不同贮藏条件对桃仁饮片酸败度及苦杏仁苷含量的影响

兰志琼 卢先明 张丽娟 孙雪梅 蒋桂华

1.成都中医药大学药学院 中药资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培育基地，四川 成都 611137；2.石家庄四药有限公司，河北 石家庄 050035

桃仁为蔷薇科植物桃Prunus persica（L.）Batsch或山桃Prunus davidiana（Carr.）Franch.的干燥成熟种子[1]，为常用中药，具有活血祛瘀、润肠通便之功效，用于经闭、痛经、症瘕痞块、跌扑损伤、肠燥便秘，是妇科要药[2]。

同其他富含油脂的果实种子类饮片一样，桃仁在贮藏中极易发生泛油、虫蛀、霉变、变色等变质现象。但是，目前桃仁的研究工作主要集中在化学成分及药理学领域，贮藏养护的相关研究甚少，亟待加强这方面的研究工作，保障临床用药的安全性、有效性和稳定性。桃仁等易泛油，饮片在贮藏中易产生酸败现象，酸败不仅导致药材产生一定的毒性，同是还影响饮片中有效组分油酸和亚油酸的含量，故酸败度是评价桃仁等易泛油饮片质量的重要指标；苦杏仁苷在《中国药典》2005年版一部[1]196-197、《中药学》[2]和日本汉方制剂规格试验法[3]中，均被规定为质量评价的指标成分。故本文初步考察2年贮藏期内不同贮藏条件下桃仁饮片酸败度及苦杏仁苷含量的变化规律，为进一步开展其贮藏养护方法的研究提供一定的科学依据。同时，通过对桃仁饮片的贮藏养护的系统研究，为今后易泛油类饮片的贮藏养护研究及实践奠定一定的基础。

1 仪器与试药

桃仁饮片于2008年4月30日购自成都市荷花池中药材市场，经成都中医药大学药学院卢先明教授鉴定其原药材为蔷薇科植物桃Prunus persica（L.）Batsch的干燥成熟种子。

远红外辐射干燥箱（上海阳光试验仪器有限公司，766-2），海尔卧式低温设备冷柜（青岛海尔股份有限公司，DB255-LT/100LT），真空干燥箱 （上海森信实验仪器有限公司，DZG-6090型），电热鼓风干燥箱（上海实验仪器厂有限公司，202-2型），高效液相色谱仪及其配套工作站（美国Agilent公司，1100型），电子天平（上海精密科学仪器有限公司，YP601N），紫外-可见分光光度仪 （上海天美科学仪器有限公司，UV1100）。

乙腈（色谱纯，美国Fisher公司），水（超纯水，Milipore制备），白酒（重庆江津牌60°高粱酒，重庆江津酒厂有限公司），其余试剂均为分析纯。

苦杏仁苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110820-200403）。

2 方法与结果

2.1 不同贮藏条件

前期预实验研究结果表明：预处理方法、温度、对抗剂和包装材料是影响桃仁饮片贮藏养护效果的主要因素。本文以正交设计试验法来初步考察不同贮藏条件对桃仁饮片酸败度及苦杏仁苷的影响。将药材整理去杂质，平均分为11组，每组1.5 kg。其因素水平设计见表1，具体分组见表2。

表1 桃仁贮藏条件因素水平表

远红外干燥法：将桃仁药材均匀平铺于托盘中，厚度不超过10 mm，50℃下远红外干燥处理10 h，冷却备用。

60Co-γ辐照灭菌法：将药材桃仁经60Co-γ射线辐照30 min，辐射量8 kGy，处理后备用。

间歇冷冻法：将药材用厚质药用聚乙烯薄膜封口袋包装，放于海尔卧式低温设备冷柜，温度设为-20℃，冷冻5 d后取出，并常温保存5 d，再放入冷柜中，冷冻5 d，取出，常温保存。

常温（21～30℃）：库房自然放置。阴凉（11～20℃）：空调室。

低温（0～10℃）：冰箱模拟冷库。

明矾对抗同贮法：将明矾粉碎成小块，与桃仁以1∶7的重量比混合并搅拌均匀，装袋。

滑石对抗同贮法：将滑石粉碎成小块，与桃仁以1∶7的重量比混合并搅拌均匀，装袋。

酒精对抗同贮法：将预处理后的药材，在敞口塑料箱内铺一层药，用95%的酒精喷洒一层，每10 kg药材用酒精250～400 μL。药材要铺薄，喷洒酒精要均匀。将喷洒后的药物用手反复拌匀，然后装袋。

