中药复方制剂“消胀粉”对小白鼠胃酸含量、胃蛋白酶活力及胆汁分泌的影响

2012-06-12徐之勇唐海蓉

河南科技学院学报(自然科学版) 2012年4期

关键词：小白鼠胆汁酸胃酸

徐之勇,唐海蓉,余燕

（河南科技学院,河南新乡453003）

中药复方制剂“消胀粉”对小白鼠胃酸含量、胃蛋白酶活力及胆汁分泌的影响

徐之勇,唐海蓉,余燕

（河南科技学院,河南新乡453003）

以中兽医药理论为依据,取山楂、枳壳、神曲、茯苓、陈皮、白术、鸡内金、姜半夏等8味中药组成中药复方制剂“消胀粉”,以小白鼠为试验对象,研究“消胀粉”对其胃酸含量、胃蛋白酶活力及胆汁分泌的影响.把48只小白鼠分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组,Ⅰ组为对照组,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别灌服大、中、小剂量“消胀粉”混悬液,每天给药1次,连续给药5 d,水合氯醛麻醉,在幽门与十二指肠结合部结扎,处死小白鼠,取胃,收集胃容物,测定小白鼠胃酸含量及胃蛋白酶活力；同样把48只小白鼠分组,饲喂5 d,麻醉,手术稳定后,分别在20、60 min取胆汁,检测胆汁总量并检测60 min时采取的胆汁中胆汁酸、胆红素、胆固醇含量.结果表明：大、中剂量“消胀粉”组均可使小白鼠胃酸含量增加及胃蛋白酶活力增强；与对照组比较,第60 min,小剂量“消胀粉”组可明显促进胆汁分泌（P＜0.05）；大、小剂量“消胀粉”组可使小白鼠胆汁中胆汁酸含量极显著升高（P＜0.01）,中剂量消胀粉组可使小白鼠胆汁中胆汁酸含量明极显升高（P＜0.05）；大、中、小剂量消胀粉组可使小白鼠胆汁中胆红素含量极显著升高（P＜0.01）；小剂量“消胀粉”组可使小白鼠胆汁中胆固醇含量极显著降低（P＜0.01）“.消胀粉”能促进小白鼠胃酸分泌,增强胃蛋白酶活力,可以促进小白鼠胆汁的分泌,其中以用量为1.5 g/kg的大剂量“消胀粉”组效果最佳.

“消胀粉”；小白鼠；胃酸；胃蛋白酶活力；胆汁

消化不良（dyspepsia）是一种临床症候群,是由胃动力障碍所引起的疾病,影响机体对营养物质的摄取.我们以中兽医药学理论为指导,结合现代研究成果,精心选药组方进行了纯中药复方制剂“消胀粉”的开发研究.为验证此制剂对小白鼠胃酸含量、胃蛋白酶活力及胆汁分泌的作用效果,开展了本次试验,为助消化药物的开发,提供实验依据和临床基础.

1 实验材料

1.1 实验动物

同一批健康小白鼠96只,体重18～22 g,SPF级,由新乡医学院动物实验中心提供.

1.2 药品

中药购于新乡市张仲景大药房,鉴定各药真伪及质量后,以中兽医药理论为依据,设计组方原则及各药配伍比例组成中药复方“消胀粉”,取山楂、枳壳、神曲、茯苓、陈皮、白术、鸡内金、姜半夏等8味中药,按照一定比例混合,冷水浸泡30 min,水煎3次,合并滤液,过滤,浓缩至相对密度1.25～1.30,制成清膏,将m（清膏）∶m（二氧化硅）=1∶3.5混合,干燥（经测定水分含量低于10%）,密封贮存备用[1].

1.3 实验仪器

DY89-1型电动玻璃匀浆机,宁波新芝生物科技股份有限公司生产；可调式移液器,上海雷勃分析仪器有限公司生产；TGL-16G高速冷冻离心机,上海安亭科学仪器厂生产；UV1000型紫外/可见分光光度计,上海天美科学仪器有限公司生产.

