芋病毒病田间调查及毒氟磷对芋病毒病的防治效果

王彦芬，Syeda Amber Kazmi，曲林宁，王国平，2，刘玉平，洪霓，2

（1.华中农业大学植物科学技术学院，湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室，武汉，430070；2.华中农业大学农业微生物学国家重点实验室；3.武汉市蔬菜科学研究所）

芋病毒病田间调查及毒氟磷对芋病毒病的防治效果

王彦芬1，Syeda Amber Kazmi1，曲林宁1，王国平1，2，刘玉平3，洪霓1，2

（1.华中农业大学植物科学技术学院，湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室，武汉，430070；2.华中农业大学农业微生物学国家重点实验室；3.武汉市蔬菜科学研究所）

对芋病毒病及类似病害症状进行调查，其症状表现主要分为羽状花叶、叶片向上卷曲并伴有黄化或花叶、脉间黄化、明亮褪绿黄斑、褪绿斑点（斑驳）及叶片皱缩和叶缘黄化。采用RT-PCR和PCR技术对随机采集的32份表现症状的鄂芋一号样品进行了芋花叶病毒（DsMV）和芋杆状病毒（TaBV）2种病毒的检测，检出率均为68.8%。同时，利用30%毒氟磷可湿性粉剂500倍液和1 000倍液对芋病毒病进行田间药效试验，第一次施药后10 d调查，毒氟磷可湿性粉剂500倍液和1 000倍液的防治效果分别为30.9%和24.9%；第二次施药后15 d调查，500倍液和1 000倍液防治效果分别为72.8%和59.4%。田间药剂试验结果表明，毒氟磷可湿性粉剂500倍液比1 000倍的防治效果好，从田间芋头长势可看出，毒氟磷对芋头生长有明显的促进作用。

芋；病毒病；防治效果；毒氟磷

芋[Colocasia esculenta（L.）Schott]是天南星科（Araceae）芋属（Colocasia）多年生宿根草本植物，作为粮食和蔬菜在世界各地广泛种植[1，2]。芋主要通过球茎进行繁殖，属典型的无性繁殖作物，生产中长期的无性繁殖导致病毒在芋植株内积累，病毒病为害逐年加重，植株衰退而造成其产量下降，品质变劣[3~5]。为了明确我国芋病毒病害在田间发生特点及为害状况，在武汉市蔬菜科学研究所试验基地选取了多年繁殖芋栽培地，调查了芋病毒病的发生与病毒侵染状况，并在此基础上采用毒氟磷开展了田间药剂防治试验研究，以期寻找一种高效、低毒、低残留的防治芋病毒病的新型药剂。

1 材料与方法

1.1 试验材料

30%毒氟磷可湿性粉剂，为广西田园生化股份有限公司生产，分别稀释500倍和1 000倍后进行叶面喷雾处理。芋品种为鄂芋一号。

1.2 病毒病调查及病毒检测

试验在武汉市蔬菜科学研究所芋病毒病发生比较严重的芋头田进行。2012年5～6月对选定试验地的芋病毒病及类似病害症状表现进行调查，记录症状类型及严重度。同时根据症状特点，随机采集表现不同症状的植株叶片，在室内采用PCR和RT-PCR方法对1种杆状DNA病毒（芋杆状病毒，Taro bacilliform virus，TaBV）和1种RNA病毒（芋花叶病毒，Dasheen mosaic virus，DsMV）进行了检测。

1.3 试验方法

共设500倍液和1 000倍液毒氟磷喷雾2个处理，以未施药区为对照，以2行为1个处理重复，每个处理设3个重复，共喷药处理2次，间隔10 d和15 d。

施药前（2012年5月31日）、第一次施药后10 d（6月10日）、第二次施药后10 d（6月25日），分别调查每个处理区表现病毒病症状的植株数量及严重度。

防治效果根据处理区与对照区的病害发生程度进行比较分析。根据田间病毒病症状特点及叶片病害发生程度初步分为3级，即：0级，无病斑；1级，病斑明显可见，但病斑较小；2级，病斑明显可见，且较大。病情指数=[∑（病叶数×相应级数）/（调查总叶数×最高级数）]×100[6]；防治效果（%）=[（对照区病情指数-处理区病情指数）/对照区病情指数]× 100%。

2 结果与分析

2.1 芋病毒病田间调查结果

在进行药剂处理前，随机调查了1 200株鄂芋一号芋头植株，结果表明鄂芋一号大田植株病毒病发生比较普遍，症状表现主要分为羽状花叶、叶片向上卷曲并伴有黄化或花叶、脉间黄化、明亮褪绿黄斑、褪绿斑点（斑驳）及叶片皱缩并沿叶缘褪绿（图1），各种症状发病率分别为14.8%、15.8%、8.8%、24%、18.8%和11.2%。

2.2 田间芋头中DsMV和TaBV的RT-PCR检测

从田间随机采集表现不同症状的鄂芋一号样品，采用RT-PCR技术检测结果显示，32份芋样品中22份带有DsMV和TaBV，片段长度分别为 313 bp和 570 bp（图2），其检出率均为68.8%。从表1可以看出，症状表现为羽状花叶、叶片向上卷曲、褪绿斑点的植株，感染DsMV和TaBV的比例较高；而症状表现为叶缘黄化的植株，感染DsMV和TaBV的比例最低。

