四种梅毒抗体血清学检验方法的比较

李雷花

梅毒是一种由梅毒螺旋体(TP)引起的全身各器官病变的性传播疾病，其传染力强、危害性大。据世界卫生组织(WTO)报告，成年人每年新发梅毒1200万，已成为严重的公共卫生问题［1］。梅毒的诊断需依据病史，临床表现及血清学诊断，由于梅毒早期的临床表现并不典型，有些患者对病史陈述缺乏真实性，故血清学检测是诊断梅毒的主要手段之一。目前，临床实验室常用的血清学诊断TP的有甲苯胺红不加热血清反应素试验(TRUST)，胶体金法，ELISA法、TPPA法等等不同的检测方法都有其特殊的临床应用价值，选择有效的方法对梅毒早期诊断、预防和控制梅毒的传播，避免因错误的检测结果引起不必要的医疗纠纷有着重要意义。

本文对255例患者的血清就我院检验科常用的TRUST法胶体金法ELISA法以下方法学评价。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2011年1月至12月皮肤科患者255例，年龄19-70岁。男性125例，女性:89例。

1.2 试剂与仪器 TRUST试剂、胶体试剂均为英科新创公司产品，ELISA试剂为上海科华生物工程股份有限公司产品，TPPA试剂由日本富士株式会社产品:

全自动酶免分析系统(RMP200)振漏器、离心机等。

1.3 检测方法 所有受试者均空腹抽血5ml，4000r/min离心5min后分离血清，血清标本不能及时检测则置于4℃冰箱，避免反复冻融，均采用TRUST法，ELISA法，胶体金法与TPPA对所选择标本按各种方法试剂盒说明进行检测。前三种方法所检测结果均与TPRA进行比较。

1.4 统计学方法 每种方法与TPPA法检测结果之间采用χ2检验，均以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

对255例皮肤科门诊患者用四种梅毒抗体血清学检测，以TPPA试验为金标准，对TRUST法，胶体金法，ELISA法进行评价，其结果表明，TRUST、胶体金、ELISA的敏感度分别73.56%、95.4%、98.8%，特异度分别为 97.0%、98.9%、100%，ELISA法，胶体金法与TPPA法比较差异无统计学意义(P＞0.05)，而TRUST与TPPA法比较差异有统计学意义(P＜0.01)，见表1。

表1 三种血清学方法检测结果的评价

3 讨论

人感染梅毒螺旋体后，可存于患者的血液及脑脊液中，3～6周可产生非特异性抗类脂抗体和特异性抗螺旋体抗体IgM和IgG、IgG终身存在于人体内，可终身检出阳性［2］。临床梅毒检测常用血清学试验分为非梅毒螺旋体抗原试验(如TRUST、RPR)和梅毒螺旋体抗原试验(TPPA，ELISA等)。

TRUST是采用牛心中提取的心脂肪，同固醇、孵磷脂组成性病研究室VDRL抗原重地含有特制的甲苯胺红溶液制成，检测血浆或血清中的反应素，在梅毒感染初期，由于反应素不足，无法用TRUST检测到，一般为阴性。4周后阳性率10%～30%，6～8周后大多100%，经治愈由25%自然转阴［3］。很多时候易受到某些传染病或自身免疫性疾病的影响，常出现生物学假阳性，主要见于怀孕、SLE、类风湿性关节炎等。由于TRUST试验在梅毒诊断上出现较高的假阳性和假阴性结果，许多学者以为TRUST已不适合作为梅毒筛选试验，但是TRUST试验滴度与病程有关，由于非特异性性抗体是TP破坏患者组织，后释放的物质刺激机体产生的，TP在人体的活动程度基本上与此抗体的滴度成正比，所以TRUST是梅毒经诊断后，观察疗效和判断复发的指标［4］。

临床上常用的检测特异性抗的试验有胶体金，ELISA，TPPA试验，胶体金法是一种应用现代生物工程技术制备的高度纯化的单克隆TP的基因工程抗原，具有快速操作简便，准确的特点，而且不需要特殊设备，结果易判读，但其法也存在一定的假阳性。在TP潜伏期时易漏诊，所以只能作为急诊或术前的一般筛查。TPPA是将梅毒的精制菌体成分包被在人工载体明胶粒上，对梅毒特异性抗体检测具有高度特异性和敏感性，是目前公认的确认实验，但TPPA法操作复杂，结果判定需人工而不能用于自动化，限制了其用于大批量标本的筛查。ELISA法是用双抗原夹心法测血清中的特异性抗体，对各期梅毒的检出率较高，其特异性和敏感性与TPPA非常接近，并且具有操作简便，可自动化，标准化的优点，能大批量同时检测，但ELISA结果阳性只能说明正在或曾经感染过梅毒，而不能判断梅毒的活动情况，故不能用于疗效观察，梅毒复发或再感染的诊断。

综上所述，根据梅毒螺旋体的生物学及免疫学特性，结合临床上不同的检测目的，采用ELISA法对临床标本进行大批量标本的筛查，胶体金法用急诊或术前筛选，用TPPA法进行确诊，以TRUST法进行疗效判断是较理想的实验室梅毒血清学检验组合。

［1］薛大奇.关于当前梅毒诊治中的几个问题的探讨.中国性科学，2008，8(17):23-25.

［2］阮豪骥.两种梅毒检验方法比较的初步研究.检验医学，2005，17(2):180.

［3］杨林.杨健等早期梅毒治疗前位血清学分析.临床皮肤科杂史，2002，27(5):314-315.

［4］吴薇.试析TPHA与TRUST在梅毒血清学诊断中的应用.中国卫生检验杂志，2003，13(2):235.