中药复方对衰老模型小鼠部分组织中GSH

中药复方对衰老模型小鼠部分组织中GSH－Px活性的影响

2012-06-29宁鹏

动物医学进展 2012年9期

宁鹏

（青海大学农牧学院动物医学系，青海西宁 810016）

衰老是生物体在生命周期中随年龄增长而发生的全身组织、器官功能减退和稳态下降的过程。随着衰老的发生，动物表现出生产性能下降，抵抗力下降，血液中一些酶的活性降低等情况[1]。

谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px）是机体内广泛存在的一种重要过氧化物分解酶，它在细胞内能够清除过氧化物，使其分解成对机体无害的水，阻断脂质过氧化链锁反应，从而起到保护细胞膜结构和功能的作用。谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px）含量降低，将会导致细胞内过氧化物堆积，细胞受损，动物机体出现一系列病理性反应，如抵抗力下降、免疫力下降、机体代谢障碍等[2－5]，从而加速动物机体的衰老。因此，谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px）含量变化与机体的衰老有密切的关系。

本试验通过建立小鼠亚急性衰老模型，观察中药复方对亚急性衰老小鼠部分组织中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px）活性的影响，从而研究中药复方的抗氧化作用。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 中药复方将当归40g，川芎40g，桃仁20 g，红花20g，益母草60g，炮姜20g，甘草15g，过滤出的药液在电炉上浓缩至500mL，再加红糖100 g，黄酒50mL，牦牛胎盘粉20g。

1.1.2 实验动物昆明种小鼠60只，6周龄～8周龄，雌雄各半，由青海省实验动物中心提供。

1.1.3 试剂 D－半乳糖，上海蓝季科技发展有限公司产品，批号：080711；GSH－Px试剂盒（批号：091231），蛋白定量测试盒（批号：091231），均为南京建成生物工程研究所产品。

1.2 方法

1.2.1 实验动物分组及处理小鼠常规饲养3d，观察无异常，备用。将小鼠随机分为D－半乳糖药物组、D－半乳糖对照组和对照组，每组20只；D－半乳糖药物组和D－半乳糖对照组小鼠每天背部皮下注射D－半乳糖0.15mL，对照组注射生理盐水0.2mL；D－半乳糖药物组每日口腔灌服中药复方0.2mL，D－半乳糖对照组和对照组灌服生理盐水0.2mL，给药前分别称取各组小鼠体重，15d后再分别称取各组小鼠体重，然后脱颈椎处死所有小鼠，取心肌、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏备用。

1.2.2 组织匀浆的制备取小鼠的心肌、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏各0.3g，制成100g／L组织匀浆备用。

1.2.3 GSH－Px活性的测定按照试剂盒说明分别测定小鼠心肌、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏中GSHPx活力。

1.2.4 统计分析试验结果用平均数±标准差（¯X±SD）表示，使用SPSS 11.5统计学软件进行方差分析。

2 结果

2.1 中药复方对衰老小鼠体重的影响

15d后D－半乳糖药物组和对照组与D－半乳糖对照组相比差异显著（P＜0.05），各组小鼠体重变化结果见表1。

2.2 中药复方对衰老小鼠部分组织中GSH－Px活性的影响

和D－半乳糖对照组相比，中药复方能够显著提高小鼠肝脏、肾脏中谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPx）的活性（P＜0.05），极显著的提高肺脏、心肌和脾脏中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px）的活性（P＜0.01）。中药复方对衰老小鼠部分组织中GSH－Px活性的影响见表2。

表1 衰老小鼠给药前后体重变化Table1 Weight changes before and after administrat in aging mice

3 讨论

以D－半乳糖制备亚急性衰老模型的方法是目前经常选用的建模方法[6]，该模型使机体细胞内半乳糖浓度增高，在醛糖还原酶催化下还原成半乳糖醇，这种物质不能被细胞进一步代谢而堆积体内影响正常渗透压，导致细胞代谢紊乱，破坏机体抗氧化防御系统使自由基积聚，导致衰老[7－8]。在衰老机制研究中[9－10]，超氧自由基学说已受到广泛的关注，动物衰老的过程中体内超氧自由基含量不断增多，自身的抗氧化系统活性降低是主要原因之一。

GSH－Px是机体内广泛存在的一种重要的催化分解过氧化氢（H2O2）的酶，它的活性升高能够降低脂类过氧化物的形成，分解过多的过氧化物，减轻组织细胞过氧化损伤，起到保护细胞膜结构和功能完整性的作用[11]。