盐酸环丙沙星、恩诺沙星和诺氟沙星对孔雀鱼急性毒性试验研究

房英春，齐 跃，李 莹，尚鹏钊，孙蓬蓬

（沈阳大学生物与环境工程学院，辽宁沈阳 110044）

盐酸环丙沙星、恩诺沙星和诺氟沙星对孔雀鱼急性毒性试验研究

房英春，齐 跃，李 莹，尚鹏钊，孙蓬蓬

（沈阳大学生物与环境工程学院，辽宁沈阳 110044）

在室内常温、静水条件下，利用盐酸环丙沙星、恩诺沙星和诺氟沙星3种药物，采用生物毒性试验方法对孔雀鱼进行急性毒性试验研究.3种药物都设置了5个质量浓度梯度，盐酸环丙沙星药物质量浓度为300、350、400、450和500mg／L，诺氟沙星药物质量浓度为200、225、250、275和300mg／L，恩诺沙星药物质量浓度为25、50、75、100和125mg／L.通过24、48和96h中毒和死亡情况的观察，结果表明：盐酸环丙沙星、诺氟沙星和恩诺沙星对孔雀鱼的安全质量浓度分别为：300、200、25mg／L，最低致死质量浓度分别为350、225、50mg／L，半致死质量浓度为365、237、70mg／L，3种药物对孔雀鱼的毒性依次为：恩诺沙星＞诺氟沙星＞盐酸环丙沙星.

孔雀鱼；盐酸环丙沙星；恩诺沙星；诺氟沙星；急性毒性试验

鱼类是水生食物链的一环，也是重要的经济动物.在污染水体中，当污染物达到一定浓度时，就会引起鱼类各种中毒反应，例如行为失常，组织器官病变，生理功能紊乱乃至死亡.在人为控制条件下，进行鱼类毒性实验，不仅用于化学品毒性强度测定、水体污染程度、废水及其处理效果检查，也可为制定水质标准、评价环境质量和管理废水排放提供科学依据.

一般观赏鱼都是经过长期驯化变种而来，比较娇贵，所以环境也相对稳定，一旦管理不善很容易引起疾病.和其他热带鱼一样，孔雀鱼作为观赏用鱼引入新加坡、中国台湾和大陆，现已繁衍分布于部分热带地区的河川下游及湖沼、沟渠中，其野生栖地呈现多样化，主要栖息于淡水流域及湖沼.其繁殖能力很强，并能耐受污染的水域，具群居性，性情温和，能与温和的中小型热带鱼混养，活泼好动，对环境的适应能力强，目前全世界都有分布.

孔雀鱼在人工养殖过程中已经具有了较为成熟的技术和经验，在观赏鱼市场具有价格合理、适于养殖的特点，深受养殖者和业余爱好者欢迎.但该鱼也易发生疾病.对于常见的鱼病，国内已有较多的防治药物，然而盐酸环丙沙星、恩诺沙星、诺氟沙星对一般养殖鱼类可允许的计量对孔雀鱼却不一定适用.因此，本实验采用上述3种药物对该鱼的急性毒性试验研究，不仅对孔雀鱼且对其他观赏鱼的饲养、疾病防控、治疗及对养殖水体的健康持续利用等方面都具有借鉴和指导意义.

1 材料与方法

1.1 材料

实验用鱼为孔雀鱼［1］，购于沈阳市北市花鸟鱼虫市场，规格整齐，反应灵敏，鱼体健康［2］.平均全长3.2cm，平均体重0.35g.试验用药分别是：盐酸左氧氟沙星胶囊（诺倍康）国药准字H20010731，上海天龙药业有限公司，规格为0.1g（以左氧氟沙星计）；诺氟沙星胶囊（华源锋）国药准字H2102700，上海华源长富药业集团辽宁制药有限公司，规格为0.1g；恩诺沙星注射液（贝诺星）兽用，兽药字（2007）100151295，江苏华东贝尔生物药业有限公司，规格为10ml：恩诺沙星250mg.

