喉咽灵口服液、野菊花和威灵仙挥发油化学成分比较*

2012-05-10黄际薇张永明黄亚非

中山大学学报(自然科学版)(中英文) 2012年4期

黄际薇，张永明，黄亚非

(中山大学附属第三医院，广东广州 510630)

喉咽灵口服液是我院自制生产的医院制剂，由野菊花、威灵仙、地胆头等组成，具有清热解毒，软坚散结，益气养阴等作用，用于治疗气管炎和急、慢性咽喉炎[1]。喉咽灵口服液的制备工艺：将上述药材放入多功能提取罐中，加水浸过药材，煎煮二次，每次1.5 h，合并煎煮液，滤过，减压浓缩，加入白糖、苯甲酸钠，煮沸30 min，冷却至室温后，加入回收的挥发油，用纯化水加至总量，充分搅匀，即得。

喉咽灵口服液组方药材野菊花挥发油有抗菌、抗病毒、抗炎、免疫抑制等作用，对金黄色葡萄球菌、肺炎双球菌等均有较强的抑制作用，对大肠杆菌、白喉杆菌、结核杆菌及白色念珠菌、白色葡萄球菌有一定的抑制作用，对枯草杆菌、变形杆菌、伤寒杆菌、酵母菌也有显著的抑制作用[2-7]。威灵仙、野菊花挥发油成分的气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)分析已有文献报道[8-15]，而对于喉咽灵口服液挥发油的GC-MS分析则少有报道。为探讨组方药材挥发性成分在复方中的关联性，寻找喉咽灵口服液治疗气管炎和咽喉炎的物质基础，本研究采用GC-MS联用法对喉咽灵口服液以及方中野菊花、威灵仙的挥发油进行比较分析，为进一步研究喉咽灵口服液的物质基础与配伍机理奠定基础。

1 仪器与试药

Agilent 6890 N-5975 I气质联用仪(Agilent 公司)；TC-15套式恒温器(浙江新华医疗器械厂)；电子天平(瑞士Precisa)；挥发油提取器(上海玻璃仪器厂)。

威灵仙、地胆头、野菊花购自广州市药材公司，由广州中医药大学唐红梅教授鉴定。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱为HP-5H5毛细管色谱柱(30.0 m×0.25 mm×0.25 μm)；程序升温：柱初始温度60 ℃，保持3 min，以5 ℃·min-1的速度升温至250 ℃，保持5 min；进样口温度：250 ℃；载气为高纯氦气，流量：1.0 mL·min-1；进样量：1 μL。

2.2 质谱条件

离子源温度：230 ℃，四极杆温度：150 ℃，色谱-质谱接口温度：280 ℃；电离方式：EI；电子能量：70 eV；扫描范围(m/z) 35 ～ 450。

2.3 药材挥发油提取及处理

按中华人民共和国药典2010年版附录63挥发油测定法提取[16]。分别称取野菊花200 g、威灵仙400 g，用中药粉碎机粉碎后，置1 L圆底烧瓶中，加一定量的水浸泡一段时间，用水蒸气蒸馏法提取，收集蒸馏液，水层用氯化钠饱和，用三氯甲烷萃取，萃取液经无水硫酸钠干燥后，蒸去三氯甲烷，即得。

2.4 喉咽灵口服液挥发油

直接取喉咽灵口服液制备过程中产生的挥发油。

2.5 结果

2.5.1 野菊花、威灵仙药材的GC-MS分析按上述实验方法和条件对喉咽灵口服液中富含挥发油的两味药材进行分析，总离子流(TIC)图见图1。经GC-MS检测，所测成分的质谱图经计算机质谱数据库检索，按各色谱峰的质谱裂片图与文献核对，对基峰、质荷比和相对丰度等进行比较，并结合有关图谱解析，分别对各色谱峰加以确认，从而鉴定出其中的化学成分，采用面积归一化法测得各组分的相对百分含量，分析鉴定结果见表1。

