白芍原药材与不同炮制加工品的薄层对比研究

马玉，郭力，黄玉慧，周勤梅，许莉

白芍为毛茛科植物芍药Paeonia lactiflora Pall.的干燥根，主要含芍药苷、牡丹酚、芍药苷内酯等萜类成分及黄酮、鞣质、氨基酸、苯甲酸等成分。白芍一般需经净制切片或炮制后入药。2010年版《中国药典》规定的白芍加工炮制品为白芍饮片、清炒白芍和酒白芍。炮制方法不同，白芍的功效作用也有差异。

本文对白芍原药材和不同炮制加工品[白芍饮片、酒白芍、麸炒白芍、发酵白芍]进行研究分析，新增了发酵白芍，采用薄层色谱法对其中的芍药苷、氨基酸、苯甲酸进行化学成分对比分析，比较发酵法与其他方法的异同，为进一步高效液相色谱分析做辅助研究。

1 仪器与材料

1.1 仪器

超声波清洗机(KQ3200E型)；10×20cm硅胶G板；玻璃点样毛细管0.3mm(华西医科大学仪器制造厂)；紫外分析仪；真空干燥箱（DZG-6050型，上海森信实验仪器有限公司）。

1.2 药材与试剂

药材：白芍原药材、饮片、酒白芍、麸炒白芍、发酵白芍均由亳州千草药业饮片厂提供，由成都中医药大学鉴定教研室李敏教授鉴定确认。

对照品：芍药苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110736-200320）。

试剂：苯甲酸（生物试剂）；薄层层析硅胶G（青岛海洋化工厂）；层析用试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 白芍不同炮制品薄层色谱鉴别

2.1.1 溶液的制备 供试品溶液的制备：取五种样品粉末各0.5g，分别加乙醇l0mL，振摇5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1mL使溶解，作为供试品溶液。对照品溶液的制备：取芍药苷对照品适量，加乙醇制成每1mL含1mg的溶液，作为芍药苷对照品溶液；另取苯甲酸适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含0.1mg的溶液，作为苯甲酸对照品溶液。

2.1.2 芍药苷薄层色谱鉴别 分别吸取芍药苷对照品和上述供试品溶液2μl，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40∶5∶10∶0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛-硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。如图1。

图1 芍药苷薄层色谱图

2.1.3 氨基酸薄层色谱鉴别 分别吸取上述供试品溶液2μl，点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水（3∶1∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%茚三酮溶液，加热至斑点显色清晰。如图2。

图2 氨基酸薄层色谱图

2.1.4 苯甲酸薄层色谱鉴别 分别吸取苯甲酸对照品和上述供试品溶液2μl，点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚-正己烷-乙酸乙酯-冰醋酸（6∶4∶3∶0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。如图3。

图3 苯甲酸薄层色谱图

2.1.5 结果 从图1可知，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝紫色斑点，麸炒白芍中芍药苷斑点色稍浅，此外，白芍原药材、白芍饮片、酒白芍、麸炒白芍及发酵白芍薄层中存在大量的共有斑点，且发酵白芍的斑点较多。从图2可知，白芍原药材、白芍饮片、酒白芍、麸炒白芍及发酵白芍原药材中存在多种氨基酸，且含量以药材和发酵品为多。从图3可以看出，白芍原药材、酒白芍、麸炒白芍的苯甲酸含量相对较少，而白芍饮片、发酵白芍的苯甲酸含量相对较高。

3 讨论

3.1发酵是在常温、常压条件下进行的生物转化过程，能最大限度地保护中药的活性成分。微生物在发酵过程中将许多人体不能直接吸收利用的大分子有效活性物质降解成小分子的活性物质，使发酵中药在人体中可以较快的被吸收，且吸收较完全。采用发酵法对白芍进行加工能最大限度保护对白芍中成分的破坏，并因为发酵的作用产生转化出新的成分。因此在三个色谱中都出现了发酵白芍的斑点较多的情况，从而推断发酵法应该是比较好的方法，但还需进一步的研究开发。

3.2 芍药苷薄层色谱中，麸炒白芍芍药苷颜色浅于其它样品的原因可能是由于麦麸吸附成分，致使芍药苷含量相对较低。而发酵白芍斑点较多则可能是经发酵后，微生物在生长过程中产生各种酶，将药物的成分分解转化产生了一些新物质。

3.3 氨基酸薄层色谱，显示存在大量氨基酸，这与之前的文献报道相符[1]。但在薄层上只能粗略看出几种药材之间氨基酸含量的差异，而未能找出其种类的差异。白芍原药材由于只经简单的初加工，其氨基酸含量明显比其他炮制品高。此外发酵白芍的氨基酸斑点较其他白芍炮制品多，提示发酵后白芍有新的氨基酸产生，值得进一步研究。

3.4 苯甲酸可增加肝脏的解毒负担，摄入一定量会产生不良反应，故被视为存在安全隐患的有毒物质。其为芍药苷的分解产物之一，炮制加工对苯甲酸含量有一定影响，炮制品间差异不大，但炮制后均较生药低[2]。发酵白芍中由于微生物的作用，可能增强了芍药苷的分解，而导致苯甲酸含量比其它炮制品高。发酵白芍除了苯甲酸含量较高外，比较多的斑点也显示有其它成分的存在。另外文献报道不去皮品均大于去皮品，其中鲜品含量最高[3]。而所用白芍饮片未去皮，这可能是导致白芍饮片苯甲酸含量高的原因。

[1] 薛建海,王仁川.亳白芍不同炮制品中氨基酸成分分析[J].中国中药杂志,1992,17(2):408.

[2] 吴巧凤,来平凡,陈京,等.杭白芍生品与炮制品种芍药甙、苯甲酸和元素含量的对比分析[J].中国中医药科技,2005,12(5):299.

[3] 王康才,张荣荣,方阵,等.杭白芍不同加工品苯甲酸含量分析[J].中药材,2008,31(10):1476.