胃癌血清及骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA联合检测的意义

刘 羽 焦志凯 李 勇 范立侨 赵 群 郝英杰 檀碧波

(河北医科大学第四医院外三科，河北 石家庄 050011)

胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一，其病死率居各种恶性肿瘤之首。早期发现、早期诊断对胃癌的防治具有重要意义。目前胃癌主要依靠胃镜及活检病理确诊，有一定痛苦，患者不易接受，且不适合对大样本高危人群动态观察，血清、血浆肿瘤标志物由于检查方便、快速、无创，易于被患者接受，已成为最方便、最广泛应用于临床的辅助检查方法。近年来，肿瘤标志物的研究已成为防治胃癌的热点〔1～3〕，但对其报道一般仅限于患者的外周血，对胃癌患者骨髓的研究尚未见报道，本研究选用癌胚抗原(CEA)、糖类抗原 72-4(CA72-4)、胃癌相关抗原(MG7-Ag)三种肿瘤标志物，进行胃癌患者血清及骨髓中三种肿瘤标志物的检测，分析其单项、联合检测的意义，为临床早期诊断胃癌提供依据。

1 材料与方法

1.1 研究对象 选取河北医科大学第四医院外三科2009年10月至2010年12月入院的胃癌患者61例，均行根治性手术切除，未接受过放、化疗。其中男49例，女12例，年龄30～76〔平均(59.51±9.30)〕岁。取血清及骨髓为研究对象，均得到患者或委托人同意并签字。正常组标本均来自健康志愿捐献者，共计32例。

1.2 实验试剂与仪器 CEA放射免疫分析试剂盒(北京北免东雅生物技术研究所)，MG7-Ag ELISA试剂盒(Altru Biomedical Inc USA)，CA72-4 ELISA 试剂盒(Altru Biomedical Inc USA)。超低温冰箱(日本SANYO MDFU50V)，酶标仪(澳大利亚biocell ht2)，恒温水温箱(温州永强医疗器械厂)，放射免疫γ计数器(上海原子核研究所日环仪器一厂SN-684型)。

1.3 方法

1.3.1 外周血及骨髓采集方法

1.3.1.1 外周血采集 术前由外周静脉取血3 ml，不加抗凝剂，离心机2000 r/min离心10 min，分离上清储存至低温冰箱备用。

1.3.1.2 骨髓采集 以骨髓检测常用的髂前上棘穿刺法取髓3 ml，不加抗凝剂，离心机2000 r/min离心10 min，分离上清储存至低温冰箱备用。

1.3.2 CA72-4、MG7-Ag、CEA检测 ELISA法检测外周血及骨髓中CA72-4、MG7-Ag的含量，RIA法检测外周血及骨髓中CEA的含量。

1.3.3 结果判定 根据试剂盒说明书，CA72-4、MG7-Ag均以＞6 U/ml为阳性表达，CEA＞20 ng/ml为阳性表达。

1.4 统计学方法 应用SPSS10.0统计软件，结果以±s表示，采用两样本均数比较的t检验、χ2检验、相关分析等方法。

2 结果

2.1 胃癌患者与正常人血清及骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量比较 胃癌患者血清及骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量明显高于相应的正常组(P＜0.01);胃癌患者骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量与胃癌血清中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量对比差异无显著性(P＞0.05)，正常骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量与正常血清中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量对比差异无显著性(P＞0.05)。见表1。

表1 各组血清及骨髓中 CA72-4、MG7-Ag、CEA含量(±s)

表1 各组血清及骨髓中 CA72-4、MG7-Ag、CEA含量(±s)

与正常组比较:1)P＜0.01

组别 n CEA(ng/ml) CA72-4(U/ml) MG7-Ag(U/ml)血清正常组 32 11.52±6.75 2.85±1.56 3.21±2.56胃癌组 61 29.73±35.521) 17.37±29.611) 21.76±42.011)骨髓正常组 32 10.58±8.24 3.05±1.16 3.22±1.98胃癌组 61 34.82±35.501) 17.81±23.201) 25.96±43.321)

2.2 胃癌患者血清及骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA单独及联合检测的阳性表达 胃癌血清及骨髓检测阳性率在单一指标检测和联合检测均高于正常组，差异有统计学意义(均P＜0.01)。胃癌血清三者联合阳性率较单一指标CEA、CA72-4为高;胃癌骨髓三者联合阳性率均高于单一指标，差异有统计学意义(均P＜0.05)。胃癌血清、骨髓三者联合检测分别为70.49%、78.69%，虽较二指标联合检测阳性率有所升高，但差异无统计学意义。见表2。

表2 各组血清及骨髓CEA、CA72-4、MG7-Ag单一检测和联合检测的阳性表达情况〔n(%)〕

2.3 胃癌患者血清及骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量的相关性分析

2.3.1 胃癌患者血清中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量的相关性分析 胃癌患者血清中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量两两相比均存在显著相关。CA72-4含量与CEA含量呈明显正相关(r=0.722，P＜0.01);MG7-Ag含量与CEA含量呈明显正相关 (r=0.745，P＜0.01);CA72-4含量与MG7-Ag含量呈明显正相关(r=0.921，P ＜0.01)。

