光皮树籽油功能性作用的研究

黄翠莉，吴苏喜，*，郝泽金，肖志红

(1.长沙理工大学化学与生物工程学院，湖南长沙410114; 2.湖南省林业科学院，湖南长沙410004)

光皮树籽油功能性作用的研究

黄翠莉1，吴苏喜1，*，郝泽金1，肖志红2

(1.长沙理工大学化学与生物工程学院，湖南长沙410114; 2.湖南省林业科学院，湖南长沙410004)

为了研究光皮树籽油的辅助降血脂功能，将SD大鼠随机分成4组:空白对照组、高脂对照组、高剂量组、低剂量组，并以高脂饲料建立实验模型。同时又对不同组别大鼠的肝系数及动脉粥样硬化指数AI值进行比较。结果表明:光皮树籽油能显著降低大鼠血清总胆固醇、甘油三酯的水平(p＜0.05)，而对大鼠高密度脂蛋白胆固醇HDL-C水平无显著影响(p＞0.05)。由此可知，光皮树籽油具有降血脂功能，同时还具有一定的预防脂肪肝和防止动脉粥样硬化的作用。

光皮树籽油，血脂，脂肪肝，动脉粥样硬化

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

光皮树籽 由湖南林业科学院提供，经去壳、烘干、粉碎后过0.37mm×0.37mm孔径的泰勒标准筛(下称“40目筛”)，备用;胆固醇、胆酸钠 安徽天启化工科技有限公司提供;猪油、蛋黄粉 市售后自制;CO2纯度99.99%(食用级);甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇试剂盒 北京万泰德瑞诊断技术有限公司提供;基础饲料 面粉20%，米粉l0%，玉米20%，鼓皮25%.豆料20%，骨粉2%，鱼粉2%;高脂饲料 基础饲料80%、胆固醇2%、胆酸钠0.5%、蛋黄粉5%、猪油12.5%。

表2 不同组别对大鼠体重的影响(s)

表2 不同组别对大鼠体重的影响(s)

注:b.高脂对照组相比较，p＜0.05。

组别 剂量组(mg/kg·d) 大鼠数量(只) 初始体重(g) 终末体重(g)高脂对照组1.5 10 157.48±37.28 377.56±29.58 0.0 10 161.28±54.13 394.74±68.15空白对照组 0.0 10 159.90±34.59 345.18±43.2b高剂量组 7.0 10 157.66±16.23 341.47±46.9b低剂量组

表3 大鼠血脂各项指标的比较(s)

表3 大鼠血脂各项指标的比较(s)

注:a.与高脂对照组有极显著性差异(P＜0.01);b.与高脂对照组有显著性差异(P＜0.05);表4、表5同。

组别 剂量组(mg/kg·d) 大鼠数量(只) TG(mmol/L) TC(mmol/L) HDL-C(mmol/L)高脂对照组0.0 10 2.73±0.37 2.85±0.55 1.36±0.14空白对照组 0.0 10 1.02±0.31a 2.09±0.35a 1.77±0.23a高剂量组 7.0 10 1.34±0.52b 2.13±0.31b 1.47±0.18低剂量组 1.5 10 1.81±0.75b 2.48±0.46b1.32±0.25

HA120-50-01型超临界萃取装置 江苏南通华安超临界萃取有限公司;高速万能粉碎机北京市永光明医疗仪器厂;SZC-C脂肪测定仪 上海纤检仪器有限公司;GC-14C气相色谱仪 日本岛津;TG16-W微量离心机 湘仪离心机仪器有限公司。

1.2 实验动物

SD大鼠，体重(160±10)g，雄性，SD大鼠使用许可证号:SCXK(湘)2009-0013;均由长沙市开福区东创实验室动物科技服务部提供。饲养温度:(25± 2)℃，相对湿度:55%±2%。

1.3 实验方法

1.3.1 光皮树籽油的制备 称取过40目筛的去壳光皮树籽仁粉200g装入超临界CO2萃取装置［6］的萃取罐中，设置萃取釜的压力为25～35MPa、温度为35～45℃，分离釜的压力为6～7MPa。泵入CO2，待达到设定条件后连续萃取1～2h，CO2气化后循环使用，萃取液从分离釜底部放出，称质量收集备用。

1.3.2 油脂的理化指标测定 色泽:参照 GB/T 22460-2008《动植物油脂罗维朋色泽的测定》，使用25.4mm光程玻璃比色皿;酸价:参照GB/T 5530-2005《动植物油脂酸值和酸度测定》酸碱中和滴定法;过氧化值:参照GB/T 553-2005《动植物油脂过氧化值测定》。