图1 喉咽灵口服液挥发油(a)、野菊花挥发油(b)和威灵仙挥发油(c)总离子流图

表1 喉咽灵口服液、野菊花和威灵仙挥发油GC-MS特征图谱分析

续表1序号化学成分分子式相对分子质量w/％喉咽灵野菊花威灵仙371，3，4⁃Oxadiazol⁃2(3H)⁃one，5⁃(2，6⁃difluorophenyl)⁃3⁃[4⁃(trifluoromethyl)pyridin⁃2⁃yl]-C14H6F5N3O2343-1 24-38异戊酸对甲酚酯(p⁃cresylisovalerate)C12H16O2192-1 49-392-异丁基-3-甲基吡嗪(2⁃isobutyl⁃3⁃methylpyrazine)C9H14N2150-1 16-40Urea，1⁃(butoxycarbonyl)⁃3⁃(5⁃methylpyrid⁃2⁃yl)-C12H17N3O3251-1 82-41Heptasiloxane，1，1，3，3，5，5，7，7，9，9，11，11，13，13⁃tetradecamethyl-C14H44O6Si7505-1 14-42薄荷醇呋喃(benzofuran，4，5，6，7⁃tetrahydro⁃3，6⁃dimethyl-)C10H14O150-1 83-434⁃thiazolemethanol，2⁃(4⁃chlorophenyl)-C10H8ClNOS225-1 19-441-碘代十八烷(1⁃iodo⁃octadecane)C18H37I380-1 15-45Voachalotineoxindole，19，20⁃dihydro-C22H28N2O4384-0 94-46(3⁃Cyano⁃4⁃thiophen⁃2⁃yl-5，6，7，8-tetrahydro⁃quinolin⁃2⁃ylsulfa⁃nyl)⁃aceticacidmethylesterC17H16N2O2S2344-1 04-47Quinoline，4-[(2，4⁃dinitrophenyl)thio]-，1⁃oxideC15H9N3O5S343-1 28-48糠醛(furfural)C5H4O296--2 07492⁃cyclopentene⁃1，4⁃dioneC5H4O296--12 77501，3-环庚二烯(1，3⁃Cycloheptadiene)C7H1094--1 1351壬醛(1⁃Nonanal)C9H18O142--3 5352十二烷(Dodecane)C12H26170--3 0853反式-2-壬烯醛((E)⁃2⁃Nonenal)C9H16O140--1 63542-莰醇(L(⁃)⁃Borneol)C10H18O154-2 532 25556，6-二甲基二环[3 1 1]庚-2-烯-2-甲醛(6，6⁃dimethyl⁃bicy⁃clo(3 1 1)hept⁃2⁃ene⁃2⁃carboxaldehyd)C10H14O150--1 1156胡薄荷酮(pulegone)C10H16O152--1 5857草蒿脑(estragole)C10H12O148--1 9158十四烷(tetradecane)C14H30198--3 6359壬酸(nonanoicacid)C9H18O2158--1 3560十六烷(hexadecane)C16H34226--1 79613-苯基丙烯酸(3⁃phenylpropenoicacid)C9H8O2148--1 2762百秋李醇(patchoulialcohol)C15H26O222--1 42631，4⁃Dimethyl⁃8⁃isopropylidenetricyclo[5 3 0 0(4，10)]decaneC15H24204--1 18642，2′⁃Isopropylidenebis(5⁃methylfuran)C13H16O2204--7 64658⁃MethylheptadecaneC18H38254--1 11662(1H)Naphthalenone，3，5，6，7，8，8a⁃hexahydro-4，8a⁃dim⁃ethyl⁃6⁃(L⁃methylethenyl)-C15H22O218--1 5267Trichloroaceticacid，hexadecylesterC18H33Cl3O2387--2 2168棕榈酸乙酯(ethylhexadecanoate)C18H36O2284--1 3769十六烷酸(n⁃Hexadecanoicacid)C16H32O2256--20 6570亚油酸乙酯(9，12-Octadecadienoicacidethylester)C20H36O2308--2 2471亚油酸((Z，Z)-9，12⁃Octadecadienoicacid)C18H32O2280--6 21

3 讨论

本研究测定了喉咽灵口服液与方中野菊花和威灵仙挥发油的化学成分，共鉴定出71种成分，有1个共有成分樟脑，喉咽灵口服液24个成分，占其挥发油总量的98.14％；野菊花34个成分，占其挥发油总量的81.95％；威灵仙27个成分，占其挥发油总量的93.64％；喉咽灵口服液与野菊花有10个相同成分，喉咽灵口服液与威灵仙有2个相同成分，各成分含量相差很大。表明喉咽灵口服液的挥发油主要来自野菊花，喉咽灵口服液与方中野菊花和威灵仙挥发油的化学成分及含量不是两个单味药挥发油主要成分之加和,而是存在着很大的差别，这些差别的产生可能是由于中药方剂在配伍合煮时发生了复杂的化学反应与物理变化[17-18]，加之中药化学成分本身的复杂性，各种化学成分之间既可能因为助溶、增溶、吸附、沉淀等而改变某种成分的溶出率，亦可能在溶液中发生固有物质间的络合、水解、聚合、解离、氧化或还原反应，从而生成原来没有的某些新物质[19]。

通过对喉咽灵口服液挥发性成分的研究，为进一步研究喉咽灵口服液的物质基础与配伍机理奠定了基础。喉咽灵口服液全方药材在前煮过程中所发生的复杂的物理变化与化学反应有待进一步深入研究；喉咽灵口服液挥发油中新成分的出现及单一组方个别成分大量的增加或减少所带来的药理作用也有待进一步深入研究。

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