北芪菇化学成分的初步研究

王润梅，岳志劲，张永芳

（1.山西大同大学农学与生命科学学院，山西大同037009；2.山西大同大学化学与化工学院，山西大同037009）

北芪菇化学成分的初步研究

王润梅1，岳志劲2，张永芳1

（1.山西大同大学农学与生命科学学院，山西大同037009；2.山西大同大学化学与化工学院，山西大同037009）

采用试管预试法和圆形滤纸层析法对北芪菇的化学成分进行检测，结果表明北芪菇中含有氨基酸、多肽、蛋白质、有机酸、多糖、生物碱、黄酮及其苷类、酚性成分、植物甾醇、三萜成分、挥发油成分。

北芪菇；化学成分；试管预试法；圆形滤纸层析法

北芪菇是根据山西省浑源县74 km2富硒地区的地理资源优势，将侧耳属平菇用北岳恒山正宗黄芪（又称“正北芪”）和多种中草药及农作物副产品做培养料，经科学配方和特殊工艺培育而成的新型菌类产品。它具有补气固表、脱毒排脓、保护肝脏，有强身健体、滋润皮肤、催生母乳的功能[1-4]，特别是对在当今世界上称为“第二癌症”的牛皮癣（银屑病）具有神奇的疗效[5]。它是一种药食同源的功能型产品，已由山西省浑源县恒山北芪菇专业合作社注册了“恒王府”、“北芪菇”、“浑源”3个商标。为了促进对北芪菇的应用，我们采用试管预试法和圆形滤纸层析法对其化学成分进行系了统研究。

1 材料与试剂

1.1 材料

北芪菇购于山西省浑源县恒山北芪菇专业合作社，晾干后粉碎。

1.2 试剂

甲醇，95％乙醇，乙醚，氯仿，茚三酮，浓盐酸，α-萘酚，镁粉，碘，乙酸酐，对硝基苯胺，硅钨酸，冰醋酸，浓硫酸，无水硫酸钠，氢氧化钠，氨水，碘化钾，次硝酸铋，30％过氧化钠，硫酸铜晶体，酒石酸钾钠晶体，氯化铝，醋酸铅。

以上试剂均为分析纯，实验用水均为二次蒸馏水。

2 实验方法

2.1 供试样品的制备

水提取液：将北芪菇研磨后，过10目筛，制成北芪菇粉末。称取粉末5.0 g，加水100.0mL，于室温浸泡过夜，过滤取滤液20.0 mL，作为冷水提取液，余下的残渣及浸液于60℃水浴回流1 h，立即过滤，为热水提取液。

甲醇提取液：称取北芪菇粉末5.0 g，加甲醇50.0mL，后于60℃水浴回流10min，趁热过滤；再次加入50.0mL甲醇，在水浴上回流10 min，趁热过滤，将2次滤液合并，作为甲醇提取液。

酸性乙醇提取液：称取北芪菇粉末5.0 g，加0.5％的盐酸乙醇溶液70 mL后，于60℃水浴中回流10min，趁热过滤，作为酸性乙醇提取液。

乙醇提取液：称取北芪菇粉末5.0 g，加入95％乙醇50.0mL，于60℃水浴中回流20min，趁热过滤，滤液经减压浓缩至5mL，作为乙醇提取液。

乙醚提取液：称取北芪菇粉末5.0 g，加乙醚50mL，在60℃水浴中回流20min，上清液经减压浓缩至5 mL，作为乙醚提取液。

以上提取液均用活性炭去色素。

2.2 试管预试法

试管预试法[6-8]是利用北芪菇中各类成分溶解度的差异，首先用适当的溶剂把溶解度相近的成分提出，然后再选择一些特异的颜色反应或沉淀反应等进行检测。

2.3 圆形滤纸层析法

圆形滤纸层析法[6-8]是用层析方法在圆形滤纸上将北芪菇不同的提取液点样、展开，待溶剂充分挥发后，分别将不同的显色剂喷于滤纸上。根据产生的荧光或出现的斑点、颜色，从而得出样品的成分。

