血清CD27和CD27L的检测在胃癌中的临床意义

上海交通大学医学院附属瑞金医院卢湾分院（200020） 刘涛 袁建明 沈建康 郁骁珩 王天翔

CD27属I型跨膜糖蛋白，表达于75%的T细胞（CD4+和CD8+均有）、15%～45%的胸腺细胞、部分B细胞以及NK细胞等，活化的T细胞CD27表达增加[1]。CD27配体（CD27L，CD70）是II型跨膜糖蛋白，属TNF配体超家族。CD27L的表达具有局限性，只见于活化的T细胞和B细胞。CD27-CD27L可以作为第二信号促进T细胞增殖及分化过程[2]，在T-B细胞相互作用中起着非常关键的作用[3]，对NK细胞的功能也有调节作用。已经证明，在IL-2或IL-12存在的条件下，CD27-CD27L结合可以增强NK细胞与靶细胞的粘附，促进NK细胞对靶细胞的杀伤。

本研究拟采用ELISA方法对42例胃癌患者血清中CD27和CD27L的表达进行检测，探讨CD27和CD27L的表达与胃癌临床及病理指标的相关性，并对其临床意义做一研究。

附表 血清CD27和CD27L的表达

1 对象与方法

1.1 研究对象 血清标本取自2008年7月～2008年12月在上海交通大学医学院附属瑞金医院卢湾分院手术的胃癌患者。所有患者术前均未进行过放化疗及抗肿瘤药物等治疗，均有完整的临床及病理资料。纳入的胃癌患者共42例，其中女性16人，男性26人，平均年龄60.02±12.77岁。病理组织学类型：低分化腺癌24例，中分化腺癌10例，高分化腺癌8例。病理分期：Ⅰ期5例，Ⅱ期12例，Ⅲ期20例，Ⅳ期5例。浸润深度（T）：T12例，T24例，T329例，T47例。淋巴结转移者26例：其中N116例，N27例，N33例。无淋巴结转移者（N0）16例。远处转移者（M1）1例。另外纳入同期正常对照者血清标本40例。病例组和对照组间年龄和性别构成没有显著性差异，具有可比性。

1.2 研究方法 鼠抗人CD27和CD27L单克隆抗体为CST公司产品，ELISA试剂盒为ADL公司产品。采用ELISA方法，具体步骤严格按照试剂盒说明执行。

1.3 统计学方法 使用SPSS 16.0进行统计学处理。P＜0.05表示有统计学差异。一般计量资料数据描述采用x±s表示，满足正态和方差齐性的计量资料两组间比较采用t检验（tTest），多组间比较采用单因素方差分析（One-way ANOVA），否则采用非参数统计中的秩和检验；相关性分析采用Spearman相关分析方法；缺失值不纳入统计。

2 结果

2.1 血清CD27和CD27L的表达 胃癌患者组血清CD27的平均表达浓度为5.12±1.23pg，CD27L的平均表达浓度为0.92±0.13ng。正常对照组血清CD27的平均表达浓度为8.66±6.67pg，CD27L的平均表达浓度为4.93±3.88ng。见附表。t检验结果表明，胃癌患者组血清CD27和CD27L的表达显著低于正常对照者（P=0.000）。在胃癌患者中，对不同病理和临床指标间采用单因素方差分析，结果表明，在不同病理组织学类型中血清CD27和CD27L的表达无显著性差异；在不同病理分期中血清CD27的表达无显著性差异，血清CD27L的表达除Ⅲ期显著高于Ⅱ期外（P=0.017），其余无显著差异；在不同浸润深度中血清CD27和CD27L的表达无显著差异；在不同淋巴结转移中血清CD27的表达除N1显著高于N2（P=0.022）外，其余无显著差异，血清CD27L的表达无显著差异；考虑到远处转移患者只有1例，本研究中未进行CD27和CD27L与远处转移之间的统计分析。

2.2 相关分析 Spearman相关分析表明，血清CD27和CD27L分别与病理类型、病理分期及TNM分期无显著相关性。血清CD27和CD27L之间也无显著相关性。见附图。

3 讨论

目前对CD27-CD27L的研究大多集中在免疫学方面，研究过程中发现此共刺激受体-配体分子对自身免疫性疾病、炎症及肿瘤的发生、发展起着促进作用，选择性干预这条共刺激通路能够减缓这些疾病的发展，因此其可能成为特异性的治疗靶标[4]。目前国内外对于CD27-CD27L和胃癌之间关系的研究还较少。本研究结果表明，胃癌患者的血清CD27和CD27L的表达显著低于正常对照者。Lorenz MG等[5]的研究首次发现，一个表达CD27L的重组病毒疫苗模型具有显著的抗肿瘤免疫特性，可能与其提高T细胞效应、介导抗肿瘤免疫有关。Couderc B等[6]的研究也表明了肿瘤细胞上表达CD27L共刺激分子能够提高抗肿瘤免疫，减缓肿瘤的生长。这或许可以解释本研究中胃癌患者血清CD27和CD27L的表达显著低于正常对照者。Carpenter EL等[7]研究表明，患者体内B细胞稳态遭到破坏与外周血CD27+B细胞减少有显著的相关性，而B细胞稳态发生紊乱导致的免疫系统功能受损在包括黑色素瘤在内的肿瘤发生过程中起了潜在的重要作用。近来的一项研究[8]也显示，CD27-CD27L共刺激途径在白血病的免疫治疗中维持了效应细胞的细胞毒性，在有效的免疫治疗中起到十分关键的作用。

本研究结果显示，血清CD27和CD27L在不同的病理类型中并无显著性差异，提示血清CD27和CD27L的表达同病理类型无关。在不同病理分期中，血清CD27L的表达Ⅲ期显著高于Ⅱ期，但Ⅳ期并无继续升高的趋势，结合Spearman相关分析，无法得出CD27L同病理分期之间有显著相关性的结论。在TNM分期中，血清CD27的表达N1显著高于N2，提示血清CD27的表达和不同淋巴结转移程度之间可能存在一定的关联，但Spearman相关分析并未得出显著性结论，仍需更大样本的试验来进一步明确目前的结果。本研究中的相关分析尚未得出CD27和CD27L与病理类型、病理分期及TNM分期之间的显著相关性。

本研究采用ELISA方法检测血清中CD27和CD27L的表达，若进一步结合免疫组化技术检测胃癌组织中的CD27和CD27L，则可得出更加可信的结论。