1.3.3 动物分组 购买的40只雄性大鼠先每天喂以基础饲料，等4d适应新的生存环境后再随机分成四组。A组:高脂对照组;B组:空白对照组;C组:光皮树籽油高剂量组;D组:光皮树籽油低剂量组。每组10只平均分到两个相同笼子里饲养。

1.3.4 剂量选择 A组喂以高脂饲料并按9mg/kg·d的剂量灌胃生理盐水，B组喂以基础饲料并按9mg/kg·d的剂量灌胃生理盐水，C组、D组喂高脂饲料并分别按7.0、1.5mg/kg·d灌胃光皮树籽油。所有动物的饲料按100g/kg·d喂食，自由饮水。连续饲喂7周，每周称其重量并根据体重改变灌胃剂量。

1.3.5 待测样品的制备 实验大鼠7周后，末次进食灌胃后禁食12h，从心脏取血2～3mL置于离心管中，静止半小时后3000r/min离心7min，取上层血清备用。

1.3.6 血清的检测方法 大鼠血清的总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HLD-C)含量的测定按试剂盒操作;致动脉硬化指数(AI)=(TC-HDL-C)/HDL-C;肝脏指数(%)=肝脏重(湿重)(g)/体重(g)×100%。

2 结果与分析

2.1 光皮树籽油的基本理化指标

超临界CO2萃取的光皮树籽油的基本理化指标如表1所示，达到国家一级食用油标准。

表1 光皮树籽油的基本理化指标

2.2 不同组别对大鼠体重的影响

动物饲养期间，每周定期称量体重。实验结束后得出每周体重的变化量及其最终体重，见图1和表2。

图1 不同组别大鼠每周体重增长量的变化图

由图1可以看出每个组别老鼠体重的增长量都是先增加后减少，不同组别之间老鼠体重的增长量基本上是高脂对照组＞低剂量组＞空白对照组＞高剂量组。由表2更明显地看出，空白对照组和高剂量组大鼠的体重与高脂对照组比较，有显著性差异(p＜0.05)。低剂量组大鼠的体重与高脂对照组没有显著性差异(p＞0.05)。

2.3 不同组别对大鼠血脂的影响

通过对比血脂各项指标的变化来判断动物实验的结果如何。动物实验的结果判定有三个:甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HLD-C)。大鼠血脂的各项指标结果见表3。

大鼠血脂的各项指标与人类血脂的各项指标相比，对于甘油三酯(TG)，空白对照组和高剂量组在正常范围(0～1.7mmol/L)之内，高脂对照组和低剂量组高出正常范围;对于总胆固醇(TC)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)，大鼠四个组别的指标都在人类指标的正常范围之内。

不同组别之间大鼠血脂各项指标的比较，由表3可知，高脂对照组与空白对照组中血脂的各项指标都有极显著的差异(p＜0.01)，表明本实验的高脂造模非常成功。光皮树籽油高剂量组和低剂量组中的甘油三酯(TG)及总胆固醇(TC)指标与高脂对照组比较有显著性差异(p＜0.05)，而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)与高脂对照组无显著性差异，根据动物实验结果判定指标可知，光皮树籽油具有降低血脂、总胆固醇的作用。光皮树籽油高、低剂量组之间相比，三个指标都是剂量越多指标越好，进一步说明了光皮树籽油的降血脂作用。

2.4 不同组别对大鼠肝系数的影响

脂肪肝的形成，其中一个比较主要的因素就是高血脂。本实验主要通过直观的肝系数比较及肝脏外观比较来研究脂肪肝与高血脂的关系。肝系数见表4。

表4 不同组别大鼠肝系数的比较(s)

表4 不同组别大鼠肝系数的比较(s)

组别 剂量组(mg/kg·d)大鼠数量(只) 肝系数 P值高脂对照组 0.0 10 0.047±0.002—空白对照组 0.0 10 0.029±0.001a 0.000高剂量组 7.0 10 0.033±0.005a 0.001低剂量组 1.5 10 0.037±0.005a 0.004

肝系数越小，预防脂肪肝的效果越好。由表4可知，肝系数从小到大的顺序是:空白对照组＜高剂量组＜低剂量组＜高脂对照组，并且其它三个组别和高脂对照组相比较都有极显著性差异(p＜0.01)。表3实验数据也显示，血脂含量从小到大的顺序是:空白对照组＜高剂量组＜低剂量组＜高脂对照组，表明脂肪肝的得病率和血脂含量成正相关关系。

2.5 不同组别大鼠肝脏病理切片的比较

病理切片是反映大鼠肝脏最准确、最具有科学依据的手段，可以用它来明确肝脏病的诊断及病变程度。不同组别大鼠肝脏的病理切片图见图2。

图2 不同组别大鼠肝脏的病理切片图(240×)注:紫黑色的实点是肝细胞，亮点的大水泡是脂肪。

在正常情况下，肝脏只含有少量脂肪，约占肝脏重量的3%～4%。在某些异常情况下:肝脏内的脂肪含量增加，当其脂肪含量超过肝脏重量(湿重)的5%～10%时为轻度脂肪肝，超过10%～25%为中度脂肪肝，超过25%～50%为重度脂肪肝。