3 结果与分析

3.1 试管预试结果

3.1.1 氨基酸、多肽和蛋白质的检测

取冷水提取液1.0mL，加入2滴10％的NaOH溶液，摇匀，滴入浓度为0.5％的CuSO4溶液，边加边摇，试液为紫红色，预试结果说明多肽或蛋白质存在于样品中；取1.0mL冷水提取液，加入2～3滴浓度为0.2％茚三酮溶液，摇匀，在沸水中加热5 min，试液呈现蓝紫色，结果显示样品中含有氨基酸、多肽或蛋白质。

3.1.2 有机酸的检测

将1滴冷水提取液滴于pH试纸上，测得PH＜7，说明样品含有有机酸成分。

3.1.3 糖、多糖及其苷类的检测

取热水提取液1.0mL，加入新配制的碱性酒石酸铜试剂5滴，在沸水中加热5 min后，出现了棕红色氧化亚铜沉淀，说明样品中含有还原糖等；取1.0 mL热水提取液，加入3滴5％的α-萘酚乙醇溶液，摇匀，沿试管壁缓慢加入0.5mL浓硫酸，在试液和硫酸的交界面处，很快地形成紫红色环，结果说明样品中含有苷类、糖类或多糖；取5.0mL热水提取液，在沸水浴上蒸发至1.0mL，加入95％的乙醇溶液2.0mL，待沉淀出现后，过滤，再用无水乙醇少许洗涤，然后用2.0mL的水溶解沉淀，加入5滴新配制的碱性酒石酸铜试剂，在沸水浴中加热5min，有棕红色氧化亚铜沉淀出现，说明样品含有多糖。

3.1.4 酚性成分检测

新配制的重氮化试剂，试液呈现红色，说明样品含有酚性成分。

3.1.5 生物碱的检测

取酸性乙醇提取液10.0 mL，滴加5％的氢氧化铵溶液若干直到溶液为中性，在沸水浴中蒸干，加5％的硫酸溶液3.0 mL溶解其残渣，将残渣过滤，将所得滤液1.0mL，加1～2滴硅钨酸试剂，生成灰白色沉淀；取1.0 mL滤液，加1～2滴碘化铋钾试剂，生成橘红色沉淀；取1.0mL滤液，加1～2滴碘化汞钾试剂，生成浅黄色沉淀。这说明样品中含有生物碱。

3.1.6 黄酮及其苷类的检测

取甲醇提取液1.0mL，加入浓盐酸5滴和少量镁粉，在沸水浴中加热3 min，呈现红色反应；取1.0mL甲醇提取液，在沸水浴上蒸干，加入硼酸的饱和丙酮溶液1.0 mL及10％的枸橼酸丙酮溶液1.0mL，蒸干，将残渣在紫外灯下照射，发现有强烈的荧光，说明样品含有黄酮或苷类物质。

3.1.7 植物甾醇、萜类成分的检测

取甲醇提取液1.0mL，于水浴上蒸干，用1.0mL冰醋酸溶解残渣，加入1.0 mL的醋酸酐-浓硫酸（19∶1）混合试剂，混匀，发现试液颜色由黄色逐渐变为墨绿色；取1.0 mL乙醚提取液，于水浴上蒸干，用1.0 mL的氯仿溶解残渣，沿试管壁缓缓加入浓硫酸1.0 mL，发现氯仿层有红色反应，在紫外灯下观察，发现硫酸层有绿色荧光出现，说明样品中含有植物甾醇、萜类成分。

3.1.8 挥发油的检测

取乙醇提取液1.0mL，滴于玻璃表面皿上，于室温下挥发，出现油状物残渣并散发出香味，随后加热，发现油状物减少，说明样品中含有挥发油。

3.1.9 鞣质、蒽醌、强心苷、皂甙、氰苷的检测

均为阴性，样品不含有上述几类化合物。

3.2 圆形滤纸层析实验结果

取圆形滤纸一张（Ф12.5 cm，新华牌），滤纸中心处打一小孔，备插入滤纸芯之用。在距中心1 cm处，分别将乙醇提取液、乙醚提取液用毛细管点样，样点的直径以2mm左右为宜。一张滤纸可同时点上9个样品。然后在滤纸的中心小孔插入一小条滤纸纸芯，移到盛放展开溶剂（V95％乙醇∶V氯仿＝2∶8）的直径为12 cm的培养皿中，使滤纸芯浸在溶剂中，盖上和滤纸同样直径的培养皿，进行层析，当溶剂的前沿达到滤纸边缘1 cm处时，立即取出，用吹风机吹干，将滤纸沿虚线剪开，各喷上不同的显色剂，观察滤纸上出现的斑点颜色或产生的荧光，确定样品所含的成分。

