选择具有检测资质的检测单位进行检测认证，出具具有法律效力的检测报告。

③委托专业公司承担年度维护，定期检修，并由其委托检测单位进行检测。

3.3 生物安全柜年度维护的注意问题

①维护人员必须具有生物安全防护专业知识与装备；②不得打开通风系统，如因故障必须打开，打开之前必须经过甲醛熏蒸消毒，确认已经有效杀灭致病性生物危险因子，并可有效控制滤器所截留的致病微生物溢出、扩散；③从生物安全柜拆卸下来的滤器，需经灭菌处理后才能作为普通废弃物抛弃。

3.4 生物安全柜的安全使用

3.4.1 使用单位的管理层 作为使用单位的管理层首先要高度重视，购买能满足实验室工作需要的防护级别的生物安全柜，安装完毕，经检测认证，出具具有法律效力的检测报告，以确认相关参数在正常的范围之内，方能投入使用；制定后续定期维护检测计划，定期维护检测；建立建全管理制度和操作规程；对操作人员进行培训持证山岗。

3.4.2 操作人员 操作人员是生物安全柜发生安全事故的第一受害者，更要高度重视。持证山岗≠“安全”，定期更换过滤器≠“安全”，定期检测仍然不能完全保证你的“安全”，只有随时保持生物安全柜良好的性能才能真正作到“安全”。那么，怎样才能随时保持生物安全柜良好的性能？操作人员应作到以下几点。

①熟练掌握生物安全柜的性能、检修、结构原理、安全使用和检测等方面的知识。

②掌握生物安全柜当前性能状况，相关参数是否在正常的范围之内；并弄清检测项目和检测标准依据主要指标；上次检修、检测时间，下次应在什么时侯检修、检测；主要部件（特别是过滤器）的更换的情况。对这些基本情况要了如指掌。

③每次使用前要检查生物安全柜性能是否处于良好状态，在确认以后才能使用，一经发现安全隐患，立即停用。

④风速、压差和菌落总数这些指标参数都很重要。对于控制系统无测量和显示风速功能的生物安全柜，建议配置风速仪在每次使用前进行测量；菌落总数每季度作一次检查。

⑤请专业人员更换和维护过滤器。调整控制系统风速仍达不到技术参数时，则更换高效过滤器（一次/1～2年）；定期将粗过滤器中的滤料拆下清洗（一次/3～6个月）。定期用风速仪测量工作室的风速（一次/2个月），如不符合则调整其风速达到正常值。

[1]李劲松.生物安全柜应用指南.原理使用和验证[M].北京：化学工业出版社，2005∶71-90.