P-糖蛋白在非霍奇金淋巴瘤组织中的表达及意义

王雅琦 王美鉴 邱志敏 涂建仁 苏永峰 董涵之

非霍奇金恶性淋巴瘤(non-Hodgkin’s lymphoma,NHL)是少数几种可以完全治愈的肿瘤之一。对于初治患者,常规全身化疗仅有50%～70%的患者可获得完全缓解[1],约60%的NHL患者治疗后不能缓解或缓解后复发。有研究表明[2],多药耐药(multidrug resistance,MDR)基因表达对恶性血液病的耐药及化疗效果有重要意义。本文主要阐述MDR基因编码的P-糖蛋(P-glucoprotein,P-gp)在NHL患者中的表达情况及其相关的临床意义。

1 材料与方法

1.1 一般资料

收集我院2002～2007年经病理确诊的NHL病例共117份，其中初治76例,化疗后复发/难治41例；男性68例,女性49例，年龄24～76岁，中位年龄47岁；随访至2010年12月；临床分期(Ann Arbor分期)Ⅰ期8例，Ⅱ期33例，Ⅲ期47例， Ⅳ期29例；恶性程度(1985年成都分类方案分类)：低度恶性25例，中度恶性54例，高度恶性38例。

1.2 实验方法

采用免疫组化染色。参照试剂盒说明书操作，用已知阳性切片作阳性对照，PBS代替一抗作阴性对照。所用试剂盒均购自福建迈新公司。胞质和(或)胞膜呈黄色或棕黄色为P-gp 阳性细胞。结果判定:根据阳性细胞占肿瘤细胞的比例来判断结果：>10%为阳性。

1.3 统计学方法

所用数据资料用SPSS13.0统计软件处理，行χ2检验，检验水准α= 0.05 。采用Kaplan-Meier法做生存分析，Cox回归进行相关分析。生存时间是从手术日期(病理确诊之日)起到随访日期或由于复发、转移而死亡的日期为止。生存期从治疗日起到死亡或末次随访日(2010年12月) 。

2 结果

2.1 NHL患者中P-gp表达情况

初治患者中P-gp阳性表达23例(30.26%)，复发/难治的患者中阳性表达28例(68.29%)，2组比较，P<0.05，有统计学差异。

2.2 P-gp的表达对生存时间的影响

应用Kaplan-Meier法计算初治组与复发/难治组患者的生存时间与不同P-gp表达之间的关系。结果显示，P-gp阴性表达者生存时间明显长于阳性表达者(P<0.05),初治P-gp阴性表达患者生存时间最长,见图1。

图1 生存曲线图

2.3 NHL患者生存时间的多因素分析

Cox回归分析结果显示，患者性别、年龄、有无B症状与预后无关(P>0.05)，而P-gp表达、临床分期、恶性程度、血清LDH水平与患者死亡风险显著相关(P<0.05)，见表1。

表1 回归分析结果

3 讨论

MDR 是指肿瘤细胞接触1种抗肿瘤药物并产生耐药后，同时对结构和作用机理不同的多种天然来源的抗肿瘤药物具有交叉耐药性，包括天然性耐药和获得性耐药2种表型[3]。人类基因组中存在2个MDR基因，即MDR1、MDR2基因。现已表明，只有MDR1基因与人体肿瘤细胞耐药有关。P-gp为MDR1 基因的蛋白表达产物，相对分子质量为170 kD的跨膜糖蛋白，是1种ATP依赖性外排泵，能将药物泵出细胞外，使细胞内药物浓度下降及药物再分布，减少靶点部位的药物浓度，使药物对细胞的毒性作用减弱或丧失而导致耐药[4]。此外，P-gp还具有凋亡抑制作用，保护耐药细胞免于细胞毒性药物诱导的多种形式的半胱氨酸蛋白酶依赖性凋亡，而使细胞获得耐药性[5]。

本研究结果显示，无论是初治的非霍奇金淋巴瘤患者还是复发/难治者，其组织中均存在P-gp表达(阳性率分别为30.26%、68.29%)，且阳性表达者平均生存期明显小于阴性表达者(初治组20.5个月:49.1个月，复发/难治组16.7个月:30.3个月)，表明恶性淋巴瘤细胞有不同程度的MDR /P-gp的表达，对抗肿瘤治疗药物具有天然的或者获得性耐药；且复发者P-gp 表达水平明显高于初治者，与国内外报道相一致[6,7]。

P-gp的表达与肿瘤的耐药及预后密切相关， MDR1表达增加的肿瘤对生物碱类高度耐药，对蒽环类中度耐药，对VP-16低度耐药，对烷化剂或抗代谢类药物及顺铂等不耐药[8,9]。Tada等认为[10]，膀胱癌患者MDR表达与阿霉素耐药明显相关，且化疗后残留肿瘤的MDR表达比未经治疗的肿瘤高5.7倍。而晚期鼻咽癌患者MDR1阳性，则预示全身化疗后总生存率较低[11]。由此可见，P-gp表达不仅可预测患者对化疗药物的敏感性，指导临床有针对性地选择最有效的化疗药物；其次P-gp高表达预示患者预后不良。本研究表明，P-gp水平的高表达是NHL患者死亡的危险因素之一。

近年来，随着研究的不断深入，人们迫切需要寻找某种逆转剂来逆转肿瘤的多药耐药,目前被证实具有逆转P-gp介导的MDR作用的药物和制剂很多，包括钙离子阻滞剂如维拉帕米、尼卡地平等；免疫调节剂如环胞菌素A及其类似物(奎宁类)、利血平等[12]。但由于其不良反应大、临床疗效评估难，或是影响药物或肝代谢等，临床上难以推广。目前， MDR1基因治疗是研究的热点[13,14]，尤其是基因技术逆转肿瘤多药耐药因其特异性和无毒性，将具有广阔的前景。

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