4种肺炎支原体检验方法的临床应用

李健雄，温小兰，李英姿，邱跃华（广东省东莞市企石医院 523500）

肺炎支原体（MP）是处于婴幼儿、青少年期容易出现的一种由于呼吸道感染而引发的一种主要危害其身体健康的病原体之一[1]。这种病在临床上通常表现为呼吸道感染综合症状。在患病人群中，大约有3%～10%的人群可以发展形成支原体肺炎[2]。但是仅仅依靠临床的表现很难确定一些儿童的呼吸道感染是由MP引发的还是由于细菌等病原体引发的疾病，因此，在临床治疗上也表现出一定的困难。根据如今进行的关于4种肺炎支原体的检验方法来进行MP的类型鉴别，是较为成熟且效果很好的方法。现将临床得到结果进行统计分析，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取本院2010年3月至2011年10月临床诊断结果显示为患有MP感染的儿童138例，年龄为6个月至4岁。每位患儿都进行对咽拭子的选取，并将选取的咽拭子做成快速培养与咽拭子聚合酶链反应（PCR），同时取患儿的血清采用血清MP被动凝集法（MP－Ab）和免疫斑点的方法进行检测。其中咽拭子和采静脉血都为2mL。对4种方法的检测结果进行采集和分析，并根据以往的治疗诊断案例和现今的结果进行对比。

1.2 方法 对于第1种采取咽拭子快速液体培养的方法，试剂的选取支原体分离鉴别培养液由珠海市浪峰生物技术有限公司提供，操作人员严格按照说明书来进行操作，在37℃的环境下进行24h的培养后得出的结果；第2种方式是PCR，试剂由中山大学达安基因股份有限公司提供，需要在PCR实验室进行检验，3h之后送出检验结果；第3种是MP－Ab，试剂为日本瑞必欧株式会社MP－Ab检测试剂Serodia－MycoⅡ凝集试验试剂盒，严格按照试剂说明书进行操作，取出血标本2mL，4h后出结果；第4种则是采取免疫斑点法，试剂由蓝波生物提供，严格按照试剂说明书进行操作，取血标本2mL，在进行检验后0.5h后出结果。

1.3 统计学方法 数据分析采用SPSS11.0软件包进行。计量资料以±s表示，组内比较用重复测量的单因素方差分析，组间比较用独立样本t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 4种MP的检验结果 4种MP的阳性结果分别是：快速培养法66例（47.8%），PCR 82例（59.4%），MP－Ab 116例（84.0%），免疫斑点法103例（74.0%）。由以上结果可见，在4种检验方法进行 MP检验时，免疫斑点法与MP－Ab对患儿的MP检验结果明显优于PCR与快速培养法，因此，在对MP进行检测时，应主要选用免疫斑点法或MP－Ab。

2.2 4种方法检测MP的时间比较 采用4种方法检测MP时，不但检测结果差距很大，诊断得出结果的时间上依然长短不一。快速培养法24.0h，PCR 3.0h，MP－Ab 4.0h，免疫斑点法0.5h。由以上结果可见，免疫斑点法在检测时间上最短，对治疗有积极的影响，而PCR与MP－Ab在时间上没有太大区别，因此，二者在时间上的可选择性无太大差异，快速培养法得出结果所需要的时间大约为24h，因此，在医生根据得出结果时间上进行选择时，应主要围绕PCR、MP－Ab与免疫斑点法。

在综合4种MP的检验方法时，结合得出结果所需要的时间与在检测中正确率而言，应主要选择 MP－Ab与免疫斑点法。

3 讨 论

MP感染在临床上的表现是多种多样的，尤其是对于婴幼儿或青少年，可能因为MP的感染引起全身各个肝脏器官受到损害，但主要表现为呼吸道感染[3]。随着科技的不断进步，对于4种MP的检验技术也在不断提升，因此检测出MP感染的发病率也在明显增高，从而受到广大人民群众的高度关注[4]。目前在实验室中用来诊断的方法主要有4种：快速培养法、PCR、MP－Ab与免疫斑点法。这4种检测方法在诊断MP感染上有不同的效果[5]。

快速培养法主要是利用MP新陈代谢产生的产物使培养基中的液体的颜色发生改变，从而确定MP的生长，但是同时需要向其中加入青霉素等来减少其他细菌的滋长，但是整个过程需要24h才可以被检测出来，因此检测率低下。PCR检测法相对于快速培养法呈阳性的效率更高，但是这种检测方法对实验室的研究人员以及实验室自身的条件要求都很高，儿童在进行检测时也需要咽拭子，因此，容易受到口腔内部环境的影响。MP－Ab在这4种检测方法中，阳性率最高，其原理是运用了表面吸附支原体抗原的明胶颗粒代替动物的红细胞，从而将原本会产生的非特异反应消除，同时患者比较容易接受这种检测方式，但其自身也有缺点：血清产生抗体也会需要一段时间，因此不利于早期的诊断。免疫斑点法对于患者而言，采血的形式容易，阳性率高，因此对患者临床的症状和试验结果更为准确，并且对患者临床症状和临床试验结果更为严谨。

因此，对比这4种方法检测MP的检验结果，MP－Ab与免疫斑点法都是值得在临床中推广使用的检测方法。

[1] 冯彩莲，陈莲香，付小清，等.2 226例肺炎支原体IgM抗体的检测[J].检验医学与临床，2006，3（6）：244－246.

[2] 陆定，陆诗强，庄丽宝，等.肺炎支原体引起小儿上呼吸道感染的临床研究[J].中国当代儿科杂志，2006，8（3）：205－206.

[3] 周金凤，黄秀琼.1 362例呼吸道感染患者痰、咽拭子肺炎支原体培养结果分析[J].现代医院，2006，6（6）：86－87.

[4] 马雷，刘晔.肺炎支原体两种检测方法的比较[J].中国实用神经疾病杂志，2010，13（12）：7－8.

[5] 李满元.四种肺炎支原体检验方法临床应用价值比较[J].中国民康医学，2011，23（14）：1825.