2.2 酸败度检查

2.2.1 油脂的提取 取桃仁20 g，研碎成粗粉，置索氏提取器中，加正己烷50 μL，置水浴上加热回流2 h，放冷，用3号垂熔漏斗滤过，滤液置水浴上（约55℃）减压回收溶剂至尽，即得。

2.2.2 酸败度测定方法 按《中国药典》2005年版ⅨP酸败度测定法[1]附录59分别测定各组酸值和羰基值。结果见表3、4。

由表3、4实验结果可知，在2年贮藏期内，随着贮藏时间的延长，各组桃仁饮片的酸值和羰基值均呈现明显的上升趋势。其中，第1、7、10、11组饮片酸败最为明显，24个月后其酸值均高达7.0以上，特别是第11组，其酸值已超过药典限量规定 （10.0）；各组羰基值贮藏2年后虽均符合药典标准，但第10、11组升高趋势特别明显，已超过7.80。

表2 桃仁贮藏养护条件实验研究分组

表3 贮藏期间桃仁酸值测定结果

表4 贮藏期间桃仁羰基值测定结果

2.3 苦杏仁苷含量测定[1]

2.3.1 色谱条件 色谱柱 Hypersil ODS2（4.6 mm×150 mm，5μm），检测波长为 210 nm，柱温度为 25℃，流动相为乙腈-水（11∶89），流速1 μL/min，理论板数按苦杏仁苷峰计算应不低于2 000。

2.3.2 对照品溶液的制备 精密称取苦杏仁苷对照品适量，置10 μL的容量瓶中，加甲醇溶解，并定容至刻度，配制成含苦杏仁苷0.5 mg/μL的对照品溶液。

2.3.3 供试品溶液的制备 取干燥的桃仁药材粉末约0.2 g，精密称定，置50 μL带塞锥形瓶中，加甲醇约20 μL，超声提取30 min，放至室温后，滤过，用甲醇于25 μL的容量瓶中定容。0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液，即得。

2.3.4 样品测定 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μL，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定。按外标法计算苦杏仁苷含量。见表5。

表5 贮藏期间桃仁苦杏仁苷含量测定结果（%）

由表5实验结果可知，用于贮藏研究的桃仁饮片苦杏仁苷含量为2.27%，达到《中国药典》2005年版的要求（不低于1.5%）。在2年贮藏期内，随着贮藏时间的延长，各组桃仁饮片的苦杏仁苷含量均呈现下降趋势。其中，第8、9组饮片苦杏仁苷含量降低趋势相对较慢，贮藏18个月，其苦杏仁苷含量仍然合格。第1、3、7、10、11组饮片降低最为明显，贮藏2年后甚至降至0.30%以下。

3 讨论

在2年贮藏期间，随着贮藏时间的推移，各贮藏条件下，桃仁饮片的酸值和羰基值均呈现上升趋势，而苦杏仁苷含量呈现明显的下降趋势。其中，尤以麻袋或纸箱包装、常温条件下贮藏的的桃仁药材（第1、7、10、11组）其变化趋势最为明显。而以真空包装或低温条件下贮藏的桃仁饮片（第8、9组）其酸败程度较轻，苦杏仁苷含量降低较慢。可见，桃仁饮片应以真空包装，在低温条件下贮藏；同时，实验结果也表明桃仁饮片的有效使用年限亟待研究。

贮藏2年后，经磷化铝熏蒸的桃仁饮片（第11组）的酸值和苦杏仁苷均未达到《中国药典》2005年版标准。可见，目前常用的化学养护法对贮藏桃仁饮片效果较差，且该方法会污染中药及贮藏环境，应予以淘汰。亟待通过系统的科学研究，寻找适宜桃仁等富含油脂易泛油中药饮片安全、绿色、有效的贮藏新方法，保证该类中药临床用药的有效性、安全性和可控性。

本文仅研究了桃仁饮片2年贮藏期内桃仁饮片酸败度及苦杏仁苷含量的变化规律，接下来的研究应体现在延长贮藏时间，增加研究对象，建立饮片性状、药效学、安全性及贮藏成本等多指标综合评价系统上，筛选桃仁、苦杏仁、郁李仁、柏子仁等富含油脂易泛油类中药饮片的适宜包装贮藏方法及条件，为临床提供安全、有效、质量稳定的中药。

[1]国家药典委员会.中国药典[S].一部.北京：化学工业出版社，2005.

[2]张廷模.中药学[M].北京：高等教育出版社，2002：265.

[3]原田正敏．汉方生药制剂品质评价[M]．东京：广川书店株式会社，1992：76．