2 方法与结果

2.1 消胀粉对小白鼠胃酸含量、胃蛋白酶活力的影响

取小白鼠48只,雌雄各半,随机分为4组,定为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别灌服大、中、小剂量“消胀粉”混悬液（1.5 g/kg、0.8 g/kg、0.4 g/kg,用0.5%羧甲基纤维素配成0.15 g/mL、0.08 g/mL、0.04 g/mL,1 mL/100 g）；Ⅰ组为对照组,灌服同体积的0.5%羧甲基纤维素；每天给药1次,连续给药5 d[2],于第5天给药1 h后（禁食不禁水12 h）,小白鼠用水合氯醛麻醉,剪去腹部的毛,常规消毒,于剑突下沿腹白线开一长约2.0 cm的切口,在幽门与十二指肠结合部结扎,缝合创口后,送回笼中,术后禁食禁水；术后3 h,脱颈椎处死小白鼠,取胃,收集胃容物,于3 000 r/min离心15 min,吸取上清液为胃液[3].取离心后的清晰胃液1 mL置于试管中,加入0.5%酚酞指示剂2滴,用20 mmol/L的氢氧化钠滴定,同时不断摇动,至红色消失,继续滴定直至微红色不退为止,记录所消耗的氢氧化钠总毫升数,算出总酸度[3],总酸度=氢氧化钠（毫升数）×20,结果见表1.取内径1 mm粗细长度10 cm匀称的毛细玻璃管,将蛋清打匀,过滤后灌满毛细玻璃管,放在85℃的热水中,凝固后冰箱储存备用.取胃液1 mL放入10 mL带塞离心管中,放入上述蛋白管3根,塞好塞子,37℃水浴24 h,用测量蛋白管透明部分长度,求平均值[3-4],胃蛋白酶活力=平均值×16,结果见表1.

表1 “消胀粉”对小白鼠胃酸含量和胃蛋白酶活力的影响（）Tab.1 Influence of Xiao-zhang powder on the gastric acid content and pepsin activity（

注：与对照组比较,*代表P＜0.05,**代表P＜0.01.

从表1可以看出,Ⅱ组小白鼠胃酸含量及胃蛋白酶活力高于对照组,差异极显著（P＜0.01）；Ⅲ组小白鼠胃酸含量及胃蛋白酶活力高于对照组,差异显著（P＜0.05）；Ⅳ组小白鼠胃酸含量及胃蛋白酶活力与对照组比较,差异不显著（P＞0.05）.

2.2 消胀粉对小白鼠胆汁分泌的影响

取小白鼠48只,雌雄各半,随机分为4组,定为Ⅰ、Ⅱ、III、Ⅳ组,Ⅱ、III、Ⅳ组分别灌服大、中、小剂量“消胀粉”混悬液（1.5 g/kg、0.8 g/kg、0.4 g/kg,用0.5%羧甲基纤维素配成0.15 g/mL、0.08 g/mL、0.04 g/mL, 1 mL/100g）；Ⅰ组为对照组,灌服同体积的0.5%羧甲基纤维素；每天给药1次,连续给药5 d[2],于第5天给药1 h后（禁食不禁水12 h）,以20%乌拉坦0.5 mL/100g腹腔注射麻醉小白鼠,将小白鼠仰位固定于手术板,腹部剪毛后沿腹白线（腹正中）剖开腹腔2～3 cm,沿十二指肠降部肠系膜（距幽门约1 cm）看到白色透明具有韧性的胆总管,在接近十二指肠开口处,向肝脏方向剪“V”形口,将胆汁引流管插入胆总管,引出腹壁,结扎固定[3,5],稳定,分别在20、60 min,用小试管收集所分泌的胆汁（mL）.60 min时取的胆汁,用无菌管收集,离心20 min,3 000 r/min,仔细收取上清,胆汁中总胆汁酸（TBA）含量采用酶联免疫分析（ELISA）测定,根据试剂盒说明书提示步骤进行含量检测；胆汁中总胆固醇含量采用氧化酶法测定,全自动生化仪检测；胆汁中总胆红素含量采用咖啡因法测定,紫外/可见分光光度计检测.结果见表2、表3.

