输注经光化学法灭活病毒血浆对围术期血管活性物质的影响

蔡明 楚敏

[摘要] 目的 探讨经亚甲基蓝（MB）/光化学法灭活病毒血浆对围术期血管活性物质的影响。 方法 选择脊柱手术ASAⅠ～Ⅱ级择期手术患者60例，随机分为两组：实验组（输注MB/光化学法灭活血浆组）30例和对照组（输注普通新鲜冰冻血浆组）30例。所有患者均于麻醉前、输血浆后6 h和12 h用放射免疫法分别测定ET、ANP含量。 结果 两组ET、ANP值输血浆后明显上升（P＜0.01）；但实验组在输注MB/光化学法灭活血浆后ET值与对照组相比显著降低（P＜0.01）；同时ANP值在输MB/光化学法灭活血浆后显著升高。两组间相比差异有统计学意义（P＜0.01）。 结论 经MB/光化学法灭活血浆在灭活病毒、促进血管活性物质释放等方面优于普通新鲜冰冻血浆，临床应用相对安全。

[关键词] 亚甲蓝；光化学；病毒

[中图分类号] R457.1[文献标识码] B[文章编号] 1673-9701（2012）01-142-01

在临床工作中，血浆输注通常用于补充胶体、失血性休克等患者，每份输给患者的血浆都应该是安全的。但每一种灭活血浆中病毒的方法是否对血浆成份造成影响，是临床应用所关注的问题。本文通过研究输注经亚甲基蓝（MB）/光化学法灭活病毒血浆对机体血管活性物质（内皮素ET、心钠素ANP）的影响，以期了解该方法临床应用的安全性。

1 材料与方法

1.1 样本来源

选择骨科脊柱手术ASAⅠ～Ⅱ级择期手术患者60例，男35例、女25例，术前排除内分泌系统疾病，无使用皮质类固醇药物。随机分为两组实验组（输注MB/光化学法灭活血浆组）30例和对照组（输注普通新鲜冰冻血浆组）30例。

1.2 仪器与试剂

病毒灭活箱；亚甲基蓝（MB）；西安262厂生产的FJ-2008型γ-免疫计数仪；美国产EPICS-ELITE流式细胞仪；解放军总医院东亚放免所提供的药盒（卫药准字R-68号）。

1.3 血浆制备

MB/光化学病毒灭活法是将MB加入液体血浆中混匀，置于血浆病毒灭活箱中，温度4℃，光照射强度30 000～35 000 lux，照射35 min，然后过滤去除亚甲基蓝，同时也滤除血浆中存在的白细胞和已灭活的病毒。

1.4 实验方法

两组患者均采用气管插管静吸复合全身麻醉。晶体液乳酸林格液按（15～20） mL/kg输入。实验组输注经MB/光化学法灭活血浆；对照组输注普通新鲜冰冻血浆。两组输注血浆量均为（5～7） mL/kg，在1 h左右输注完毕。两组患者于麻醉前（T0）、输血浆后6 h（T1）、输血浆后12 h（T2），抽取静脉血4 mL，加入含抑肽酶50 μL和10%乙二胺四乙酸0.1 mL的试管中，混匀离心后冰冻保存待测。使用放射免疫法测定上述时间点的ET、ANP含量。

1.5 统计学处理

用SPSS10.0统计学软件处理，数据以均数±标准差（χ±s）表示。采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

两组患者的年龄、体重、术中出血量及输液量相比差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。表2中两组的ET、ANP值输血浆后显著上升（P＜0.01），说明在输血浆后均可引起某些血管活性物质的释放；在T1、T2时间点，实验组ET值明显低于对照组（P＜0.01）；实验组ANP值在T1、T2时间点明显高于对照组（P＜0.01），说明实验组可增加ANP的释放，减少ET的分泌，有利于平衡内环境的稳态。

3 讨论

近些年来，国内外曾应用巴斯德液态湿热灭活法、有机溶剂/洗涤剂法、膜过滤法等方法对血浆病毒进行灭活，但处理难度大，费用高，不能广泛应用于临床中单袋血浆的病毒灭活。

MB/光化学灭活病毒是近年来发展起来的新技术，是一种在光激发下的物理化学方法，在有氧条件下，光敏剂亚甲基蓝分子在波长为600～700 nm、强度30 000～35 000 lux的光照作用下可激发产生多种氧物质（氧自由基、羟自由基等），这种氧物质可引起病毒核酸链的断裂，阻止其复制[1]，破坏病毒结构，进而影响病毒功能，最终导致病毒死亡，因此随着新型光敏剂和发光设备的出现，光化学疗法以其对组织细胞损伤小、毒副作用少等优点，广泛应用于临床[2]。尤其对HBV、HCV、HIV等病毒灭活效果更为理想[3]。

心钠素是由心房肌细胞分泌的具有扩张血管、降低血压的内分泌多肽；内皮素是一种具有强烈收缩血管作用的多肽类内源性损害因子，两种物质在循环系统中心血管功能调节方面起着关键性作用，在正常健康人机体中二者互相拮抗而动态平衡[4]。

本实验中两组患者ET、ANP值输血浆后与麻醉前比较显著升高（P＜0.01），说明在输血浆后均可引起某些血管活性物质的释放；实验组ET在T1、T2点与对照组相比分泌减少（P＜0.01），说明有利于循环系统的稳定；实验组ANP在T1、T2点与对照组相比释放增加（P＜0.01），说明实验组可增加ANP的释放，平衡内环境的稳态。

通过实验证明，临床应用经MB/光化学法灭活的血浆在灭活病毒等方面优于普通血浆，同时还可促进血管活性物质释放，临床应用相对安全，但对血浆其他成份是否有影响还有待进一步研究。

[参考文献]

[1]Epe B，Mutzel P，Adam W. DNA damage by oxygen radicals and excited state species： a comparative study using enzymatic probes in vitro[J]. Chem Biol Interact，1988，67（1-2）：149-165.

[2]周裕凯，张兰. 亚甲基蓝光化学疗法处理血液中肿瘤细胞的展望[J]. 中国煤炭工业医学杂志，2010，13：823-825.

[3]张耀，熊鸿燕，马菲，等. 亚甲基蓝光化学法对全血中人免疫缺陷Ⅰ型病毒的灭活研究[J]. 第三军医大学学报，2004，26：1962-1963.

[4]李凤玲. 内皮素、心钠素与糖尿病肾病[J]. 右江民族医学院学报，2000，22，465-466.

（收稿日期：2011-10-13）