犬细小病毒病临床诊断与综合防制

2012-04-13方宗敏山东省蓬莱市动物卫生监督所265600

山东畜牧兽医 2012年7期

方宗敏（山东省蓬莱市动物卫生监督所 265600）

犬细小病毒病临床诊断与综合防制

方宗敏（山东省蓬莱市动物卫生监督所 265600）

犬细小病毒病(Canine parvovirus disease，CPVD)是由犬细小病毒感染犬发生的一种严重传染病。1977年美国学者Eugster和Nairn最先从患出血性肠炎的犬粪便中分离得到CPV，其后加拿大、澳大利亚、法国、日本等国均有CPV感染的报道。但CPV目前已存在于所有养犬国家和地区，我国各地都有流行。犬细小病毒病临床上以剧烈呕吐、出血性肠炎、心肌炎和白细胞显著减少为主要特征。CPV 造成的感染发病率高，传染性强，病死率高，是危害养犬业最为严重的传染病之一。本文介绍了CPV的一些生物学特性及流行病学特征，并介绍了犬细小病毒病的常见的诊断方法和CPV检测手段，准确快速诊断和先进的检测手段对于早期发现本病至关重要，从而有效控制CPV的流行与蔓延。

1 犬细小病毒生物学特征

1.1 形态特点与理化性质

CPV在分类地位上属于细小病毒科细小病毒属，与猫泛白细胞减少症病毒、貂肠炎病毒、浣熊细小病毒和蓝狐细小病毒同属细小病毒亚群。CPV是单负股DNA病毒、无囊膜，病毒粒子细小，直径为20~22nm，等轴对称的二十面体，在氯化铯中浮密度为1.43g/cm，4℃能凝集恒河猴、猪、马、猫和仓鼠的红细胞。CPV对酒精、碘酒等常用消毒剂有较强的抵抗力，在pH3.0时对氯仿、乙醚有抵抗，在4~10℃可存活180d，65℃ 30min而不失其感染性，室温保存90d感染性轻度降低，在粪便和固体污染上的病毒可存活数月至数年。对CPV最有效的消毒剂有福尔马林、次氯酸钠和氧化剂等，此外紫外线也能使其失活。

1.2 培养特性

CPV能在猫和犬的肠肺肾的原代和传代细胞中很好生长，也能在貂肺、牛睾丸等细胞中增值。于37℃培养3~4d，可出现细胞拉长、破碎、脱落的病变，传统的提高CPV的分离率和病毒滴度采用的是传代细胞同步接毒或者是有40~50%细胞贴壁时接毒。

1.3 流行病学特征

CPV在自然界广泛存在，犬是其主要自然宿主，各年龄和性别的犬均有易感性，但幼犬的易感性最高。除感染犬外，CPV也可感染其他犬科动物如狼、食蟹狐、南美狗和亚洲狸等。患病动物是主要传染源，病毒随粪便、尿液、呕吐物及唾液排出体外，污染食物、垫料、食具和周围环境，康复犬的粪便可长期带毒，一年四季均可发病。近年来CPV的抗原性随着时间的推移而发生了很大的改变，不断出现新的CPV变异株，宿主范围不断扩大。

2 临床诊断

犬细小病毒病无明显季节性，但在寒冷的冬季较为多见。自然感染潜伏期一般为5~7d，本病以出血性肠炎或心肌炎为主要特征，可分为肠炎型和心肌炎型两种，有少数病犬表现为混合型。在临床上以肠炎型多见，发热症状以低热为主，体温上升0.5~1℃左右，如继发肠毒血症，则少数病例可达40℃以上的高热。刚断奶不久的幼犬多以心肌炎综合症为主，青年犬多以肠炎综合症为主。

2.1 临床特征

临床上主要表现为以下三种类型：

2.1.1 肠炎型此型较普遍，病初精神沉郁，食欲减退或废绝，卧地不起，喜晒太阳，体温升至40℃以上，有渴感。但个别犬不出现体温明显升高；呕吐，先吐食物，后吐出黄色水样黏液；腹泻，先是黄色水样便，后出现蕃茄汁样暗红色血样稀便，且腥臭难闻。病的后期严重脱水，鼻端干燥，舌头下垂，眼窝下陷，黏膜苍白，迅速消瘦，全身散发异臭味。病程长短不一，幼犬较短，多为3~5d，病死率较高；12月龄以上的成年犬病程长达7~14d，病死率较低。

2.1.2 心肌炎型此型较少见，多见于2~3月龄幼犬，表现精神沉郁，心跳快而弱，病犬常因突然衰竭而死亡，病程较短。

2.1.3 混合型此型兼有上述二型的典型症状，大多先出现肠炎型，随后出现心肌炎型症状，病死率较高。

2.2 病理剖检

2.2.1 肠炎型病尸剖检可见肠系膜血管呈树枝状充血，肠系膜淋巴结出血、水肿，呈暗红色，切面外翻，呈紫红色，如大理石样外观。小肠黏膜出血、坏死甚至脱落，小肠及大肠内容物暗红色呈酱油样或果酱样。病尸消瘦，脱水，可视黏膜苍白，胃内空虚，黏膜表面附有淡黄色或黄红色黏液，胃底部黏膜弥漫性充血。

2.2.2 心肌炎型病尸剖检可见心肌或心内膜有非化脓性坏死灶，心肌纤维变性，心肌有红黄相间虎斑状的出血斑纹，有时出现出血灶，肺部局部充血、出血及水肿。

2.3 CPV的检测技术

目前用于CPV的检测方法很多，包括动物试验、病毒分离、电镜观察、分子生物学和免疫学检测等。各种检测技术的特异性、敏感性均有一定的差异。

2.3.1 PCR检测技术比较常用的PCR技术包括普通PCR、套式PCR和荧光定量PCR技术。

2.3.2 LAMP检测技术 LAMP法为环介导恒温核酸扩增方法，其原理是采用能特异识别靶序列上6个位点的4条引物及一种具有链置换活性的DNA聚合酶，在65℃左右不到1h的时间里进行核酸的指数级扩增，其扩增效率可达到109~1010个拷贝数量级。LAMP扩增法具有简单、快速、准确、廉价、易检测等特点。

2.3.3 核酸杂交检测技术原位杂交技术可用于组织样品中CPV核酸的检测与定位。

2.3.4 ELISA检测技术 ELISA对CPV的检测具有检测迅速、操作简单、成本相对低廉等优点。

2.3.5 胶体金检测技术胶体金标记的免疫层析技术是20世纪80年代以来发展起来的一种新型的检测方法，它是在免疫渗滤的基础上建立的一种简单快速的免疫学检测技术。利用胶体金标记单克隆抗CPV抗体，制成检测试纸条，用该试纸条只需一步加样，2~5min之内就可判定结果，具有敏感性高，特异性强，稳定性好，操作简便、快速，分析结果准确，易于判定等优点。

2.3.6 血凝试验血凝试验可完成对CPV抗原及抗体的检测，是一种经典的CPV检测方法。该法操作简单，结果易于判定，但敏感性较低，很难满足快速检测CPV的要求。