干化学法与尿沉渣镜检检测尿中白细胞的比较分析
2012-07-02陈亚平
陈亚平
尿液中有形成分的检测,是用来诊断各种肾脏疾病、泌尿系疾病的主要手段,并可以用于对疾病进行鉴别。其中白细胞是一项重要的检测内容,其具有吞噬、产生抗体、抵御病原菌等能力,很多疾病均有白细胞数量的改变[1]。本研究分析干化学法和尿沉渣镜检法在检测尿液中白细胞的差异,研究干化学法的假阳性和假阴性原因,现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 本研究标本为2010~2011年870例门诊尿常规标本。其中男性410例,女性460例,年龄在7~69岁之间,平均(33.87±7.95)岁。
1.2 方法 仪器和试剂:干化学法仪器采用H-300尿液分析仪(长春瑞迪公司生产),试剂为原厂配套试剂。尿沉渣镜检法仪器采用奥林巴斯CX31显微镜,802台式离心机(上海)。检验前首先进行实验室质控。实验室工作人员严格按照仪器的说明书及其操作规程进行检验。
首先,取新鲜的尿液标本约10mL,进行干化学法检验,将试纸的试剂部分均进入到尿液中,静待2s后,取出试纸,使用滤纸将多余尿液轻轻吸除,在传输盘上进行检测。
随后,使用高速离心机以1500r/min离心5min,将上清液去除,留取沉渣进行尿沉渣镜检。将沉渣放于载玻片,先使用低倍镜观察尿液中有形成分的全貌,再使用高倍镜观察不同视野的白细胞值,一般选择10个视野,准确记录。
1.3 白细胞判定标准 尿沉渣镜检法:每高倍视野下有5个以上白细胞为阳性;干化学分析法:白细胞在70/U以上为阳性。
假阴性:经过干化学检测为阴性,但镜检结果为阳性。假阳性:干化学法检测为阳性,尿沉渣镜检法为阴性[2]。
1.4 统计学方法 实验数据均录入SPSS18.0软件包进行统计学分析。干化学法与镜检法比较采用例数(n)、百分数(%)表示,组间比较采用χ2检验。检验水准α=0.05,当P<0.05时,差异有统计学意义。
2 结果
以尿沉渣镜检法作为检验标准,干化学法检测结果中,有20例假阳性,占2.29%;假阴性68例,占7.82%。2种方法检测结果差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。
表1 干化学法及尿沉渣镜检法检验白细胞的比较分析[例(%)]
3 讨论
尿沉渣镜检法与干化学分析法的检验原理不同。干化学法对尿液中白细胞进行检测的原理在于白细胞(粒细胞)中含有一定的酯酶,其作用在试剂带模块内部的吲哚酚酯,使之产生吲哚酚。而吲哚酚在与试剂中的重氮盐相结合后,可以形成紫色的缩合物。标本中白细胞越多,其颜色越深。
3.1 干化学分析法假阴性 假阴性一般与以下几点因素有关:⑴患者尿液中有较多的淋巴细胞,如肾移植患者出现排斥反应时,即会有淋巴细胞在尿液中[3],而淋巴细胞内也含有使吲哚酚酯发生反应的酯酶,导致试纸变色;⑵尿液中如果有先锋、庆大霉素等药物,也能够与重氮盐结合;⑶尿液浓度过高,高蛋白尿等患者,也会出现假阴性。临床研究发现,当尿蛋白在++以上时,白细胞即为假阴性出现,而尿糖在+++以上也可以导致白细胞下降。此外,当标本内含有亚硝酸盐也可以导致试纸不变色而出现假阴性。另外,研究认为,当检验温度偏低时,也可能导致假阴性出现[4]。
针对假阴性情况,医生要注意患者是否有泌尿系感染,泌尿系感染的细菌是否含有硝酸盐还原酶;患者尿液是否在膀胱内停留在4h以上,且是否服用了如抗生素、维生素C等会导致假阴性出现的药物。
本次实验结果中,有68例假阴性出现,经分析,42例患者尿液中存在淋巴细胞,7例患者有泌尿系感染,15例患者为高蛋白和高尿糖,4例患者在检查前服用了抗生素类药物。
3.2 干化学分析法假阳性 假阳性一般与以下几点有关:⑴尿液如果在膀胱内储存的时间较长,或者标本放置的时间较长,可能会导致白细胞被破坏,进而将酯酶释放到尿液中,造成干化学分析法检测为阳性,但是镜检结果却为阴性。⑵在尿液中如果混有甲醛、胆红素或者呋喃啶等,也会产生假阳性。⑶女性尿液标本容易受到各种阴道分泌物的感染,如果有扁平上皮细胞、鳞状上皮细胞的污染[5],可能会造成干化学法检验阳性。
本次实验结果中,有20例假阴性出现,其中15例标本为女性,有较多分泌物混入,镜检发现有大量的上皮细胞,而上皮细胞有类似颗粒细胞的功能,可能导致其与白细胞的模块发生反应;其余5例原因不明。
经统计学分析,干化学法与尿沉渣镜检法对尿液标本内白细胞的检验结果尽管存在一定差异,但差异不存在统计学意义(P>0.05)。
尽管如此,使用干化学分析法检验尿液标本容易受到各种因素的影响,并可能导致出现白细胞检测结果的假阳性和假阴性,在临床检验工作中,要注意尽量避免各种干扰因素,对可疑患者,当出现干化学法检测为阴性时,为了避免误诊和漏诊,需要给予尿沉渣镜检法检验,不能单纯依赖干化学法对患者进行诊断。
[1]Neumuller,J,Neumuller-Guber,SE,Lipovac,M et al.Immunological and ultrastructural characterization of endothelial cell cultures differentiated from human cord blood derived endothelial progenitor cells[J].Histochemistry and cell biology,2006,126(6):649-664.
[2]梁伟明,陈志伟,梁再玲,等.干化学法与沉渣镜检法对比检测尿中红细胞和白细胞[J].检验医学与临床,2008,5(14):855-855,857.
[3]顾文刚,陈激扬.尿干化学法与沉渣镜检联合检测尿红细胞及白细胞的临床意义[J].国际检验医学杂志,2011,32(10):1127-1128.
[4]薛冰蓉,杨渝伟,陈曦,等.UF-1000i尿沉渣分析仪检测尿红细胞、白细胞影响因素的探讨[J].国际检验医学杂志,2011,32(11):1223-1225.
[5]姜玲,程光敏,姜淑慧,等.沉渣镜检法和干化学法检测尿液红细胞和白细胞结果分析[J].中国医学创新,2011,8(21):53-55.