1.2 方法

取诺氟沙星200、225、250、275、300mg分别溶于100mL备用水中，并在100mL备用水中试探性滴入体积分数为30%醋酸.先将200mg诺氟沙星溶于100mL水中，逐滴入体积分数为30%醋酸，同时用玻璃棒不断搅拌，直到诺氟沙星完全溶于醋酸中，无沉淀，无悬浮颗粒.换药要轻、慢，尽量不要干扰鱼的情绪.换药过程控制在10 min之内.盐酸左氧氟沙星和恩诺沙星溶液配置与诺氟沙星溶液一致.

实验以预实验结果确定实验药物浓度梯度.3种药物分别设置5个浓度，盐酸左氧氟沙星药物质量浓度为300、350、400、450和500mg／L，诺氟沙星药物质量浓度为200、225、250、275和300 mg／L，恩诺沙星药质量物浓度为25、50、75、100和125mg／L.同时设空白对照组.每组实验用鱼10尾.每天检测pH值、溶解氧（DO）和水温（t），保持pH值在6.0～8.5，DO值在5mg／L，t控制±2℃.实验期间，控制换药在10min内，不对溶液强烈充气，避免产生对鱼类的干扰行为，不投食，实验用水经充分曝气［3-4］.

实验以96h为一个实验周期，在24、48和96h时记录实验鱼的死亡数，确定鱼类死亡50%时的受试物质量浓度，半数致死浓度用96h LC50表示，记录无死亡的最大质量浓度和导致鱼类全部死亡的最小实验浓度［5］.

2 实验结果

在室内常温、静水条件下，利用盐酸左氧氟沙星、恩诺沙星和诺氟沙星3种药物，采用生物毒性试验方法对孔雀鱼进行急性毒性试验研究.三种药物分别设置了5个质量浓度梯度，盐酸左氧氟沙星为300、350、400、450和500mg／L，诺氟沙星为200、225、250、275和300mg／L，恩诺沙星为25、50、75、100和125mg／L.通过24、48和96h中毒和死亡情况的观察，结果表明：盐酸左氧氟沙星、诺氟沙星和恩诺沙星对孔雀鱼的安全质量浓度分别为：300、200、25mg／L，最低致死质量浓度分别为350、225、50mg／L，半致死质量浓度为365、237、70mg／L，三种药物对孔雀鱼的毒性依次为：恩诺沙星＞诺氟沙星＞盐酸左氧氟沙星.

2.1 盐酸左氧氟沙星对孔雀鱼的致死情况

根据表1可得盐酸左氧氟沙星对孔雀鱼的最低致死质量浓度为350mg／L，安全质量浓度为300mg／L.根据半致死质量浓度的计算方法可得孔雀鱼的半致死质量浓度为365mg／L.

表1 盐酸左氧氟沙星对孔雀鱼的致死率Tabel 1 Ciprofloxacin hydrochloride on guppies lethality rate

2.2 诺氟沙星对孔雀鱼的致死情况

根据表2可得诺氟沙星对孔雀鱼的最低致死质量浓度为225mg／L，安全质量浓度为200mg／L.根据半致死质量浓度的计算方法可得孔雀鱼的半致死浓度为237mg／L.

表2 诺氟沙星对孔雀鱼的致死率Tabel 2 Norfloxacin on guppies lethality rate

2.3 恩诺沙星对孔雀鱼的致死情况

根据表3可得恩诺沙星对孔雀鱼的最低致死质量浓度为50mg／L，安全质量浓度为25mg／L.根据半致死质量浓度的计算方法可得孔雀鱼的半致死质量浓度为70mg／L.

表3 恩诺沙星对孔雀鱼的致死率Tabel 3 Enrofloxacin on guppies lethality rate

本类药大量使用后，可能出现抗药性的趋向（在48和96h换药时鱼体对药物敏感性降低，猜测可能产生抗药性）.

3 讨 论

由表1～表3得出：

（1）最低致死质量浓度：盐酸左氧氟沙星为350mg／L；诺氟沙星225mg／L；恩诺沙星50mg／L.

