高效液相色谱法分析丹参水溶性成分研究概况

季庆亮

(哈药集团中药二厂，黑龙江 哈尔滨 150078)

中药丹参为唇形科鼠尾草属植物丹参的干燥根及根茎，是常用的活血化瘀中药。丹参活性成分主要分为脂溶性成分和水溶性成分两类。国内外对丹参及其同属植物的脂溶性成分进行了大量研究，然而中医传统用药方法是用水煎剂，即丹参的水溶性部位。所以研究丹参水溶性成分更有意义。现就目前高效液相色谱法分析丹参水溶性成分方面的研究作一综述。

1 丹参素的HPLC测定

如注射用丹参（冻干）中丹参素钠的测定，就是以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以二甲基甲酰胺-甲醇-水-冰醋酸（4：4：90：2）为流动相；检测波长为281nm。代彩芹等报道，用反相HPLC法，以甲醇-0.4%醋酸(5:95)作流动相，检测波长281 nm。结果样品平均加样回收率为99.71%，RSD为0.96%。王杰民等采用以甲醇和0.25%醋酸溶液分别为流动相A和B的梯度洗脱技术，YWGC18H37色谱柱，对羟基苯甲酸为内标，280nm波长处检测。结果线性关系良好，丹参素的回收率为104.0%±1.7%。李正国等以水-甲醇-冰醋酸（94：4：0.6）为流动相，用 C18-ODS柱测定丹红注射液中丹参素的含量，检测波长278nm,外标法定量分析,结果样品平均加样回收率为100.90%,RSD为1.41%。余练康等以甲醇-0.2mol/L的醋酸铵(12:88)为流动相(硫酸调节PH2.2)，测定乐脉颗粒中丹参素的含量。

2 原儿茶醛的HPLC测定

向大雄等采用YWG-C18反相柱，甲醇-乙腈-冰乙酸-水（15：5：1：84）为流动相测定了不同丹参制剂中原儿茶醛的含量。王凌等以甲醇-水(15:85)为流动相(磷酸调节PH2.45)，检测波长281nm,用C18-ODS柱测定原儿茶醛含量。

3 丹酚酸B的HPLC测定

在2005版药典中丹参药材中丹酚酸B的测定是以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-乙腈-甲酸-水（30：10：1：59）为流动相；检测波长为286nm。测定丹酚酸B含量。王凤美等采用色谱柱Alltima C18，以乙腈-0.5%冰醋酸水溶液为流动相,进行梯度洗脱，流速1ml/min，检测波长290nm。程显隆等利用ODSC18柱,采用甲醇-乙腈-36%乙酸-水（33：12：1：55）为流动相。游勇基等采用甲醇-5%冰醋酸进行梯度洗脱。曹枫等采用甲醇-水（用甲酸调PH至2.5）作流动相，体积比为83：117，测定丹参三七配伍水煎液中丹酚酸B的含量。

4 多种组分的HPLC测定

张文婷等以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，用甲醇-0.5%醋酸溶液(20:80)为流动相,检测波长为280nm，测定丹参水溶性制剂中丹参素和原儿茶醛含量，两成分分离良好。王志平等以甲醇-冰醋酸-水（5：1：95）为流动相,检测波长为280nm，检测了丹参提取液的树脂吸附及醇沉工艺前后丹参素和原儿茶醛含量的变化，丹参素和原儿茶醛的保留时间分别为5min和8min，与其他峰分开。

测定丹参提取物中丹参素、原儿茶醛和丹酚酸B的含量，张文生等采用Alltima C18柱，乙腈和冰醋酸-水（1：25）为流动相，进行梯度洗脱，结果是三种成分均出现较好的峰。李向军等则采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，用乙腈-1%冰乙酸 (21:79)为流动相,检测波长为281nm。金樟照等采用甲醇（A）-0.5%冰醋酸水溶液（B）为流动相，进行程序梯度洗脱：0-60min A体积分数由10%线性改变至60%，60-80min A体积分数由60%线性改变至100%，检测波长为280nm。

游勇基等采用HypersilC18柱,以甲醇（A）-5%冰醋酸（B）为流动相，进行梯度洗脱：在0-5min,B体积分数为90%,5-10 minB体积分数由90%线性改变至65%，10-20min维持B体积分数为65%，检测波长为281nm,对羟基苯甲酸作为内标物，同时测定了丹参注射剂中的丹参素、原儿茶酸、原儿茶醛和丹酚酸B四种水溶性成分的含量，分离效果好。

黄炼栋采用RP-HPLC法测定丹参培养物中水溶性酚酸类化合物迷迭香酸和紫草酸B的含量。在Nova pak C18色谱柱上，以甲醇-乙腈-水（37：1：62），甲酸调 PH 至 2.67 为流动相，检测波长为280nm,可使两组分完全分离。

综上所述，本文介绍了目前高效液相色谱法分析丹参水溶性成分方面的研究进展。丹参水溶性成分在丹参的作用中占重要地位，在采用现代科学技术方法的基础上，随着对丹参活性成分及其药理作用等方面研究的深入，我们有理由相信，丹参这味传统而古老的中药必将具有更广阔的应用前景。