正交设计法对保健野菇片提取工艺的影响研究

2011-10-17丁振铎刘际洲张桂娟

哈尔滨商业大学学报（自然科学版） 2011年6期

丁振铎，刘际洲，张桂娟，王爽

(黑龙江生态工程职业学院，哈尔滨150025)

黑龙江省拥有丰富的森林资源，每年都有大量野生的榛蘑、元蘑、黄蘑等食用菌产出.食用菌含有的多糖类成分、蛋白质成分及丰富的维生素和磷、钾、钙、锌、铜、锰、锗等矿物质元素，具有较高的营养价值和保健作用.保健野菇片以榛蘑、元蘑为原料组成处方，制成片剂，发挥其提高机体免疫力和补充其微量元素的功用.本试验采用正交设计试验法[1]考察保健成分的提取工艺，为保健野菇片批量生产提供科学的依据.

1 实验仪器与材料

1.1 仪器

紫外-可见分光光度计(T6新世纪);990型原子吸收分光光度计(北京普析仪器厂);101-2-BS型电热恒温鼓风干燥箱(上海跃进医疗器械厂);BS210S型电子天平(北京赛多利斯天平有限公司);M203型电热板(河北黄驹县二轻公司五金厂);电热恒温水浴锅;低速离心机.

1.2 材料与试剂

Se、Zn标准溶液(1 000μg/mL，国家标准物质研究中心);硝酸(HNO3，优级纯，北京益利精细化学品有限公司);高氯酸(HClO4，优级纯，天津市鑫源化工厂);纯化水、超纯水(黑龙江生态工程职业学院自制);榛蘑、元蘑等(黑龙江亚布力山特产品有限公司);苯酚、浓硫酸、95%乙醇、葡萄糖等，其他试剂为分析纯.

2 实验方法

2.1 实验工艺路线

保健野菇片由榛蘑、元蘑二种野生蘑菇组成，将两种材料粉碎成粗粉，然后加纯化水煎煮、滤过、浓缩，真空干燥成干膏;将提取后的渣料真空干燥，与干膏混合，粉碎成细粉;将细粉混匀，湿法制粒，压片.在本实验中以总多糖、微量元素得率为检测指标对加水量、煎煮时间、煎煮次数进行考察.保健野菇片研制工艺路线如图1.

2.2 因素水平设计

根据工艺路线，按L9(34)正交表安排试验，将榛蘑、元蘑二种野生蘑菇进行提取，对加水量、煎煮次数和煎煮时间三因素中三水平进行考察，见表1.

表1 因素水平表

2.3 考察指标

以总多糖得率、微量元素得率为考察指标.

2.4 总多糖测定方法

葡萄糖标准品溶液的制备

精确称取105℃干燥至恒重的葡萄糖标准品0.101 0 g，加纯化水溶解后定容至1 000 mL容量瓶中，即得质量浓度为0.1 mg/mL的葡萄糖标准品溶液.

样品溶液的制备

精确称取1～9号浸膏各一定量，置烧杯中，分别加12倍量纯化水加热溶解，不溶物3 000 r/min下离心20 min离心除去，上清液加4倍量体积分数95%乙醇静置48 h，同上条件离心取沉淀，加水溶解，重复醇沉，静置24 h，离心取沉淀，加纯化水溶解定容至10 mL，作为供试品溶液.

测定方法

分别取葡萄糖标准品溶液2.0mL及供试品溶液2.0 mL于具塞比色管中，加5%苯酚溶液1.0 mL，摇匀，迅速滴加浓硫酸5.0 mL，摇匀，放置5min后，于40℃水浴放置15 min，取出迅速冷却至室温，于490 nm波长处测定吸光度[2].

2.5 微量元素的测定

对照品溶液的制备空白溶液超纯水

标准溶液的配制用超纯水配制标准溶液其浓度分别为(μg/mL):

供试品溶液的制备

采用硝酸-高氯酸消解方法.将1～9号样品分别研成粉末状，用分析天平准确称取样品1 g，置于碘量瓶中，加入10 mL浓硝酸，放置24 h后在电热板上低温加热消化处理，待溶液浓烟过后，转为白烟时加入2mL高氯酸，继续消解，直至样品变成无色不产生烟为止，冷却后用超纯水定容至50 mL，待测定.空白同样步骤操作[3-4].

测定法

采用原子吸收分光光度法测定各元素，仪器工作条件的设置见表2.