（2）安全质量浓度：盐酸左氧氟沙星为300 mg／L；诺氟沙星200mg／L；恩诺沙星25mg／L.

（3）半致死质量浓度：盐酸左氧氟沙星为365 mg／L；诺氟沙星237mg／L；恩诺沙星70mg／L.

（4）3种药物对孔雀鱼的毒性大小依次为恩诺沙星＞诺氟沙星＞盐酸左氧氟沙星.

（5）该试验以孔雀鱼为试验用鱼，利用盐酸左氧氟沙星、恩诺沙星和诺氟沙星作为试验药物，对其毒性作尝试性研究.旨在寻找其安全用药范围，减少药物对鱼体的危害，使药残达到最小，减小污染，促进大规模的观赏鱼养殖业持续、健康发展.

（6）氟喹诺酮类药品已经成为水产养殖中普遍使用的高效抗感染药物之一，被广泛应用于各种水产动物疾病的预防和治疗［6］.国内外对环丙沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、恩诺沙星等氟喹诺酮类药物在水产动物体内的应用都有研究，并总结分析了生理差异、药理、环境等各因素对这些药物在水产动物体内的药物动力学和残留消除规律的影响.对于常见的鱼病，国内已有较多的防治药物，然而盐酸左氧氟沙星、恩诺沙星、诺氟沙星对观赏鱼中的孔雀鱼及其鱼病防治的可允许计量尚无报道.本实验采用鱼的急性毒性试验，对这三种生物药的应用进行研究，目的是给出三种药对孔雀鱼正确合理的安全质量浓度.试验结果将对观赏鱼的水环境保护和健康养殖提供依据.

［1］杨鸢劼.鱼类作为实验动物在环境毒理学研究中的应用［J］.水产科技情报，2010，37（4）：187-190.

［2］尚礼.孔雀鱼的饲养和繁殖［J］.花木盆景：花卉园艺，2001（6）：50.

［3］周兵，韦其锋，杨淞，等.3种常用水产药物对孔雀鱼和月光鱼的急性毒性试验［J］.水利渔业，2008，28（2）：89-91.

［4］房英春，李越，李胜男.二溴海因和三氯异氰尿酸对孔雀鱼的急性毒性试验［J］.水产养殖，2005，26（6）：38-39.

［5］周永欣，张宗涉.水生生物毒性试验方法［M］.北京：农业出版社，1989：50-52.

［6］郭海燕，马跃岗，朱林，等.氟喹诺酮类药物在水产动物体内的药动学和残留规律［J］.水生态学杂志，2008（1）：1-8.

Acute Toxicity Experience to Guppy with Ciprofloxacin HCI，Enrofloxacin and Norfloxacin

FANG Yingchun，QI Yue，LI Ying，SHANG Pengzhao，SUN Pengpeng

（College of Biological and Environmental Engineering，Shenyang University，Shenyang 110044，China）

Under the room temperature，static water conditions，the experiment took advantage of ciprofloxacin HCI，enrofloxacin and norfloxacin.And it studied the acute toxicity experience to the guppy with the experimental methods of comparative analysis and toxicology.This experiment will firstly set 5teams of concentration gradient for the 3drugs.And it is ciprofloxacin HCI 300、350、400、450and 500mg／L，norfloxacin 200、225、250、275and 300mg／L，enrofloxacin 25、50、75、100and 125 mg／L.Under the observation of poisoning and death in 24，48and 96h，the guppies＇safe concentrations of ciprofloxacin HCI，enrofloxacin and norfloxacin are：300、200、25mg／L，the minimum lethal oxygen concentration：350、225、50mg／L，half lethal concentration：365、237、70mg／L.The experiment result shows：enrofloxacin has the strongest toxicity，and then the norfloxacin，and ciprofloxacin HCl has the weakest.

guppy；ciprofloxacin hydrochloride；enrofloxacin；norfloxacin；acute toxicity test

Q 95-3

A

1008-9225（2012）03-0015-03

2011-12-27

辽宁省教育厅科学技术研究课题（2008Z148）.

房英春（1960-）女，辽宁锦州人，沈阳大学教授.

王 颖】