CD4+CD25+Tregs在慢性乙型肝炎病毒感染中的作用研究进展

石玉丹 浙江中医药大学 杭州 310053

张永华 杭州市第七人民医院

刘肄辉 浙江省中西医结合医院肝病科

CD4+CD25+Tregs是调节性T细胞的亚群之一,在维持机体内环境稳定、肿瘤免疫监测、诱导移植耐受以及自身免疫性疾病的发生中起重要作用。在感染性疾病病程中，CD4+CD25+Tregs在一定程度上抑制了保护性免疫,造成了感染持续化,但同时也抑制过强的免疫反应,保护宿主免于发生致命的炎症性病理损害。慢性乙肝是一个严重危害大众健康，威胁人们生命的传染病，免疫损害是其主要发病机制。本文就近年来关于CD4+CD25+Tregs在慢性乙型肝炎（CHB）感染中的作用相关研究进展综述如下。

1 CD4+CD25+Tregs概述

CD4+CD25+Tregs起源于胸腺，Sakaguchi等[1]于1995年在未免疫小鼠外周血循环中发现，CD4+CD25+Tregs具有免疫无能和免疫抑制特性。正常情况下，CD4+CD25+Tregs占人外周血细胞的5%~10%[2]。Ramsdell[3]和Sakaguchi[1]等研究小组发现CD4+CD25+Tregs转录因子Foxp3（forkhead box P3）可能在Treg发育及其功能的发挥中起着决定性作用[4]，目前，Foxp3是大多数学者公认的CD4+CD25+Tregs表达的特异标志。也有学者认为，人类的CD4+CD25+Tregs可以通过CD127低表达进行识别[5-7]。CD4+CD25+Treg能够控制自身反应性T细胞的活化与增殖，抑制细胞因子产生与分泌，诱导细胞无能等，在维持机体自身免疫抑制方面的作用机制目前仍不清楚，其可能主要通过细胞间直接接触和分泌细胞因子模式起免疫调节作用[8-9]。

2 CD4+CD25+Tregs在慢性乙肝患者体内分布状况

慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染后的结局取决于宿主的免疫反应，其中也包括CD4+CD25+Tregs。Stoop等[10]在HBV感染中发现CD4+CD25+Tregs的数量与正常人相比有显著性差异，且HBeAg阳性CHB患者外周血CD4+CD25+Tregs水平显著高于HBeAg阴性的CHB患者。这与Nan等[11]的研究相似，Nan等对39例慢性乙肝患者和19例健康者进行对比，发现慢性乙肝组CD4+CD25+Tregs分布频率高于正常组且得出HBV DNA≥10（8）的患者体内CD4+CD25+Tregs水平明显高于 HBV DNA＜10（8）患者。Xu等[12]得出慢性重度乙肝外周血Tregs水平较正常对照有明显升高，慢性轻度乙肝中无明显差异，而慢性乙肝急性期Tregs频率明显低于慢性乙肝患者及正常人，在恢复期Tregs又明显升高，考虑Tregs的抑制作用与IFN-γ分泌减少相关。也有学者认为，慢性乙肝患者外周血中CD4+CD25+Tregs水平与健康对照无差异[13]。

目前对慢性HBV感染患者肝脏组织内CD4+CD25+Tregs的研究，主要通过应用免疫组织化学染色法,检测CHB患者肝组织中Foxp3的表达方式来研究肝脏组织内CD4+CD25+Tregs频率，国内外学者的研究结果基本一致。Stoop等[14]通过测定肝内FoxP3+Tregs，发现慢性乙肝患者肝内存在一定数量的CD4+FoxP3+细胞，但是这些细胞在外周血中不表达CD25，因此，肝内CD4+CD25+Tregs水平高于外周血水平，且与病毒载量呈正相关。杨玉英等[15]检测19例免疫耐受期及12例免疫清除期慢性乙肝患者肝组织中FoxP3的表达，同时对照6例正常肝组织，发现免疫耐受期及免疫清除期患者肝组织中FoxP3较正常肝组织明显增加，而免疫清除期也明显高于免疫耐受期。

