非洛地平缓释片的研制及其体外释放研究

朱雨秋，郭圣荣

(1.上海交通大学药学院 ，上海 200240；2.上海爱的发制药有限公司，上海 201702)

非洛地平缓释片的研制及其体外释放研究

朱雨秋1,2，郭圣荣1

(1.上海交通大学药学院 ，上海 200240；2.上海爱的发制药有限公司，上海 201702)

目的研制非洛地平缓释片，评价其与原研制剂的体外释放度相似性。方法采用骨架片技术，通过研究骨架材料种类、粘度、用量，稀释剂及制备工艺对释放的影响，研制非洛地平缓释片，通过相似因子法研究其与原研制剂在体外4种不同pH条件下的释放度的差异。结果以HPMC为骨架材料，工艺采用湿法制粒法，乙醇溶液浓度为80%，制粒时间为40s，压片硬度在50～70N时，所得的非洛地平缓释片的释放度与原研制剂最接近。4种不同pH条件下的释放度的相似因子均大于50。结论研制的非洛地平缓释片，其体外释放与原研制剂相似。

非洛地平;缓释片;HPMC;释放度;相似因子法

非洛地平是第二代二氢吡啶类钙拮抗剂，通过抑制小动脉平滑肌细胞外钙的内流和降低外周血管阻力用于治疗高血压；对心肌收缩力和心脏传导无直接作用，故不会引起体位性低血压[1]。

口服给药后，非洛地平几乎全部吸收且具有肝脏首过效应，其相对生物利用度为20%。在给药后2.5～5 h内可达平均峰浓度[2]。以前应用的是需日服2次的普通片剂，目前以缓释制剂为主。该药物的缓释制剂是瑞士阿斯利康(AstraZeneca)制药有限公司首先开发的，于1996年6月上市，商品名为波依定(plendilTM)。这是一个一日服用一次的缓释片制剂，剂量规格分别为2.5、5、10 mg。以2.5 mg每日1次作为开始治疗剂量，必要时剂量进一步增加。非洛地平缓释制剂半衰期为25 h，服药后血药浓度上升缓慢、缓和，形成一平坦的非洛地平血浆浓度-时间曲线，作用持续24 h，不仅大大减少了因血压降低反射性血管扩张引起的钙拮抗剂常见的不良反应，如心率加快、潮红、头痛，而且起效平稳，口服吸收好，生物利用度高，不受个体差异、给药剂量的影响，每天仅服用一次，提高了病人的顺应性[3]。

有研究表明，不同厂家的非洛地平缓释片在体外释放度、疗效、持续时间和不良反应的感受上有区别[4,5]，而波依定的单剂量费用明显高于国产非洛地平缓释片。本研究以波依定为对照制剂研制5 mg非洛地平缓释片，通过相似因子法研究两者在体外4种不同pH条件下的释放度有无差异，从而获得仿制波依定的最佳处方工艺。

1 处方工艺研究

1.1实验材料与设备

1.1.1实验材料 非洛地平原料(北京协和药厂)；非洛地平对照品(中国药品生物制品检定所，批号100717-200501，)；非洛地平缓释片(波依定®5 mg，阿斯利康制药有限公司)；羟丙基甲基纤维素(日本信越化学有限公司)；微晶纤维素(日本旭化成)；乳糖(上海光明乳业有限公司)；黄原胶(山东阜丰有限公司)；海藻酸钠(ISP国际特品公司)；Compritol 888 ATO(法国佳法赛)；硬脂酸镁(淮南山河药用辅料公司)。

1.1.2设备与仪器 快速搅拌制粒机(KJZ-10)、摇摆式颗粒机(YK-60)、压片机(ZP-17)，均为上海天河制药机械厂生产；片剂硬度仪(YPD-200，上海黄海机械厂)；三维运动混合机(HD15，无锡荣伟制药机械厂)；紫外分光光度计(UV2401PC，日本岛津)；溶出仪(ZRS-8G，天津大学无线电厂)。

1.2体外测定方法

1.2.1检测波长的选择 精密称取非洛地平对照品约10 mg于50 ml容量瓶中，加乙醇适量，超声使之溶解，稀释至刻度，摇匀，精密量取5 ml至50 ml容量瓶中，以1%十二烷基硫酸钠磷酸盐缓冲液(pH 6.5)稀释至刻度，摇匀得20 μg/ml的储备液。再精密量取5 ml上述储备液至10 ml容量瓶中，用1%十二烷基硫酸钠磷酸盐缓冲液(pH 6.5)稀释至刻度，摇匀得10 μg/ml的标准溶液，以1%十二烷基硫酸钠磷酸盐缓冲液(pH 6.5)为空白，进行紫外扫描。发现非洛地平在363、239、202 nm处有最大吸收，而非洛地平缓释片转正标准WS1-(X-152)-2005Z与美国药典(USP29版)中非洛地平缓释片均选择362 nm为检测波长，故我们选择362 nm作为体外释放的测定波长。

