绞股蓝对断奶仔猪抗氧化能力及免疫功能的影响

申红春

(恩施职业技术学院 生物工程系，湖北 恩施 445000)

中草药制剂具有促进畜禽生长和动物保健的作用，且在生产应用上具有毒性低、残留低、无耐用性、经济实用等独特特点，因此被广泛应用于畜牧业生产.

中草药绞股蓝不仅具有丰富的营养物质(如氨基酸、不饱和脂肪酸、微量元素、维生素等)，还具有激素样作用、抗生素样作用，可显著提高机体免疫力；并能改善饲料适口性、增加食欲、促进营养物质的消化吸收[1].目前，中草药约有5 000种可用于添加剂.

绞股蓝〔Gyrtostemmapentaphyllum(Thunb.)Makino〕为葫芦科绞股蓝属多年生攀缘草质藤本植物，又名七叶胆、公罗锅底.绞股蓝以全草供药食兼用，味苦、性寒，具有清热解毒、补气、止咳、祛痰之功效[2].有研究报道，绞股蓝具有多种生物活性，如能够调节机体免疫力，抗肿瘤，降低血脂，心血管保护等；研究表明，绞股蓝可刺激和调节人体免疫系统，增强人体抵抗力.其不仅能直接清除自由基，并可降低自由基对细胞膜上脂质过氧化作用，因而具有抗衰老的功效.绞股蓝作为饲料添加剂，能使动物得到所需的微量元素的同时，促进食欲，提高动物机体本身的免疫力[3-5].本文将进行研究日粮中添加不同剂量的绞股蓝，探讨绞股蓝对断奶仔猪免疫功能的影响，为今后开发绞股蓝在猪饲料添加剂中的广泛应用提供依据.

1 材料与方法

1.1 试验动物及试验设计

选用240头21 d断奶的杂交仔猪，根据体重相近，公母各半的原则随机进行分组，分别为对照组和试验I组、Ⅱ组、Ⅲ组.对照组饲喂基础日粮，试验I组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组在基础日粮上分别添加不同剂量的绞股蓝，即0.5%、1.0% 、2.0%，每个处理设置3个平行，每个平行20头猪.适应期7 d，试验周期为28 d.

1.2 绞股蓝

试验所用绞股蓝购买于恩施医药有限公司,经鉴定为正品.于65℃烘干、粉碎备用.

表1 试验基础日粮配方和营养成分(风干样)

注：1.豆粕粗蛋白含量为43；鱼粉为国产鱼粉；CaHP04含2个结晶水2.预混料为每千克饲料含VA 12 000IU；VD32 500IU；VE 50IU ；VK32.5 mg；VB12.5 mg；VB27.5 mg；VB63.5 mg；VB120.025 mg；烟酸30.00 mg；生物素0.125 mg.Fe 119 mg；Cu 21 mg；Mn 56 mg；Zn 110 mg；碘 0.8 mg；Se 0.30 mg.

1.3 饲养管理

受试动物饲养在密闭 的半漏缝地板上，并且设置电热板供仔猪取暖，试验期间猪舍相对湿度维持在55%～70%.采食方式为自由采食，采食量以食后料略有剩余为标准.饮水方式为通过乳头式饮水器自由饮水.在每天8:00，11:30，14:00，18:30进行饲喂，试验期间随时观察仔猪采食和健康状况，每天最后一次饲喂后收集饲料残留量，记录动物的发病情况.每日定时打扫圏舍，定期消毒，按常规程序进行驱虫和免疫.

1.4 饲料配方及营养水平

试验基础日粮的配方及营养水平参照《猪营养需要》[6]与中国《猪饲养标准)(NY/T 65—2004)[7]进行设计.基础日粮配方及营养水平见表1.

1.5 血样的采集和处理

试验结束时，对受试动物进行称重并采集血样.采集样品的具体方法为每个组选取体重接近的健康仔猪1头，使用无菌注射器经前腔静脉采集血液约5 mL，立刻于室温下静置1 h，经3 000 r/min离心15～20 min，吸取上层的血清，并立即放入-20℃冰箱中保存，待测.

1.6 免疫功能指标的测定方法

测定血清的生化指标采用全自动生化分析仪(日立7180型).测定补体C3、C4及免疫球蛋白IgG、IgM、IgA则是采用免疫透射比浊法，购自南京建成生物工程研究所的试剂盒用于测定本试验中的酶活性，免疫球蛋白测定试剂盒购自浙江伊利康生物技术有限公司.

1.7 数据统计处理

试验数据的统计分析采用单因素方差分析进行统计分析(SAS 8.0软件)，若经F检验差异显著者再用LSD法进行多重比较，试验结果均以平均数加减标准差表示.