2.3 毒氟磷对芋病毒病的田间防治效果

2012年5 ～6月田间小区药效试验结果显示，毒氟磷500倍液对芋病毒病的防治效果非常明显。从表2可以看出，第一次施药后10 d，毒氟磷500倍液的防治效果达到30.9%，显著高于毒氟磷1 000倍液的防效；第二次施药后，毒氟磷500倍液较毒氟磷1 000倍液的防效更加显著。以上结果表明，试验药剂毒氟磷可湿性粉剂500倍液对芋头病毒病有良好的防效，可明显减轻病毒病症状。

图1 芋病毒病田间症状类型

图2 RT-PCR检测部分鄂芋一号样品DsMV（A）和TaBV（B）结果

3 小结与讨论

由于芋多采用球茎无性繁殖，在长期的无性繁殖过程中植株病毒含量不断积累、种类增加，而导致病毒病为害逐年加重。本研究中，对从田间随机采集的表现不同症状的植株叶片进行了RT-PCR检测，检测结果显示其样品中携带DsMV和TaBV这2种病毒，检出率均为68.8%。从症状表现方面进行分析发现，症状表现为羽状花叶、叶片向上卷曲、褪绿斑点的植株，感染DsMV和TaBV的比例较高；而症状表现为叶缘黄化的植株，感染DsMV和TaBV的比例较低，推测叶缘黄化症状可能是由于植株生理因素而导致，而并非上述2种病毒所引起的，具体原因有待进一步研究。

毒氟磷为含氟氨基磷酸酯类新型抗病毒药剂，属于低毒化合物，对烟草、黄瓜、番茄病毒病具有优良的防治效果。本研究初步确定了毒氟磷对芋病毒病具有优良的防治效果；使用可湿性粉剂500倍液均匀喷雾，对芋病毒病的防治效果在70%左右，在芋病毒病盛发时用药一次，均匀喷雾，可以控制芋病毒病的扩展为害。

从处理区与对照区比较可看出，毒氟磷对芋头的长势具有明显的促进作用（数据在整理中），具有较高的推广应用价值。本研究中仅对芋花叶病毒的田间防效进行了试验,而有关室内的测试研究有待于进一步开展。

表1 芋病毒病症状类型及两种病毒检测结果

表2 毒氟磷可湿性粉剂对芋花叶病毒的防治效果

[1]Binoy Babu,Vinayaka Hegde,Makeshkumar T,et al. Detection and identification ofDasheen mosaic virusinfectingColocasia esculentain India[J].Indian J Virol,2011,22(1): 59-62.

[2]He X L,Miyasaka S C,Maureen M M Fitch,et al. Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation of taro (Colocasia esculenta(L.)Schott)with a rice chitinase gene for improved tolerance to a fungal pathogenSclerotium rolfsii[J].Plant Cell Rep,2008,27:903-909.

[3]Kamal Sharma K,Ajay Kumar Mishra A K,Misra R S. Identification and characterization of differentially expressed genes in the resistance reaction in taro infected withPhytophthora colocasiae[J].Mol Biol Rep,2009,36:1 291-1 297.

[4]李永伟．天南星科植物病毒研究[D]．杭州：浙江大学，2002．

[5]Reyes G,Ramsell J N E,Nyman M,et al.Sequence characterization of Dasheen mosaic virus isolates from cocoyam in Nicaragua[J].Arch Virol,2009,154:159-162.

[6]杨连来.黄瓜白粉病菌对己唑醇的敏感基线及实验室抗性获得[J].植物保护学报，2007，34（4）：431-435.

Field Investigation of Taro Virus Diseases and Efficiency Evaluation of Dufulin on Controlling Them

WANG Yanfen1,SYEDA Amber Kazmi1,QU Linning1,WANG Guoping1,2,LIU Yuping3,HONG Ni1,2(1.College of Plant Science and Technology,Key Lab of Crop Disease Monitoring and Safety Control in Hubei,Huazhong
Agricultural University,Wuhan 430070;2.National Key Lab of Agro-microbiology,Huazhong Agricultural University; 3.Wuhan Vegetable Research Institute)

In this paper,we surveyed virus and virus-like diseases on taro[Colocasia esculenta(L.)Schott]cultivar E'yu No.1,and the main symptoms on the leaves were as follows:feathery mottle,curled-up leaves with yellowing or mosaic, interveinal yellowing,bright yellowing spots,chlorotic mottle,leaf crinkle and margin yellowing.Totally,32 samples showing obvious symptoms were randomly collected and detected for both dasheen mosaic virus(DsMV)and taro bacilliform virus (TaBV)by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR)and PCR.The results showed that the infectious rates of the both viruses were 68.8%.The field efficacy test for taro virus diseases was carried out by using 500 and 1 000 times diluted solutions of 30%Dufulin wettable powder(WP),and their control efficiency were 30.9%and 24.9% respectively at 10 days after the first spraying,and increased to 72.8%and 59.4%at 15 days after the second spraying.The results showed that 500 times diluted solution of 30%Dufulin WP had higher controlling efficiency to taro virus diseases than that of 1 000 times diluted solution.Meanwhile,it was found that Dufulin could improve the growth of taro.

Colocasia esculenta(L.)Schott;Virus diseases;Dasheen mosaic virus;Control effect;Dufulin

10.3865/j.issn.1001-3547.2012.16.039

国家农业行业专项计划项目（nyhyzx200903017-08）

王彦芬（1987-），女，硕士，研究方向为植物病毒学

洪霓，通信作者，教授，研究方向为植物病毒学，电话：027-87283278，E-mail：whni@mail.hzau.edu.cn

2012-06-30