HPLC法测定黄白鼻用凝胶中欧前胡素的含量

2011-10-25孙志强陈修梅

药学研究 2011年12期

孙志强，陈修梅

(1.济南三源药业有限公司，山东济南250014;2.山东青年政治学院，山东济南250103)

黄白鼻用凝胶中含有黄芪、白芷、白术等药物，我们将提取、精制后的药物提取物与卡波姆基质混合制成了鼻用凝胶，用于治疗鼻塞、鼻流涕、前额头痛等鼻炎症状.制成鼻用凝胶剂，使其方便涂布于鼻腔黏膜上，并延长药物与黏膜的接触时间，充分发挥了药物的疗效.在对黄白鼻用凝胶的质量研究中我们对君药黄芪中黄芪甲苷的含量进行了测定，鉴于现代中药需要多指标控制制剂质量的要求，故我们又重点研究了以HPLC法测定白芷中的欧前胡素的含量测定方法.

1 仪器与试药

1.1 仪器 LC－2010A型高效液相色谱仪(日本岛津SPD－10AVP检测器，CLASS－VP工作站);AB135－S电子天平(瑞士梅特勒－托利多公司).

1.2 试药欧前胡素对照品(批号110826－200712)，购自中国药品生物制品检定所;乙腈、磷酸为色谱纯;水为重蒸水;其余试剂均为分析纯;黄白鼻用凝胶(批号20101105、20101106、20101107，自制).

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适应性试验色谱柱:岛津C18柱(4.6 mm ×150 mm，5 μm);流动相:乙腈－0.2%磷酸(60∶40)，流速为 1.0 mL·min－1;检测波长为 300 nm［1，2］;进样量 10 μL;理论板数按欧前胡素峰计应不低于3 000.

2.2 对照品溶液的制备方法精密称取欧前胡素对照品适量，加甲醇使溶解，制成每1 mL含20 μg的溶液，混匀，即得.

2.3 供试品溶液的制备方法取本品2.0 g，精密称定，加入2 g硅藻土拌和均匀，置具塞三角瓶中，精密加甲醇50 mL，称定重量，超声处理(功率300 W，频率25 kHz)30 min，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得.

2.4 阴性对照试验按制备工艺制备不含白芷的空白凝胶样品，取2 g，照供试溶液的制备方法制备，按上述色谱条件测定，阴性对照溶液色谱中，在与欧前胡素峰相同保留时间处，无吸收峰.结果表明本品阴性对照无干扰，见图1.

2.5 线性关系考察精密称取欧前胡素对照品10.33 mg，加甲醇制成每1 mL含20.66 μg的溶液，分别精密量取5，10，15，20，25 μL，进样，测得峰面积，计算回归方程为:Y=2 436 399.81X+17 751.90(r=0.999 9) .结果表明，欧前胡素进样量在0.103 3～0.516 5 μg范围内与峰面积积分值线性关系良好.

2.6 精密度试验取欧前胡素对照品溶液(20.66 μg·mL－1)，进样 10 μL，连续进样 5 次，结果峰面积平均值508 242，RSD=0.34%，表明仪器精密度良好.

图1 HPLC色谱图

2.7 稳定性试验取样品(批号20101105)，按前述方法制成供试品溶液，分别在第 0，4，8，12，18，24 h 进样测定，计算含量，结果欧前胡素峰面积平均值为629 586，RSD=0.76%，表明供试样品在24 h内稳定.

2.8 重现性试验取样品(批号20101105)，分别5份，按前述方法制成供试品溶液，进样测定，计算含量，结果欧前胡素含量平均值为0.304 6 mg·g－1， RSD 为0.68%，表明含量测定方法重现性良好.

2.9 加样回收试验取样品(批号20101105)5份(欧前胡素含量为 0.304 6 mg·g－1)，各 1.0 g，精密称定，加入 2 g 硅藻土拌和均匀，置具塞三角瓶中，分别精密加入欧前胡素对照品的甲醇溶液(0.006 4 mg·mL－1)各 50 mL，再按前述方法制成供试品溶液，进样，测定，计算回收率.结果平均回收率99.50%，RSD 为1.02%，结果见表1.

2.10 样品含量测定取20101105、20101106、20101107三批样品，各取2 g，精密称定，按前述方法制成供试品溶液，进样，测定，结果见表2.