2.3.2 胃癌患者骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量的相关性分析 胃癌患者骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量两两相比均显著相关。CA72-4含量与CEA含量呈明显正相关(r=0.826，P＜0.01);MG7-Ag含量与CEA含量呈明显正相关(r=0.906，P＜0.01);CA72-4含量与 MG7-Ag含量呈明显正相关(r=0.862，P ＜0.01)。

2.4 CA72-4、MG7-Ag、CEA各自分别在胃癌患者血清及骨髓中含量的相关性分析 CA72-4在胃癌患者血清和骨髓中的含量呈明显正相关(r=0.871，P＜0.01);MG7-Ag在胃癌患者血清和骨髓中的含量呈明显正相关(r=0.973，P＜0.01);CEA在胃癌患者血清和骨髓中的含量呈明显相关(r=0.757，P＜0.01)。

3 讨论

CA72-4属糖蛋白类癌胚抗原，由乳腺癌肝转移细胞的细胞膜成分免疫小鼠所得，对恶性肿瘤特异性高，在健康人和良性疾病患者血液中极少出现，对癌症的正确诊断具有一定价值，文献报道其阳性检测率为36% ～94%〔4〕;MG7-Ag是由鼠源性抗人胃癌单克隆抗体MG7发现的胃肠道肿瘤相关抗原，亦属糖蛋白抗原，对胃癌有较高的敏感性和特异度〔5，6〕;CEA是研究较为成熟的肿瘤标志物，在诊断、监测预后和指导治疗中均有一定意义，且具有价廉等优点，适用于消化道肿瘤的联合检测及对比研究〔7〕。本研究结果显示胃癌患者血清中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量明显高于相应的对照组，与文献报道一致。同时我们还检测了胃癌患者骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA的含量，旨在为肿瘤诊断寻找新的领域，结果显示胃癌患者骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量亦明显升高，可能的解释为:抗原物质经血液循环进入造血系统;骨髓中有转移的癌细胞或形成转移灶，进而产生抗原物质。结果还显示CA72-4、MG7-Ag、CEA在胃癌血清、骨髓中存在明显的正相关性，说明骨髓中有着与血中类似的表达趋势，因此，检测骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量对胃癌诊断也具有一定价值。

单一检测某项肿瘤标志物有一定的局限性，因此近年来许多学者着重于联合检测肿瘤标志物，以提高诊断的敏感性和特异性，其中 CEA、CA724、MG7-Ag 二二联合检测常见报道〔8〕，但三种指标的联合检测在文献上并不多见。我们将CEA、CA724、MG7-Ag进行联合检测，发现其阳性率均高于70%，且其含量两两比较均显著正相关，提示它们在产生和分泌的机制上可能有共同之处，在胃癌的侵袭转移中可能发挥着类似或协同的作用，同时联合检测时相互之间可能会有互补作用，从而提高阳性率并保持一定的特异性。

总之，本研究发现联合检测肿瘤标志物具有提高胃癌阳性检出率的优点，较单一指标具有优势。但本研究样本较小，应进一步扩大研究规模，以期为联合检测诊断胃癌提供依据。

1 周 琦，张 琼，魏 来.联合检测 CA19-9、CEA、CA72-4、MG-Ag对胃癌的诊断价值〔J〕.世界华人消化杂志，2010;18(25):2698-701.

2 Bain GH，Petty RD.Predicting response to treatment in gastroesophageal junction adenocarcinomas:combining clinical，imaging，and molecular biomarkers〔J〕.Oncologist，2010;15(3):270-84.

3 Cappellani A，Zanghi A，Di Vita M，et al.Clinical and biological markers in gastric cancer:update and perspectives〔J〕.Front Biosci，2010;2:403-12.

4 李建刚，陈 忠，刘 云，等.CEA、CA19-9、CA72-4、MG-Ag单项及联合检测对诊断胃癌的临床价值〔J〕.同位素，2002;15(1):58-60.

5 Chen Z，Hong L，Liu L，et al.Monoclonal antibody MG7 as a screening tool for gastric cancer〔J〕.Hybridoma，2010;29(1):27-30.

6 黄立群，郭光华，黄杰雄，等.血清肿瘤标志物MG7Ag在胃癌诊断中的意义〔J〕.中国医师杂志，2002;4(6):691-2.

7 Kumar Y，Tapuria N，Kirmani N，et al.Tumour M2-pyruvate kinase:a gastrointestinal cancer marker〔J〕.Eur J Gastroenterol Hepatol，2007;19(3):265-76.

8 郭成业，闫 春，于文军，等.联合检测血清CA72-4、CA19-9和CEA对胃癌临床价值的探讨〔J〕.中国肿瘤临床，2000;27(10):776-7.