表2 “消胀粉”对小白鼠胆汁分泌的影响（）Tab.2 The influence of Xiao-zhang powder on the secretion of bile（）

注：*表示与空白对照组比较P＜0.05.

从表2可看出,稳定20 min后,各组胆汁流量基本一致,差异不显著（P＞0.05）；第60 min后,实验组与对照组比较,小剂量“消胀粉”组可明显促进胆汁分泌（P＜0.05）,大、中剂量消胀粉组对胆汁分泌仅有促进趋势.

表3 “消胀粉”对小白鼠胆汁中胆汁酸、胆红素、胆固醇含量的影响（）Tab.3 The influence of Xiao-zhang powder on the content of bile acids、bilirubin and cholesterol of mice（）

注：**表示与空白对照组比较P＜0.01,*表示与空白对照组比较P＜0.05.

从表3可看出,与空白对照组比,大、小剂量“消胀粉”组可使小白鼠胆汁中胆汁酸含量极显著升高（P＜0.01）,中剂量“消胀粉”组可使小白鼠胆汁中胆汁酸含量明显升高（P＜0.05）；大、中、小剂量“消胀粉”组可使小白鼠胆汁中胆红素含量极显著升高（P＜0.01）；小剂量“消胀粉”组可使小白鼠胆汁中胆固醇含量极显著降低（P＜0.01）.

3 讨论

“消胀粉”是根据中兽医药理论所拟定,由山楂、枳壳、神曲、茯苓、陈皮、白术、鸡内金、姜半夏组成,诸药合用治疗功能性消化不良、腹胀等.其中,山楂含酒石酸、山楂酸、黄酮类、糖类及甙类等,能增加胃中消化酶的分泌；神曲具有消食和胃之功效,用于饮食积滞证；茯苓,性味甘、淡、平,归心、脾、肾经,利水渗湿、健脾安神；鸡内金主要用于消食；白术,性味苦、甘、温,归脾、胃经,健脾益气,燥湿利火；陈皮,性味苦,辛、温,归肺、脾经,具有理气健脾,燥湿化痰之功效；枳壳具有行气导滞之功效；姜半夏有化痰止呕、散结之功效.诸药合用具有消食、利湿、化痰之功效[6].

胃液是消化道重要的消化液,由胃粘膜中的壁细胞、主细胞和粘液细胞分泌,其主要成分是胃酸、胃蛋白酶等.胃内的盐酸有许多作用,其中之一就是激活胃蛋白酶原,使之转变为有活性的胃蛋白酶,并为胃蛋白酶的作用提供必要的酸性环境；而胃蛋白酶则能水解食物中的蛋白质,起到促消化的作用[7].本试验研究表明：大、中剂量“消胀粉”组均可使小白鼠胃酸含量增加及胃蛋白酶活力增强,说明“消胀粉”能促进胃酸分泌,增强胃蛋白酶活力,有助食物的消化,故可以改善厌食、腹胀、消化不良等症状.这与何梅等[4]、张涵等[8]的研究结果具有相似性,但效果更佳.

“消胀粉”富含多种生物活性物质,可以通过多种途径来调节机体.本试验研究表明：与对照组比较,小剂量“消胀粉”组可明显促进胆汁分泌（P＜0.05）；大、小剂量“消胀粉”组可使小白鼠胆汁中胆汁酸含量极显著升高（P＜0.01）,中剂量“消胀粉”组可使小白鼠胆汁中胆汁酸含量明显升高（P＜0.05）；大、中、小剂量“消胀粉”组均可使小白鼠胆汁中胆红素含量极显著升高（P＜0.01）；小剂量“消胀粉”组可使小白鼠胆汁中胆固醇含量极显著降低（P＜0.01）.说明灌注“消胀粉”可以提高小白鼠胆汁的分泌量以及改善胆汁的质量,促进小白鼠的消化.这与高博等、李从存等的研究结果相近[9-10],但效果更明显.

