2012年上半年焦作进境皮张炭疽监测调查

桂瑾　钟晓鹏　张保军

[摘要]前言：本文通过对焦作地区2012年上半年进境皮张抽样进行炭疽监测调查，分析测定那些来源国家进境皮张中可能携带炭疽疫病，及炭疽疫病在进境皮张中是否存在隐性或潜在威胁。实验室检测：利用阿斯科利（Ascoh）实验，对抽取的100份试验样品，涉及357585张，来源7个国家的进境皮张进行炭疽检测及结果分析。讨论：目前盐溃的皮张携带炭疽的可能性相对较少，为进口皮张的检疫监管提供了确凿的试验数据，在保障进境皮张安全的同时，对保障我国A-R，身体健康也具有重要的意义。

[关键词]进境皮张检验检疫炭疽监测

焦作地区进境皮张深加工业的发展是伴随着我国改革开放的进程而逐步发展壮大起来的。目前主要品种包括盐渍绵羊皮、盐渍山羊皮及生牛皮等。根据河南出入境检验检疫局统计，从近11年时间来全省进口皮张数量来看，每年焦作进口皮张数量约占全省进口皮张总量的90-97％左右，年出口创汇多达几十亿美元，现已发展成为亚洲最大的鞋里皮生产加工销售基地和羊剪绒制品集散地。

炭疽杆菌病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患急性传染病，是一种重要的人兽共患自然疫源性疾病，现已列为国家二类疫病，而皮张中又极易携带和传播炭疽病，因此对进境皮张的炭疽检疫监测工作是十分重要和必须的。

实验室监测：现就2012年上半年焦作地区进境皮张情况进行检疫监测调查，具体调查方法及实验监测步骤如下：

一、调查方法

原则是根据来源国家、地区及进境皮张的品种等特点，涵盖2012年上半年进境皮张的所有典型皮张。从指定批次进境皮张中，随机选取有代表性样品进行实验室检测。

二、检测对象

抽取的有代表性进境皮张

三、实验采用标准

SN／T1700-2006《动物皮毛炭疽Ascoli反应操作规程》

器材：高压消毒器、50uL～200uL单通道移液器、普通冰箱、浸样瓶、反应管、显微镜、超净工作台、恒温培养箱、革兰氏染色液等

四、药品与诊断试剂

浸样液、炭疽沉淀素标准抗原、炭疽沉淀素阳性血清、炭疽沉淀素阴性血清

五、方法及步骤

1在进境皮张专用原皮库中，抽取指定批次的皮张，选择根据国家质检总局及SN／T2123-2008《出入境动物检疫实验样品采集、运输和保存规范》及GB／T18088-2000《出入境动物检疫采样》要求，随机选取有代表性，优先采集有疑似病变部位，一般从每张皮的腿部或腋下剪取样皮一块约2cm2，装入特制的样品袋中，送实验室检测。

2将样品及样品袋放入高压灭菌器中，103kPa12l℃消毒30min。

3高压灭菌后，将消毒后的样品去除脂肪，每5块被检皮样为一组放入浸样瓶中，并记录样品编号和相对应的浸皮瓶号。按质量：体积=1：10的比例加入皮浸液，在室温下浸泡16～24h后，中性滤纸过滤，其澄清液为被检样品。