3.2.1 乙醇提取液点样

喷碘化铋钾试剂（醋酸液），出现棕红色斑点，说明含有生物碱；喷等量混合的2％铁氰化钾水溶液与2％的三氯化铁乙醇溶液，有蓝紫色斑点出现，表明含有酚性成分；喷体积比为1∶3∶4的0.1％甲基红乙醇溶液、0.1％甲基橙水溶液与0.1％石蕊水溶液，出现黄红色斑点，说明含有有机酸；喷新配制的5％的磷钼酸乙醇溶液，于120℃烘箱中烘5 min，发现有蓝色斑点出现，说明含有甾醇及萜类化合物；先在紫外灯下观察发现有黄色荧光斑点出现，再喷1％的三氯化铝试剂后，发现荧

光显著加强，说明含有黄酮及苷类化合物；喷其余显色剂，均无特殊现象发生。

3.2.2 乙醚提取液点样

喷碘化铋钾试剂（醋酸液），出现棕红色斑点，说明含有生物碱；喷新配制的5％磷钼酸乙醇溶液，于120℃烘5 min，出现蓝色斑点，说明含有甾醇及萜类化合物；于紫外灯下观察发现有黄色荧光，喷0.2％的茚三酮丙酮溶液，于8O℃烘箱中烘10 min，有蓝紫色斑点出现，说明含有氨基酸；喷1％的三氯化铝试剂后发现荧光显著加强，表明含有黄酮及苷类化合物；喷其余显色剂，均无特殊现象发生。

综上所述，试管预试法和圆形滤纸层析法对北芪菇化学成分进行的系统研究表明，北芪菇中含有氨基酸、多肽、蛋白质、有机酸、多糖及其苷类、生物碱、黄酮及其苷类、酚性成分、植物甾醇、三萜成分、挥发油成分。另外，通过其它实验检测到北芪菇内还含有微量元素硒。由于其具有独特的功效，所以对其化学成分有待进一步系统分析和研究。

[1]王衍诗.百般求医疾难去，食茹三斤癣尽除[N].光明日报，1992-12-02（2）.

[2]刘润平.药食同源"北芪菇"[J].农产品加工，2009（11）：15-16.

[3]叶镇鹏.山西开发药用菌北芪茹[J].天津中医，1993（2）：26.

[4]罗幼明.六种新型食用菌种[J].湖北林业科技，1999（3）：37.

[5]潘保华，李彩萍，贾蕴强，等.北芪菇对银屑病疗效的初步研究[J].食用菌，1994，6（5）：43.

[6]董小萍.中药品种品质与化学成分实验[M].上海：上海科学技术出版社，2003.

[7]北京医学院，北京中医学院.中草药成分化学[M].北京：人民卫生出版社，1980.

[8]龚宁，马养民，傅建熙.蝙蝠葛茎叶中化学成分的研究[J].陕西林业科技，2001（3）：8-10.

〔责任编辑 杨德兵〕

Chem ical Constituents in BeiqiMushroom s

WANG Run-mei1，YUE Zhi-jing2，ZHANG Yong-fang1
（1.School of Agronomy and Life Sciences；2.School of Chemistry and Chemical Engineering，Shanxi Datong University，Datong Shanxi，037009）

In this paper chemical constituents of Beiqimushroomswere analysed by pre-test tubemethod and round filter paper method.It was found that the Beiqimushroom contained amino acids，peptides，proteins，organic acids，polysaccharides，alkaloids，flavonoids，phenolic compoundsplant sterols，three terpene composition，volatile oil.

Beiqimushrooms；constituents；test tubemethod；round filter papermethod

S567.3+9

A

1674-0874（2012）04-0032-02

2012-02-05

王润梅（1963-），女，山西大同人，硕士，教授，研究方向：生化与分子生物学。