小型猪特异性麻醉颉颃剂对小型猪血清一氧化氮一氧化氮合酶丙二醛超氧化物歧化酶的影响

姜 胜，于世明，谭丽娟，范宏刚，王洪斌

（东北农业大学动物医学学院，黑龙江 哈尔滨 150030）

经过前期研究课题组开发出小型猪复合麻醉剂（XFM）［1］，近期课题组又开发出了以阿替美唑、氟马西尼、纳洛酮等为主要成分的小型猪特异性麻醉颉颃剂，保障XFM的安全性及可控性。本试验通过检测小型猪血清一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）浓度的变化，判断小型猪特异性麻醉颉颃剂对机体的氧化损伤程度，进而评价小型猪特异性麻醉颉颃剂对XFM的特异性颉颃效果，以及小型猪复合麻醉颉颃剂组方的合理性及临床安全性。

具有高度活性的氧自由基分子不仅能造成蛋白质、DNA损伤，诱发癌症和囊性纤维化［2-3］，还能诱导脂质过氧化反应，使多不饱和脂类发生裂解，膜结构发生破坏，导致细胞功能障碍［4］，并产生能够反映脂质过氧化的程度，且被认为是检测组织过氧化的生物学指标的 MDA［2，5］。不稳定自由基 NO，与正超氧阴离子（O-2）作用时可形成过氧化亚硝基阴离子（ONOO-），并进而分解为毒性极强的羟自由基（OH-）和 NO-2自由基［6］，在体内引起多方面的损害如脂质过氧化［7］。SOD是机体抗脂质过氧化酶促防御系统中的一个重要酶，它不仅能有效清除生物氧化产生的超氧阳离子自由基，并有终止自由基链锁反应的作用［8］，还能减少 ONOO-形成［9］，故可减轻NO的不利作用。

1 材料与方法

1.1 实验动物 中国实验用小型猪14头，16～18月龄，体重49.8±5.2kg，购于中国农业大学实验用小型猪繁育基地，临床检查健康，营养状况良好。

1.2 试验材料 XFM（东北农业大学外科教研室，批号：20100821）；小型猪特异性麻醉颉颃剂（东北农业大学外科教研室，批号：20100824）。NOS、NO及考马斯亮蓝蛋白含量测定试剂盒，购自南京建成生物工程研究所；AvantiTM30Centrifuge高速冷冻离心机、7230分光光度计等。

1.3 试验方法 14头小型猪禁食12h，随机分为实验组和对照组，每组7头。两组动物麻醉之前均采前腔静脉空白血（记为0min），采血完成后立即注射XFM并计时。至30 min时，采前腔静脉血（记为30min），此后试验组立即注射小型猪特异性麻醉颉颃剂，对照组则注射等量生理盐水。至1、2、8h和1、3、7d时分别进行前腔静脉采血，并记录各项生理反射指标的恢复时间，直至两组动物均能行走为止。采集的血样室温静置1h，3000r／min离心分离血清，置于-80℃冰箱内冷冻保存，待检。

2 试验结果

2.1 苏醒时间 如表1所示，在注射颉颃剂后，试验组内各生物反射指标的恢复时间比对照组短且差异显著（P＜0.05）。

2.2 抗氧化能力测定结果 具体结果见表2。注射麻醉剂后，小型猪血清MDA及SOD呈现无规则变化，且变化趋势不明显（P＞0.05），血清NOS及NO在注射XFM 30min后极明显降低（P＜0.01），然后逐渐回升，60min后恢复正常。小型猪在注射XFM颉颃剂后与对照组相比差异不显著（P＞0.05）。

表1 两组苏醒时间比较（n＝7）

表2 抗氧化能力监测结果（n＝7）

3 讨论

从苏醒时间看，本试验表明，注射颉颃剂后，小型猪生理反射恢复的时间短，苏醒效果明显，能够达到较快苏醒的目的。

许多麻醉药物的效应和毒性均可抑制酶的活性，促使氧自由基、脂质过氧化物（Lipid peroxide，LPO）、MDA 等体液因子的释放增加［10］，因此需要拮抗剂抑制麻醉药的中枢抑制作用，控制麻醉时间和浓度，逆转麻醉药的不良作用和对机体的损伤。从抗氧化结果看，小型猪血清SOD、MDA指标变化均无明显趋势，这说明小型猪特异性麻醉颉颃剂没有产生明显的过氧化损伤，分析原因可能与纳洛酮有一定关系：国外一些研究显示，纳洛酮在细胞水平具有抗休克作用，主要是因为其具有稳定溶酶体膜，明显抑制嗜中性粒细胞释放O-2的能力［11］，并且体外试验发现，纳洛酮能抑制脂质过氧化反应的速率，尤其是可能在铁离子催化的脂质过氧化反应中充当抗氧化剂［12］。小型猪血清NO及NOS在麻醉后30 min显著降低，然后逐渐回升，从这一过程中来看与徐瑞芬等［13］报道的全麻能明显抑制NOS的活性，降低NO的生成这一结果一致。由此分析，催醒过程中阿替美唑、氟马西尼、纳洛酮等特异性拮抗剂［14］与XFM竞争同一受体，从而拮抗麻醉剂的药理作用，并没有引起机体产生大量自由基，对小型猪的抗氧化能力没有明显影响。

4 结语

综合试验结果表明，小型猪特异性麻醉颉颃剂能够很好的拮抗XFM麻醉效果，产生较快的苏醒效果，在催醒过程中对小型猪没有产生明显的过氧化损伤，临床安全性较好。

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