1.2.2仪器装置 根据非洛地平缓释片转正标准WS1-(X-152)-2005Z和美国药典(USP29版)，释放均采用溶出测定第2法。

1.2.3温度控制 根据中国药典2005版缓控释制剂指导原则，模拟体温应控制在(37±0.5)℃。

1.2.4转速选择 在非洛地平缓释片转正标准WS1-(X-152)-2005Z中，选用了200 r/min为溶出转速；而在美国药典(USP29版)中，转速为50 r/min。体外释放方法是模拟人体内的消化道条件，溶出装置转速应正确反映胃肠道蠕动速率。如果采用板浆法，一般以50～100转为适宜，200 r/min过快，且长时间此转速也易损坏溶出装置。故参照美国药典(USP29版)选用50 r/min。

1.2.5取样时间点 根据中国药典2005版缓控释制剂指导原则，体外释放速率试验应能反映出受试制剂时药速率的变化特征，且能满足统计学处理的需要，释药全过程的时间不应低于给药的间隔时间，且累计释放率要求达到90%以上。缓释制剂从释药曲线图中至少选出3个取样时间点，第1点为开始0.5～2 h的取样时间点，用于考察药物是否有突释，第2点为中间的取样时间点，用于确定释药特性，最后的取样时间点，用于考察释药是否基本完全。根据以上原则，我们参照美国药典(USP29版)中非洛地平缓释片的取样时间点，又由于非洛地平缓释片是一个一日服用一次的缓释制剂，我们拟定了4个取样时间点：2、6、10和24 h，释放度分别定为10%～30%，42%～68%，75%～95%，≥90%。

1.2.6标准曲线 精密称取非洛地平对照品约10 mg于50 ml容量瓶中，加乙醇适量，超声使之溶解，稀释至刻度，摇匀，精密量取5 ml至50 ml容量瓶中，用1%十二烷基硫酸钠磷酸盐缓冲液(pH 6.5)稀释至刻度，摇匀得20 μg/ml的储备液。再分别精密吸取上述储备液1、3、5、7、10 ml于10 ml容量瓶中，用1%十二烷基硫酸钠磷酸盐缓冲液(pH 6.5)稀释至刻度，其浓度范围为2～20 μg/ml，以1%十二烷基硫酸钠磷酸盐缓冲液(pH 6.5)为空白，在362 nm处测定吸收值。以浓度C和吸收度A计算求得直线回归方程为A=19.002 147C-0.000 443，r=0.999 941(n=5)，线性良好。

1.2.7释放度方法的确定 按照中国药典2005版释放度测定法第一法，采用溶出度测定法第二法的装置，以1%十二烷基硫酸钠磷酸盐缓冲液(pH 6.5)500 ml为介质，转速50 r/min，依法操作，在2、6、10和24 h分别取溶液5 ml滤过并即时在操作容器中补充相同溶液5 ml，取续滤液，照紫外-可见分光光度法，在362 nm的波长处测定吸收度；另精密称取非洛地平对照品适量，用上述介质溶解并定量稀释成每1 ml含10 μg的溶液，同法测定。分别计算出每片在不同时间的释放量。

1.3处方工艺筛选

1.3.1评价依据 按照确定的释放度方法检测被筛选处方的释放度来进行处方工艺的研究。另外，日本药品医疗安全局出版的《仿制药生物等效性试验指导》中指出[6]，对于口服制剂，溶出特性能给出关于等效性的重要信息，所以在仿制药的研发过程中，需研究与原研制剂的溶出比较。指导要求，与原研制剂的溶出曲线对比需进行4条不同的pH条件，口服缓释制剂的4个pH通常为1.2、3.0～5.0、6.8～7.5与水。在非洛地平的处方研究中，我们选择pH 1.2、4.5、6.8和水进行与原研的溶出比较。溶出数据使用相似因子法f2来评价其差异程度。

式中：

Ti-取样点时试验制剂的释放度；

Ri-取样点时参比制剂的释放度；

n-取样点的个数。

对于口服缓释制剂，在测定时间内，如果参比制剂的释放≥85%，那么f2≥40被认为相似，溶出曲线无显著差异；如果参比制剂的释放在50%～85%之间，那么f2≥50被认为相似，溶出曲线无显著差异；如果参比制剂的释放<50%，那么f2≥55被认为相似，溶出曲线无显著差异。

