螺旋藻多糖提取优选工艺条件的研究
2011-12-27郝志欣安东臣
郝志欣，安东臣，黄 芬
(大连民族学院生命科学学院学生辽宁大连 116605)
螺旋藻多糖提取优选工艺条件的研究
郝志欣，安东臣，黄 芬
(大连民族学院生命科学学院学生辽宁大连 116605)
本研究以杭州螺旋藻为研究材料，对浸提pH值、温度、浸提固液比以及浸提次数作为单因素进行正交实验，通过方差分析得到螺旋藻水溶性多糖浸提工艺的优选组合，进而获得最大浸提率，为螺旋藻的深度开发利用提供参考。
1 材料与方法
1.1 样品来源及处理
(1)样品来源:实验样品为杭州螺旋藻。将样品研碎，干燥，密封在干燥器内待用。
(2)样品处理:准确称取0.5 g样品于250 mL烧杯中，每份加水150 mL，依实验确定的4个因素见表1。分别浸提1h，过滤，滤渣加150 mL水浸提，过滤，滤液合并，浓缩至10 mL，用5%三氯乙酸调pH值到中性(因为碱性条件下多糖易分解，不易保存)，取3 mL浓缩液加入3倍体积(即9 mL)的95%乙醇，在3 000 r·s－1离心20 min，收集沉淀得粗多糖。
表1 正交实验因素水平表
1.2 测定及标准曲线
将蒽酮－浓硫酸试剂(0.1 g蒽酮加50 mL的浓硫酸，现用现配)按下表处理标准样品，加完蒽酮－浓硫酸后立即盖盖并放入冰水中，冷却约1 min后放入沸水浴中，加热10 min后取出冷却至室温，用紫外分光光度计在620 nm处比色测定，每组实验做3个平行，结果见表2。由测定结果得出标准曲线回归方程:
A=0.0069 C － 0.002，R2=0.999
其中，A为吸光度值;C为葡萄糖浓度μg·mL－1。
表2 多糖含量测定标准曲线
2 结果
通过对单因素梯度实验和正交实验的结果分析，得到螺旋藻多糖的最佳浸提工艺条件:pH值为11，温度为80℃，固液比1:30，浸提次数为2次，每次浸提1 h。对螺旋藻多糖浸出率影响最大的因素是浸提次数，其次是pH值、固液比，而浸提温度没有显著影响。经醇沉及脱蛋白处理后的螺旋藻多糖浸出率最高可达4.213%。
3 讨论
通过对螺旋藻多糖提取过程中各环节的最佳条件的探讨，找到了一条提取螺旋藻多糖较好的工艺方法。应用柱层层析或气相色谱等方法测定多糖组分，有待于进一步深入研究。
［1］于红，张学成.螺旋藻多糖抗肿瘤作用的实验研究［J］.高新技术，2003(7):83－87.
［2］孙建光，谢应先.螺旋藻多糖的组成与功能及影响藻类多糖生成的因素［J］.海洋科技，1997(4):14－17.
［3］吴可，于宙.金针菇子实体多糖分离最佳工艺研究［J］.食品与发酵工业，1998，24(4):5－7.
［4］高向东，吴梧桐.螺旋藻多糖抗肿瘤作用的研究［J］.中国药科大学学报，2000，31(6):458－461.
R282.4
A
(责任编辑 刘敏)
1009－315X(2011)05－0543－01
2010－06－12;最后
2011－03－28
大连民族学院太阳鸟计划资助项目(20080330)。
指导教师:杨宝灵(1969－)，女，内蒙古通辽人，高级实验师，主要从事细胞生物学研究。
