抗TYLCV番茄新品种西农2011的选育

李继纲梁燕闫见敏郑戌翔孙亚东

（西北农林科技大学园艺学院，陕西杨凌 712100）

1 选育过程

西农2011亲本选育始于2006年，母本R015是以抗番茄黄化曲叶病毒的TY52（Ty-1）与粉色、大果（单果质量250～300 g）、果实硬度高、中晚熟自交系FTI1419A-3经过5代回交转育，育成的抗 TYLCV，大果，生长势旺盛，综合性状优良的自交系。父本 R019是利用引进的抗TYLCV的抗源材料99S-C-39-20-11-24-17-0（Ty-3），经6代回交转育，将抗病基因转育到粉色、大果、早熟、有限生长类型、综合性状良好的 FTD1401A-1自交系中育成的抗TYLCV，大果，早熟的优良自交系。

2009年以R019为父本，以回交转育的FTI1419A-3为母本配制杂交组合25个，通过TYLCV抗性分子标记鉴定，田间抗性鉴定以及果实性状、生长势和综合性状进行综合评价，筛选出优良组合，2009～2011年参加陕西省品种区域试验和生产试验示范，2011年5月通过陕西省农作物品种审定委员会认定。

2 TYLCV抗性分子标记鉴定

2.1 材料

9份番茄试验材料由西北农林科技大学园艺学院番茄育种课题组提供。

2.2 方法

2.2.1 引物 番茄抗黄化曲叶病毒病Ty-1基因的CAPS标记引物参照于力等（2008）的设计，CAPS F：5′-TAATCCGTCGT TACCTCTCCTT-3′；CAPS R：5′-CGGATGACTTCAATAGCAATGA- 3′。Ty-3基因的 SCAR标记引物参照许爽等（2009）的设计，SCAR F：5′-GGTAGTGGAAATGA TGCTGCTC-3′；SCAR R：5′-GCTCTGCCTATTGTCCCATATATAACC-3′。

2.2.2 PCR扩增、酶切体系与电泳检测 DNA提取参照Williamson等（1994）的方法。PCR反应总体系为 25 μmol·L-1，包括：模板 DNA 2.0 μL，10×PCR Buffer 2.0 μL，25 mmol·L-1MgCl22.0 μL，2.5 mmol·L-1dNTPs 2 μL，引物（20 μmol·L-1）各 1 μL，TaqDNA polymarase（5 U·μL-1）0.2 μL，终体积用超纯水加至25 μL。PCR反应程序为：94 ℃预变性5 min，然后94 ℃变性1 min，Ty-1引物64.6 ℃退火，Ty-3引物50 ℃退火1 min，72 ℃延伸90 s，共35个循环，72℃延伸10 min，扩增产物在4 ℃保存。取PCR产物5 μL，于1.5%琼脂糖凝胶电泳，观察结果。酶切体系为扩增产物10 μL加入10 U的TaqI酶1 μL，Buffer 2 μL，终体积用超纯水加至25 μL。65 ℃保温1.5 h。酶切产物于1.8%琼脂糖胶在电压5 V·cm-1条件下电泳1 h，EB染色，Bio-RAD凝胶成像系统拍照。

2.3 结果与分析

2.3.1Ty-1基因CAPS引物扩增和酶切结果 由图1-a可看出1号、2号、3号、4号、5号、KN、22号、46号均扩增出398 bp的特异片段。PCR产物经TaqI酶切产生多态性（图1-b），1号、2号、3号、4号、KN酶切后产生了3个特异片段，大小分别为398、303 bp和95 bp，均为抗病杂合基因型。5号酶切后只产生了303 bp和95 bp 2个特异片段，为抗病纯合基因型。22号、46号不能被酶切，为感病材料。21号无扩增条带。

图1 Ty-1基因CAPS引物扩增产物及Taq I酶切结果

2.3.2Ty-3基因SCAR引物扩增结果 由图2可看出：1号、2号、3号、4号、KN均扩增出630 bp和320 bp的特异片段，为杂合抗病，且含有Ty-3a基因。21号只扩增出630 bp条带，为纯合抗病类型，5号、22号、46号只扩增出320 bp条带，不含Ty-3基因。

图2 Ty-3基因SCAR引物扩增结果

3 选育结果

3.1 区域试验

2010～2011年进行区域试验，试验地点为白水、源县、阎良及威阳，2月下旬播种，小区面积 5.25～45.00 m2，随机区组排列，3次重复，每重复30株。以金棚1号为对照。留4穗果统计产量。2010年 4个试验点西农2011平均每667 m2产量为7 667.2 kg，较对照金棚 1号增产 2.7%；2011年 4个试验点平均每667 m2产量为 7 261.9 kg，较对照增产 31.6%（表1）。

表1 西农2011区域试验产量结果

3.2 生产试验

2011年在杨凌、扶风、白水、三原县和宝鸡 5个试验点进行生产试验，2月下旬播种，面积180～240 m2，采用对比法，不设重复，每个品种500 株。在所有试验点中，西农 2011产量均高于对照。西农2011平均每667 m2产量为7 609.9 kg，比对照金棚1号增产 12.34%（表2）。

表2 西农2011生产试验产量结果

3.3 品质

2011年经陕西省农产品质量监督检验站测定，西农 2011可溶性固形物含量 6.5%，总糖4.10%，总酸0.504%，VC 180.4 mg·kg-1，品质优于对照金棚1号（5.5%，2.88%，0.475%，105.0 mg·kg-1）。

3.4 抗病性

2011年5月经西北农林科技大学植物保护学院田间调查，西农2011的TYLCV病情指数为1.57，ToMv病情指数1.81，叶霉病病情指数3.04，枯萎病病情指数2.90，其综合抗性特别是对TYLCV和枯萎病的抗性强于对照金棚1号（表3）。

表3 西农2011田间抗病性调查

4 品种特征特性

中早熟，无限生长类型，植株生长势旺，连续坐果能力强，叶片大，叶色绿，丰产性好，4穗果每667 m2产量7 500 kg。果实高圆，粉红色，着色均匀，色泽鲜亮，品质佳，大果型，单果质量 260～280 g，大小均匀。果实硬度好，耐贮运，货架寿命长。田间调查表明对番茄黄化曲叶病毒病（TYLCV）和枯萎病的抗性强于对照金棚1号。适合秋延、越冬及早春的日光温室、塑料大棚等栽培，全国喜食粉果地区均可种植。

于力，朱龙英，万延慧，杨少军，朱为民，薛林宝.2008.多重PCR技术鉴定番茄Ty-1和Mi基因.分子植物育种，6（1）：165-169.

许爽，褚云霞，张辉，万延慧，朱龙英，朱为民.2009.多重PCR 技术鉴定番茄Ty-2和Ty-3基因及田间验证.分子植物育种，7（5）：954-958.

Williamson V M，Ho J Y，Wu F F，Miller N，Kaloshian I.1994.A PCR-based marker tightly linked to the nematode resistance gene，Mi，in tomato.Theor Appl Genet，87：757-763.