1.3.2处方对释放度的影响

1.3.2.1不同骨架材料对片芯释放度的影响 固定稀释剂微晶纤维素处方量64 mg，乳糖处方量5 mg，分别以羟丙基甲基纤维素 4KM，海藻酸钠，黄原胶，Compritol 888 ATO为骨架材料，制备非洛地平缓释片，考察其释放度，结果见图1。

图1 不同骨架材料的释放曲线

从释放结果中可以看出，以羟丙基甲基纤维素为骨架材料制备的缓释片中药物的释放符合零级过程；以黄原胶为骨架材料，其药物释放缓慢；而海藻酸钠与Compritol 888 ATO对药物释放的控制能力较差。因此，我们选择羟丙基甲基纤维素作为非洛地平缓释片的骨架材料。

1.3.2.2不同型号的羟丙基甲基纤维素对片芯释放度的影响 固定稀释剂微晶纤维素、乳糖和骨架材料羟丙基甲基纤维素的处方量分别为64、5、25 mg，分别考察羟丙基甲基纤维素的不同型号K4M, K15M与K100M对释放的影响，结果见图2。

图2 不同型号羟丙基甲基纤维素的释放曲线

释放结果显现，随着羟丙基甲基纤维素的粘度增加，非洛地平的释放速率减慢，当选用K4M时，释药速度最为合适，各时间点的释放度符合制定的标准。因此，选用羟丙基甲基纤维素K4M 为非洛地平缓释片的骨架材料。

1.3.2.3不同用量的羟丙基甲基纤维素K4M对释放的影响 以羟丙基甲基纤维素K4M为骨架材料，分别考察其处方量为15、20、25 mg时的药物释放度，结果显示用量25 mg最为合适，见图3。

图3 不同用量羟丙基甲基纤维素的释放曲线

1.3.2.4稀释剂对释放的影响 在亲水凝胶骨架片的制备过程中，常常需要加入一定量的稀释剂借以调节释药速率和便于压片[7]。固定骨架材料羟丙基甲基纤维素K4M处方量25 mg，在常用的几个稀释剂中，选用水不溶性的微晶纤维素和水溶性的乳糖，考察其单独使用和联合使用对释放的影响。筛选了3个处方，分别为单独使用微晶纤维素、乳糖69 mg，微晶纤维素64 mg加乳糖5 mg的联合使用，结果当微晶纤维素和乳糖联合使用时，药物释放速率符合制定标准，见图4。

图4 不同稀释剂的释放曲线

同时在处方中加入1%的硬脂酸镁作为润滑剂。

1.3.3制备工艺对释放的影响

1.3.3.1粘合剂与润湿剂的影响 按处方量1万片投料，以5%PVP k30为粘合剂，湿法制粒时发现，物料黏度大，不宜成形也无法过筛，故采用适当润湿剂制备软材。我们分别以纯水，70%和80%浓度的乙醇溶液400 g为润湿剂，高速搅拌切削40 s制粒制备非洛地平缓释片，考察各自的释放度，结果发现随着乙醇浓度的增加，释放加快。具体结果见图5。

图5 不同浓度润湿剂的释放曲线

70%浓度的乙醇液对非洛地平缓释片的初期，即0～6 h的释放有较大影响，释放数值在制定标准的下限，因此采用80%乙醇液作为润湿剂制备软材。

1.3.3.2润湿剂用量的影响 按处方量1万片投料，以80%乙醇液为润湿剂，分别加入200、400、600 g高速搅拌切削40 s制粒制备非洛地平缓释片，考察润湿剂用量对释放度的影响，在制备中发现乙醇液用量越多，制出的颗粒越硬，释放也越慢，结果见图6。

图6 不同用量乙醇的释放曲线

1.3.3.3压力的影响 一般情况下，只要压力能保证骨架片在整个释药过程中形状完整，在一定范围内不会明显影响释药速率。有研究表明[3]，当压力较小时，缓释片骨架不够牢固，前期释药速度明显变快，而压力增大到一定程度后，骨架变紧密，孔隙率明显变小从而使累积释药量不符合质量要求。所以我们需要考察压力对非洛地平缓释片释放的影响。

按处方量1万片投料，加入400 g 80%乙醇液高速搅拌切削40 s制粒，加入润滑剂后压片，调节压片机压力，分别压制硬度为30、40、50、70 N的非洛地平缓释片，测定各自的释放度。结果发现当缓释片硬度小于30 N时，释放度有较明显的增快；当硬度在40、50、70 N时，释放曲线相似，无明显变化。考虑到片剂的硬度要求以及包衣步骤对片芯硬度的需要，所以在压制该缓释片时，片剂硬度控制在50 N左右。结果见图7。