4 结论

“消胀粉”能促进小白鼠胃酸分泌,增强胃蛋白酶活力；同时“消胀粉”增加小白鼠胆汁的分泌,提高小白鼠胆汁中胆红素含量,降低了小白鼠胆汁中胆汁酸以及胆固醇含量,小白鼠消化能力增强.综合以上研究结果,其中以用量为1.5 g/kg的大剂量“消胀粉”组对增强小白鼠消化能力效果最好.

[1]单提新,王春元,顾文松,等.强普素对蛋鸡产蛋性能的影响[J].中兽医医药杂志,2008（5）：38-39.

[2]徐叔云.药理实验方法学[M].北京：人民卫生出版社,l991.

[3]苗明三.实验动物与动物实验技术[M].北京：中国中医药出版社,1997：230．

[4]何梅,杨月欣.酸乳对大鼠胃酸及胃蛋白酶分泌的影响[J].卫生研究,1999（6）：348-349.

[5]文莉,陈靓,舒成仁.几种中药煎液对大鼠胆汁排出的影响[J].时珍国医国药,2005,16（2）：114.

[6]张慈安,武峰,毛竹君,等.姜半夏乙醇提取物对人胃腺癌细胞内pH值的影响[J].中西医结合学报,2011,9（8）：894-900.

[7]沈霞芬.家畜组织学与胚胎学[M].北京：中国农业出版社,2011：148.

[8]张涵,巫燕莉,杜群,等.消食饮对大鼠胃酸、胃蛋白酶的影响[J].江西中医学院学报,2011（1）：68-69.

[9]高博,潘建新,顾振纶.苦黄口服制剂对大鼠胆汁分泌的影响[J].中草药,2000,31（3）：200-202.

[10]李从存,王明贵.自拟”三金汤”促进胆汁分泌66例临床观察[J].中国社区医师：医学专业,2009（19）：121.

（责任编辑：卢奇）

Influence of traditional Chinese medicine-Xiao-zhang powder on gastric acid content and pepsin activity and the secretion of bile on mice

Xu Zhiyong,Tang Hairong,Yu Yan
（Henan Institute of Science and Technology,Xinxiang 453003,China）

Xiao-zhang powder is based on veterinary medicine theory,which is composed of hawthorn,bitter orange, medicated leaven,Poria cocos,tangerine peel,Atractylodes macrocephala,Gallus gallus domesticus and Ginger pinellia. As a test annimal,mice was divided intoⅠ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳgroup.and the groups ofⅡ,ⅢandⅣwere fed on big,medium, small doses of Xiao-zhang powder,which were administered once a day for consecutive 5 days.Anesthesia,and this test ligatted the junction of pyloric and duodenal,and took the stomach,which determinated the acid content and pepsin activity of the mouse by collecting the stomach contents；After surgical stabilization,the test adoptted the bile of the mice which were divided into the groups by the sane way in 20,60 minutes,and detected bile acids,bilirubin, cholesterol content of bile which was adoptedin 60 minute.Big,small-doses powder could increase gastric acid content and enhance pepsin activity；The group of small doses of Xiao-zhang powder can significantly promote bile secretion（P＜0.05）；the groups of large,low-doses powder can increase bile acid content significantly（P＜0.01）；the group of medium-doses powder can increase bile acid content significantly（P＜0.05）；the groups of large,medium and small-doses powder can increase mice bile bilirubinbile significantly（P＜0.01）；the group of small-doses powder can decrease bile cholesterol content significantly（P＜0.01）.Xiaozhang powder can promote the mice gastric acid secretion,and enhance the vitality of pepsin,Xiaozhang powder can promote the secretion of bile of mice.The besteffect is the group of 1.5 g/kg Xiao-zhang powder.

Xiao-zhang powder；mice；gastric acid；pepsin activity；bile

S859.79

1008-7516（2012）04-0030-04

10.3969/j.issn.1008-7516.2012.04.008

2012-06-11

徐之勇（1980-）,男,山东临沂人,硕士,讲师.主要从事动物营养代谢疾病病理学研究.