4对照试验

4.1炭疽沉淀素阳性血清对照试验

在一支加有100uL-200uL1：5000标准炭疽抗原的反应管中，徐徐加入等量的炭疽沉淀素阳性血清，抗原液面与血清接触面必须清楚。15分钟内判定结果。

4．2炭疽阴性血清对照试验

在一支加有100uL-200uL标准炭疽抗原的反应管中，徐徐加入等量的1：5000炭疽沉淀素阴性血清，抗原液面与血清接触面必须清楚。15分钟内判定结果。

5样品试验

反应管中加入100uL-200uL的炭疽沉淀素阳性血清，作阳性血清对照反应管。同时另取一反应管加入等量的1：5000炭疽阴性血清，作阴性血清对照反应管。

将等量被检皮样抗原徐徐加入到试验反应管和阴性血清对照反应管中，使之形成清晰的界面。15分钟内判定结果。

六、结果的判定

1炭疽沉淀素阳性血清对照试验：两界面出现清晰、致密的白色沉淀环。

2炭疽阴性血清对照试验：两界面无白色沉淀环出现。

3被检样品试验

3．1阴性血清对照反应管：应呈阴性反应，两界面无白色沉淀环出现。

3．2对照实验成立后判定结果：

阴性反应：反应管中阳性血清与被检样品浸泡液界面清晰，并且没有出现白色沉淀环。

阳性反应：反应管中阳性血清与被检样品浸泡液界面清晰，并且出现致密的、明显的白色沉淀环。

可疑反应：反应管中阳性血清与被检样品浸泡液界面清晰，并且出现模糊、疏松、不明显的白色沉淀环。

七、检测结果分析

上半年在进口皮张进行检验检疫的过程中，抽取了100份试验样品进行炭疽检测及结果分析，涉及皮张数量357585张，来源7个国家。从100批进境皮张炭疽检测结果来看，抽取的样品中未发现其携带疑似炭疽病菌。

从以上图表中可以看出，澳洲进口皮张占抽检样品的86％，美国等其他国家总共占14％。作为“骑在羊背上的国家”澳大利亚来说其畜牧业在世界上是非常有名的，畜牧业发展水平非常高，其国家的检疫要求也非常严，焦作进口澳大利亚皮张量占全国总进口绵羊皮量的70％左右。

从以上表中可以看出，盐渍绵羊皮占抽样皮张批次的92％，盐干羊皮。和盐渍牛皮总共占8％。从皮张的腌制方法来看，盐渍绵羊皮比盐干羊皮的炭疽发生风险较低，因炭疽杆菌繁殖体对日光、热和常用消毒剂都很敏感，其芽孢的抵抗力很强，在煮沸10min后仍有部分存活，在干热150℃

可存活30～60min，在湿热120℃40min可被杀死。芽胞也可在动物、尸体及其污染的环境和泥土中存活多年。新鲜腌

制的羊皮比风干后的羊皮发生炭疽感染的机率更低。

讨论：

1皮张加工业是焦作地区少数民族传统产业，随着国际经济的发展及国内环保、劳动保护等方面的加强，同时产品价格上涨的幅度相对于原皮的上涨影响较低，直接导致目前原皮生产的利润越来越低，目前企业为了降低生产成本，开始试着从其他一些国家进口皮张，这就加大了检验检疫执法把关的难度，无形中也给皮革制造业带来的许多新的风险和疫情隐患。

2炭疽杆菌在外界环境条件下易形成芽抱，抵抗力很强，特别在动物皮张上长期存在。若生产加工染疫皮张，炭疽杆菌有可能会从皮肤侵入，引起皮肤炭疽，使皮肤坏死形成焦痂溃疡与周围肿胀和毒血症，亦存在引起肺炭疽或肠炭疽的可能性。

3通过对2012年上半年炭疽检测结果分析来看，进境皮张中携带炭疽病的可能比较低，但也不排除携带的可能性，因抽到的毕竟是少量的，不可能做到进境皮张的逐张检疫检测。

4经过盐渍的进境皮张一般至少盐渍半个月以上，这也从另外一个方面降低了炭疽芽孢的存活几率。

5通过分析进境国家，可以看出澳大利亚的进境皮张占70％以上，其国家对出口皮张的除害处理技术比较成熟，检疫要求比较严格，且澳大利亚为无炭疽疫病国家，相对携带炭疽疫病的风险较低。

6对进境皮张的炭疽监测工作可以将检测重点放在一些进口量较少、畜牧业相对落后的、历史上爆发过炭疽病的、我国首次进口该国皮张的国家或地区。

7目前进行的炭疽阿斯科利（Ascoli）实验只是对炭疽病进行初筛实验，不排除假阴性的现象，因为炭疽在皮张中绝大多数都是以芽胞的形式存在，其具有毒力强、高潜能、可视性低，在干燥的室温环境中可存活20年以上等特点，因此给进境皮张的炭疽检测工作带来了许多困难。

8在与外商签订贸易合同时，应注明我国的检验检疫相关要求。