图7 不同压力的释放曲线

1.4制备处方、工艺与四条pH释放度比对

1.4.1非洛地平缓释片制备处方

表1 非洛地平缓释片处方组成与含量

1.4.2制备工艺

步骤1：将非洛地平原料，羟丙基甲基纤维素 K4M，微晶纤维素和乳糖分别过筛70目。

步骤2：称取1万片处方量的非洛地平原料，羟丙基甲基纤维素 K4M，微晶纤维素和乳糖于快速搅拌制粒机中混合均匀，加入80%乙醇液400 g，高速搅拌切削40 s，过20目制粒。

步骤3：50 ℃鼓风干燥烘干。

步骤4：20目整粒，加入处方量的硬脂酸镁混合均匀。

步骤5：6 mm浅圆弧形冲压片，硬度控制在50～70 N。

1.4.3四条pH释放度比对 按照日本药品医疗安全局出版的《仿制药生物等效性试验指导》，我们选择pH 1.2、4.5、6.8和水进行与原研波依定®的释放比较，并使用相似因子法f2来评价其差异程度。结果4条曲线与波依定®的f2因子均大于50，体外释放相似。具体见表2,3。

表2 非洛地平缓释片与波依定水中释放数据f2的比较

表3 非洛地平缓释片与波依定在不同pH、时间点释放数据及f2的比较

2 结论

我们通过体外释放度试验比较了4种骨架材料，结果羟丙基甲基纤维素(HPMC)表现出良好的溶出特性曲线，这种亲水性凝胶骨架材料应用较广，性质稳定，重现性良好；也比较了HPMC的3种不同黏度型号以及用量，3种不同稀释剂的影响来确定最终的处方。处方组成为：非洛地平、HPMC K4M、微晶纤维素、乳糖和硬脂酸镁。工艺采用湿法制粒法，对非洛地平及辅料进行制粒、压片。我们对工艺参数进行了考察，最后确定当乙醇溶液浓度为80%，用量为400 g，制粒时间为40 s，压片硬度在50～70 N时，所得的非洛地平缓释片的释放度与原研制剂最接近。

按照日本药品医疗安全局出版的《仿制药生物等效性试验指导》，我们选择pH 1.2、4.5、6.8和水进行了与波依定®的释放比较，并使用相似因子法f2来评价其差异程度。结果4条曲线与波依定®的f2因子均大于50，体外释放相似。

[1] 陈新谦，金有豫，汤 光. 新编药物学[M]. 第15版. 北京：人民卫生出版社，2003. 324～383.

[2] 杜丽娜. 非洛地平[J]. 临床药物治疗杂志，2004，2(1)：46.

[3] 李红梅. 非洛地平缓释片治疗原发性高血压效果指数研究[J]. 中国实用神经疾病杂志，2009，12(14)：55.

[4] 梁 竹，魏继鲁，张 华. 非洛地平缓释片释放度比较[J]. 中国现代应用药学杂志，2006，23(1)：41.

[5] 梁 竹，王宝德，于燕莉，等. 不同产品非洛地平缓释片药物动力学比较[J]. 中国临床药理学与治疗学，2005，10(5)：551.

[6] 仿制药生物等效性试验指导[Z]. 日本药品医疗安全局.2002：273.

[7] 颜耀东. 缓释控释制剂的设计与开发[M]. 北京：中国医药科技出版社，2006. 73.

2010-04-28

[修回日期] 2010-09-19

Studyofpreparationandreleaserateoffelodipinesustainedreleasetablet

ZHU Yu-qiu1,2, GUO Shen-rong1

(1.School of Pharmacy, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200240，China; 2.Shanghai Ethypharm Pharmaceutical Company Ltd., Shanghai 201702，China)

ObjectiveTo prepare felodipine sustained release tablet and evaluate the similitude of release rate with original preparation.MethodsMatrix technology was used. felodipine sustained release tablet was prepared through studying the influence of matrix material sorts, viscosity, quantity, fillers and process. The similitude of release rateof SR tablet were evaluated in 4 kinds of pH media with original preparation.ResultsThe release rate of felodipine sustained release tablet which was prepared by HPMC as matrix material ,applied by wet granulation with alcohol content of 80% and granulation time of 40 sec, was similar to original preparation with the hardness between 50～70 N. F2functions of release rate in 4 kinds of pH media were all exceed 50.ConclusionsRelease rate of felodipine sustained release tablet prepared was similar to original preparation.

felodipine; sustained release tablet; HPMC; release rate; f2function

朱雨秋(1976-)，女，硕士.Tel：(021)59898898,E-mail:zhu.yuqiu@ethypharm.com.cn.

R944.9

A

1006-0111(2011)02-0101-05