综上所述，由图2的病理切片结果中可以得出，空白对照组、光皮树籽油高剂量组的肝脏属于正常状态;低剂量组为中度脂肪肝;高脂对照组属于重度脂肪肝。这一结果也验证了高血脂易造成脂肪肝。

2.6 不同组别对大鼠动脉粥样硬化指数的影响

致动脉粥样硬化(AI)值越小，预防动脉粥样硬化的效果越好。

由表5可知，不同组别实验大鼠的AI值都偏小，组别之间大鼠的AI值差异比较明显。其它三组与高脂对照组比较都具有极显著性差异(p＜0.01)，空白对照组差异最显著，光皮树籽油的高剂量组比低剂量组差异性显著。因此光皮树籽油能够预防动脉粥样硬化，并随着剂量的增加效果更好。

表5 不同组别致大鼠动脉粥样硬化指数的比较s)

表5 不同组别致大鼠动脉粥样硬化指数的比较s)

组别 剂量组(mg/kg·d)大鼠数量(只) AI P值高脂对照组 0.0 10 0.609±0.035—空白对照组 0.0 10 0.162±0.004a 0.000高剂量组 7.0 10 0.384±0.031a 0.001低剂量组 1.5 10 0.441±0.036a 0.003

3 结论

动物取血的方式一般是脱颈［7-8］或摘眼球［9］，很容易混进组织液。本实验大鼠的血液是从心脏中制取，保证了血液的纯度，使实验数据更加可靠。

光皮树籽油能够显著地降低甘油三酯、总胆固醇，具有很好的辅助降血脂的作用;并随着光皮树籽油剂量的增加，其效果更加明显;但是对高密度脂蛋白胆固醇的影响效果不显著。光皮树籽油对脂肪肝还有一定的预防作用，同时还可以降低动脉粥样硬化的发病率。

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Study on the functional effect of the oils from Swida wilsoniana seeds

HUANG Cui-li1，WU Su-xi1，*，HAO Ze-jin1，XIAO Zhi-hong2
(1.College of Chemistry and Bio-engineering，Changsha University of Science＆Technology，Changsha 410004，China; 2.Hunan Academy of Forestry Science，Changsha 410004，China)

In order to study the effects of the oils from Swida wilsoniana seeds on reducing blood lipid and preventing the fatty liver of rats，SD rats were used as experimental animals.Rats were random divided into four groups，namely blank control group，high fat control group，high-dose group and low-dose group.The experimental model was established with high fat feed.At the same time，the liver factor and AI were determined. The oils from Swida wilsoniana seeds can significantly decrease the levels of TG and TC in serum of high fat diet rats(p＜0.05).Each dose had no remarkable effect on HDL-C level in serum of rats(p＞0.05).The results demonstrated the effects of oils from Swida wilsoniana seeds on reducing blood lipid，preventing fatty liver and atherosclerosis.

the oils from Swida wilsoniana seeds;blood fat;fatty liver;atherosclerosis

TS225.1+9

A

1002-0306(2011)11-0403-03

心血管病已成为危害人类健康最严重的三大疾病之一，而高血脂又是造成心血管病的主要因素。大量研究资料表明，高血脂症是脑中风、冠心病、心肌梗死、猝死的危险因素，也是引起人类动脉粥样硬化的主要危险因素。因此有关降血脂新产品的开发研究日益受到人们的重视。光皮树是我国近年来大量种植开发的植物燃料油原料树种［1］，光皮树籽油已被用作优质生物柴油原料油［2-4］。但是，光皮树籽油脂肪酸组成中，含不饱和脂肪酸77.68%，其中油酸38.3%、亚油酸38.85%［5］。从食用角度来考虑，它应该是一种安全的可食用油，只是由于资源的限制而很少被人们当做日常食用油罢了。为了开发利用光皮树籽油的保健价值，提高附加值，丰富市场上的木本食用油品种，有必要通过大鼠动物实验来研究光皮树籽油的降血脂、预防脂肪肝和抗动脉粥样硬化等功能。有关光皮树籽油在这方面的功能性研究尚未见过报道。

2010-10-08 *通讯联系人

黄翠莉(1985-)，女，硕士研究生，研究方向:食用油脂资源开发。

国家林业公益性行业科研专项(2010-4071);湖南省科技计划项目(2010WK2004，2010Ck3024);长沙市科技计划项目(k1003018-21)。