2 结果与分析

绞股蓝对断奶仔猪免疫功能的影响试验结果如表2中显示.从表2中可以看出，饲料中添加一定比例的绞股蓝能够提高断奶仔猪体内的血清免疫球蛋白含量.其中，试验Ⅰ组、试验Ⅱ组IgM、IgG含量高于对照组和试验Ⅲ组，并且具有显著性差异(P<0.05)，而对照组和试验Ⅲ组得结果差异不显著(P>0.05).此外，通过饲料中添加绞股蓝的方式还能够提高断奶仔猪体内血清补体的含量，其中试验Ⅰ组、试验Ⅱ组C3、C4含量明显高于对照组和试验Ⅲ组，并且具有显著性差异(P<0.05)，但是对照组和试验Ⅲ组差异不显著(P>0.05).从表3可以看出，与对照组相比，日粮中添加绞股蓝增加了仔猪血清中过氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、碱性磷酸酶(AKP)与酸性磷酸酶(ACP)的活力(P<0.05)，显著降低了血清丙二醛(MDA)含量(P<0.05)，在30日龄和55日龄时，与对照组相比，II、Ⅲ组SOD分别提高了11.83%、15.11%和30.19%、42.81%，GSH-PX分别提高了11.83%、40.07%和22.39%、28.14%，AKP分别提高了13.30%、32.46%和7.36%、12.43%，ACP分别提高了4.65%、6.93%和24.09%、34.94%，而MDA分别降低了32.01%、42.43%和48.68%、56.48%.Ⅱ组血清中SOD、GSH-PX、AKP与ACP的活力均高于Ⅲ组，但差异不显著(P>0.05).添加l%的绞股蓝可以提高血清SOD、GSH-PX、AKP与ACP的活力.以上结果表明，日粮中添加绞股蓝增加了肉仔鸡抗氧化能力，降低了血清中脂质过氧化物的生成.

表2 绞股蓝对断奶仔猪的免疫功能的影响(Mean±SD)

注:同行列间标有相同字母(a和b)者为差异不显著(P<0.05),下同.

表3 绞股蓝断奶仔猪的酶活性的影响(Mean±SD)

3 讨论

体液免疫是动物机体产生抗体的能力，是动物抵抗疾病的重要防御机制，这种免疫力取决于免疫球蛋白的种类和数量.IgA，IgM和IgG是血液中主要的免疫球蛋白，在抗体介导的防卫过程中占重要地位.仔猪血清中免疫球蛋白水平反映了其抵抗外界病原菌和病毒侵袭的能力.这些免疫因子在提供仔猪局部保护、预防肠道疾病发生方面发挥重要作用[8].IgG是动物自然感染和人工主动免疫后机体产生的主要抗体，能抵抗多种细菌与毒素的侵袭，能够有效地保护机体免受感染.IgM在机体受病原感染后与补体进行结合，致使病原体被溶解.IgA除发挥抗菌、抗病毒作用外，对动物机体的呼吸道、消化道等局部黏膜免疫也起着重要的“屏障”作用.C3是补体系统中的核心成分，是补体系统发挥效应功能的关键成分，C4能够保证补体活化稳定而有效地发生于抗体结合的细胞表面[9-10].

据国内外文献报道，许多中药或其活性成分对机体呈现小剂量或者低浓度促进机体免疫功能的现象，但是大剂量或者高浓度会抑制机体免疫功能.有文献报道，绞股蓝也具有这种双向免疫调节作用.钱新华等[11]发现绞股蓝多糖能提高小鼠血清中溶血素的含量，说明对体液免疫具有促进作用，但是在高剂量(100 mg/kg)下作用不明显.廖瑞芳等[12]发现，小剂量(2.5～20 mg/L)的绞股蓝总皂甙能催进淋巴细胞的转化，并能提高DNA聚合酶Ⅱ的活性，促进淋巴细胞DNA的合成，而大剂量(40 mg/L)则呈现相反的作用.本试验结果表明，试验Ⅰ组、试验Ⅱ组的免疫球蛋白IgA、IgG、IgM和补体C3、C4显著高于对照组.试验Ⅲ组中结果表明高剂量的绞股蓝对断奶仔猪的免疫功能影响较小，基本与文献报道中的试验结果相符.有研究报道，增加仔猪体内IgG水平有提高仔猪的抗感染能力、降低其腹泻的发病率与死亡率的作用[13]，试验组IgG水平的提高和降低腹泻率的的试验结果与此一致.

综上所述，日粮中添加1%绞股蓝能够显著提高免疫球蛋白IgA、IgG、IgA以及补体C3、C4含量，因此，饲料中添加1%绞股蓝可以作为饲料添加剂的最佳剂量.

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