紫外分光光度法测定刺五加总苷总黄酮软胶囊1中总苷含量

2011-12-30魏淑梅武桂萍崔玉海李绍铭

中国新技术新产品 2011年7期

魏淑梅武桂萍王莉崔玉海李绍铭

（哈尔滨仁皇药业有限公司黑龙江省中药提取物及中药创新药物研究重点实验室黑龙江省刺五加研究所哈尔滨 150300）

中药5类新药刺五加总苷总黄酮软胶囊是以刺五加总苷总黄酮提取物，加定量植物油和赋形剂经加工而制成软胶囊剂型。产品具有增强机体免疫力、缓解体力疲劳、抗抑郁的功效。其中所含的刺五加总苷为主要功效性成分，经现代药理学研究表明刺五加总苷具有增强机体非特异性防御能力，除具有免疫调节、抗肿瘤、抗衰老、抗辐射损伤及抗疲劳等作用外，还可治疗心脑血管疾病、糖尿病、神经衰弱等症。

1 仪器、试药与试剂

TU1901紫外分光光度仪(上海棱谱仪器仪表有限公司)；刺五加总苷总黄酮软胶囊（哈尔滨仁皇药业股份有限公司，批号：20110101，20110102，20110103）；紫丁香苷对照品 (中国生物制品检定所，批号：111574-200502，含量测定用）；甲醇为分析纯，水为纯化水，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 溶液的制备

2.1.1 对照品溶液的制备

精密称取紫丁香苷对照品5.14mg，置25ml量瓶中，加50%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。精密吸取3ml，置10ml量瓶中，用50%甲醇定容至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

2.1.2 供试品溶液的制备

取本品6粒,剪开,置100ml锥形瓶中少量正己烷洗尽油分,加甲醇50ml,超声30min,放冷,抽滤,滤液回收至干,残渣加2mol/L H2SO430ml,沸水浴回流2h,稍冷,加氯仿20ml回流30min,再用氯仿萃取3次,每次20ml,水洗两次,每次30ml,氯仿液回收至干,加甲醇约8ml溶解,加水定容至10ml,-2℃冷藏2h,微孔滤膜滤过,取续滤液,即得。

2.2 测定法

取样品适量，配制成与标准曲线浓度适中的浓度，与标准曲线同法处理,从标准曲线上读出供试品溶液的浓度，计算，即得。

2.3 方法学考察

2.3.1 线性试验

精密吸取紫丁香苷浓度为0.2056mg/ml的对照品贮备液 1、2、3、4、5 ml, 分别置于10ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,以吸收度为纵坐标，取样量为横坐标,进行线性回归,方程为Y=0.0087X+0.0035,r=0.9995。结果表明,紫丁香苷在20.56～102.8μg/ml线性良好。

2.3.2 精密度试验

取同一样品溶液连续进样6次,测得紫丁香苷的峰面积RSD=1.3%。

2.3.3 稳定性考察

同一样品溶液和对照分别在0,2,4,6,8 h进样,测得紫丁香苷浓度RSD=1.4%。表明样品溶液及对照溶液在8h内稳定。

2.3.4 重现性试验

取同一批号样品6份(201101),按2.1.2项下方法操作,分别测定总苷的含量,RSD=1.1%。表明方法重复性较好。

2.3.5 回收率试验

采用加样回收率测定方法。取刺五加软胶囊3粒,添加一定量(61.68μg)的紫丁香苷对照品溶液,按2.2.2项下方法操作,制备成加样回收供试液,并依法测定。结果紫丁香苷的平均加样回收率为98.92%,RSD=1.5%(n=5)。