3 CD4+CD25+Tregs在慢性乙肝免疫发病机制中的作用

在乙肝病毒感染中，细胞增殖和分泌干扰素等抗病毒因子是机体免疫系统清除乙肝病毒的重要途径，Tregs可以抑制HBV特异性的T细胞增殖和CTL 反应[10,13]。

徐东平等[16]观察发现，去除CD4+CD25+Tregs后，慢性乙肝患者PBMC在HBV抗原刺激下IFN-g产生量和细胞增殖反应均明显增高，而加入Treg后，患者PBMC对HBV抗原刺激的细胞增殖能力受到显著抑制，认为HBV感染能够诱导产生抗原特异性的CD4+CD25+Tregs,抑制抗原特异性T细胞反应，影响对HBV感染的清除，造成感染的持续化。Stoop等[10]用HBcAg刺激外周血单个核细胞中CD25+细胞缺失的慢性乙肝患者，发现可以促进效应性T细胞的增殖，说明慢性乙肝患者外周血CD4+CD25+Tregs水平升高可能会促进病毒的持续复制，导致感染慢性化，并且发现Tregs水平增加能够抑制DC及其他抗原递呈细胞的成熟，抑制T细胞的刺激能力。CD4+CD25+Tregs水平与HBV DNA水平成正相关，有学者认为，病毒复制活跃的慢性乙肝患者，可能是通过CD4+CD25+Tregs的免疫抑制效应促进病毒的复制[17]。张恒辉在研究CD4+CD25+Treg与慢性乙肝时，发现慢性乙肝患者CD4+CD25+Tregs细胞表面糖皮质激素诱导的TNFR相关基因表达增高，表明慢性乙肝患者的CD4+CD25+Tregs处于抑制功能的活化状态，这也是促使乙肝慢性化的原因之一[18]。福军亮等[19]观察不同类型乙肝患者外周血CD4+CD25+Tregs水平，显示急性乙肝患者外周血中CD4+CD25+Tregs水平较低，并认为可能是因为急性乙肝患者外周血CD4+CD25+Tregs迁移到肝脏中发挥免疫作用，保护宿主免于发生过强的抗病毒反应带来致命的炎症性病理损害。

4 慢性乙肝抗病毒治疗与CD4+CD25+Tregs

抗病毒治疗有利于抑制HBV复制，减少肝脏损伤，抑制并减缓疾病进展。目前，抗病毒治疗是治疗HBV的主要方法之一，抗病毒药物主要有干扰素（IFN）-α和核苷酸类似物。

Sprengers等[20]对应用干扰素治疗的HBeAg阳性CHB患者进行研究，IFN完全应答者HBV特异性T细胞增殖能力与无反应者比较有明显增强，提示在IFN-α治疗时与治疗后，CD4+CD25+Tregs在HBV持续感染中起重要作用。IFN-α能够改善患者的免疫功能，促进T细胞表达IFN-γ，增强的IFN-γ能够抑制CD4+CD25+Tregs活化和产生，并且IFN-α能增强CD8+细胞毒性T细胞反应，上调CTL细胞水平，增强Th1反应，增强的Th1反应可能抑制了Tregs的数量和功能[21]。

替比夫定在抗HBV DNA复制过程中能够降低慢性乙肝患者外周血CD4+CD25+Tregs水平，使Tregs对乙肝特异性T细胞的抑制作用得到恢复，从而使机体特异性抗病毒免疫应答得到改善[22]。Stoop等[23]应用阿德福韦抗病毒治疗CHB，治疗过程中，随着病毒载量的下降外周血CD4+CD25+Tregs水平也相应下降，同时伴随HBeAg特异性IFN-γ的产生或增殖水平的升高，免疫应答得到部分恢复。但也有学者认为阿德福韦的抗病毒作用主要是直接抑制病毒复制，与CD4+CD25+Tregs无关[17]。因此，深入研究慢性乙肝CD4+CD25+Tregs对于指导抗病毒治疗具有重要价值。

5 结 语

目前，有关CD4+CD25+Treg的免疫抑制作用研究已经达成共识，即在慢性HBV感染中CD4+CD25+Tregs介导了对HBV特异性T细胞的抑制,这种免疫抑制不利于CTL对病毒的清除,进一步造成乙肝的慢性化，但对CD4+CD25+Tregs具体作用机制还需要更详尽的研究。

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