麻杏止咳片的薄层鉴别及HPLC含量测定研究

2012-01-15任娟耿祥飞

大家健康(学术版) 2012年13期

任娟耿祥飞

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目的建立麻杏止咳片中麻黄的薄层鉴别及麻黄碱含量的测定方法。方法采用薄层色谱法对麻黄进行鉴别;采用高效液相色谱法对麻黄碱进行含量测定。结果在薄层色谱上供试品与对照品及对照药材色谱相应位置上显相同的颜色斑点，阴性对照无相应斑点。盐酸麻黄碱HPLC测得中线性关系良好(r=0.9995)。结论本法简便、可靠、准确，可用于该制剂的质量控制。

麻杏止咳片;薄层鉴别;高效液相色谱法

引言

麻杏止咳片主要由麻黄、苦杏仁、石膏、炙甘草等四味中药组成，其功效是镇咳，祛痰，平喘。麻杏止咳片中的含量影响到用药安全问题，故对麻杏止咳片中麻黄碱的含量测定具有重要意义［1］。本实验选取麻黄建立一种简单、方便、可行的薄层鉴定方法，对麻杏止咳片中的麻黄进行盐酸麻黄碱的HPLC含量测定，采用薄层色谱对方中君药麻黄进行鉴别和采用高效液相色谱法测定其盐酸麻黄碱，为建立该制剂的质量标准提供了依据［2－3］。

1.材料与仪器

盐酸麻黄碱对照品，购自中国药品生物制品检定所。

LC－2010C高效液相色谱仪(日本岛津)，UV－2450紫外分光光度计，薄层板加热器(瑞士Precisa);

2.方法与结果

(1)麻黄的薄层鉴别

①供试品溶液的制备

取本品8片，研细，加浓氨试液10滴与氯仿20ml，超声处理20分钟，滤过挥干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。

②阴性对照溶液的制备

按麻杏止咳片的工艺制成阴性样品，再按“①”操作，得对照溶液。

③对照药材的制备

取麻黄对照药 1g，加甲醇 10ml，超声处理20min，滤过蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。

④对照品溶液的制备

取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成溶液，作为对照品溶液。

⑤薄层层析及结果

照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述供试品溶液10μl、阴性对照溶液10μl、对照药材溶液和对照品溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂铺制的硅胶G薄层板上，以氯仿－甲醇－浓氨试液(20∶5∶0.5)为展开剂，喷以茚三酮试液，于105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱和对照药材色谱相应的位置上，显相同的暗红色斑点，阴性样品无干扰(见图1)。

图1:(1－3.麻杏止咳片样品;4.麻黄对照药材;5.麻黄碱对照品;6.阴性对照品)

(2)盐酸麻黄碱的含量测定

①色谱条件

色谱柱:Diamonsil C18(250mm ×4.6mm，5μm);流动相:乙腈- 水(1mL·L－1磷酸和 1mL·L－1三乙胺)3:97;流速 1mL·min－1;检测波长207nm。

②供试品溶液的制备

取本品10片，研细粉约0.5g加入浓氨试液1.5ml，振摇，加三氯甲烷 50ml，超声(120W，40KHz)30min，至室温，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，加0.1%盐酸甲醇溶液2ml，摇匀，即得。

③对照品溶液的制备

称取麻黄碱对照品10.04mg，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

④阴性对照品溶液的制备

按“②”供试品溶液的制备方法操作，制成阴性对照溶液。

⑤测定波长的选择

麻黄碱对照品在207nm波长处有最大吸收，故选择207nm为本品的测定波长(见图2)。

图2 盐酸麻黄碱对照品紫外光谱图(甲醇)

⑥系统适应性试验

与供试品溶液色谱和盐酸麻黄碱对照品色谱比较，结果表明阴性样品无干扰(见图3)。

图3 麻杏止咳片HPLC图

注:A为盐酸麻黄碱对照品色谱图;B为供试品溶液色谱图;C为阴性溶液色谱图.

结论

经实验证明，对麻杏止咳片中麻黄的薄层鉴别，其斑点清晰，展开效果好。采用HPLC法对盐酸麻黄碱进行含量测定，方法重复性好，灵敏度高，定量准确，分离度高，可作为麻黄止咳片质量控制方法之一，为麻杏止咳片的质量控制和开发提供参考依据。

1 国家中医药管理局中华本草编委会.中华本草(精选本)［M］.上海:上海科技出版社，1998:830.

2 吴贻清，郭长强，程琳，等.麻黄中麻黄碱薄层层析检测方法选择［J］.时珍国医国药，1999，10(7):553-554.

3 Haller CA，Benowitz NL.Adverse cardiovascular and central nervous system events associated with dietary supplements containing ephedra alkaloids［J］.N Engl J Med，2000，343(25):1833-1838.