水通道蛋白1在卵巢癌组织中的表达

王艳丽,朱继红,高永梅,张利群

(吉林大学第一医院妇产科,吉林长春130021)

卵巢癌患者大多伴有大量腹水,目前其病理机制尚不完全清楚。水通道蛋白1(AQP1)是Agre最早发现的水通道,它分布广泛,具有特异转运水的功能,与多种疾病的发生和发展密切相关,目前已成为众多学者研究的热点[1]。AQP-1与卵巢肿瘤的关系国内外至今报道很少,本试验通过免疫组织化学技术检测AQP1在卵巢癌组织的表达,并初步探讨其意义。

1 资料与方法

1.1 标本来源

收集吉林大学第一、第二医院2000-2004年手术治疗的66例卵巢浆液性肿瘤标本和10例卵巢正常组织作为对照。66例卵巢浆液性肿瘤标本中,良性12例,交界性8例,恶性46例,在46例卵巢浆液性恶性肿瘤中,从病理分化程度上看:高分化12例,中分化18例,低分化16例;从临床分期上看:Ⅰ期14例,Ⅱ期18例,Ⅲ-Ⅳ期14例;有腹水36例(腹水均以腹腔穿刺放液或开腹后以出量计算,＞200 ml认为有腹水)。患者年龄38-83岁,平均年龄58岁。上述标本离体后经4%多聚甲醛固定48小时,石蜡包埋,连续切片3 μ m厚,HE染色,病理证实。

1.2 试剂与方法 AQP1单克隆抗体及SP试剂盒由福州迈新公司提供,常规免疫组织化学染色,DAB发色。以PBS代替一抗作阴性对照,分别以已知的AQP1阳性的卵巢癌组织切片作阳性对照。

1.3 结果观察和判定

AQP1肿瘤细胞的细胞浆出现棕黄色颗粒作为阳性细胞,表达的判定以阳性细胞百分率进行评估。阳性细胞＞50%为阳性表达;阳性细胞＜50%为阴性表达。

1.4 统计学分析 各组率的比较采用 χ2检验。

2 结果

2.1 AQP1在正常卵巢组织及卵巢浆液性肿瘤组织中的表达

AQP1在卵巢浆液性癌及卵巢交界性浆液性肿瘤中阳性率分别为82.6%和62.5%,明显高于正常卵巢,差异有显著性(P＜0.05)。卵巢良性浆液性肿瘤阳性率为25%,与正常卵巢组织比较,差异无显著性(P＞0.05)。(见表1)

表1 AQP1在正常卵巢和卵巢浆液性肿瘤组织中的表达

2.2 AQP1表达与卵巢浆液性癌临床病理特征

卵巢浆液性癌中AQP1的表达与临床分期、病理分级以及有无腹水的关系见表2,不同临床分期和病理分级的卵巢浆液性癌组织中AQP1阳性率比较,差异均无显著性(P＞0.05);卵巢浆液性癌有无腹水时癌组织AQP1表达阳性率分别为72.2%和40%,两者比较,差异有显著性(P＜0.05)。

表2 卵巢浆液性癌不同临床病理特征与AQP1表达的关系

3 讨论

1988年Agre等在鉴别人类Rh血型抗原时偶然在红细胞膜上发现了1种新的跨膜蛋白[1]。1991-1992年Agre等又完成了该蛋白的分子克隆和功能鉴定,证明该蛋白具有水通道功能,从而确认了细胞膜上存在转运水的水通道蛋白的理论[2]。这种新的跨膜蛋白分子量为2.8×103,于1997年被正式命名为水通道蛋白1(AQP1).随后,在许多动、植物及微生物中相继发现水通道蛋白。目前哺乳动物的组织中已经鉴定13种水通道白(AQP0-AQP12),广泛分布于各种组织和器官,在维持机体的水平衡中起着重要的作用,且与水平衡紊乱所造成的一些疾病密切相关,其中以AQP1分布最广,作用最多。AQP1广泛分布于机体,特别是那些与液体吸收和分泌有关的上皮细胞及可能协同水跨膜转运的内皮细胞中,AQP1只允许水自由双向的穿过细胞膜,不转运离子,质子等[3]。研究发现:多种肿瘤组织亦表达AQP1,可能与肿瘤细胞的起源,生长、转移等密切相关[4,5]。此外,在微血管内皮细胞也发现AQP1的高度表达,推测AQP1的高表达也可能与肿瘤的血管新生有关[6-8]。本实验研究发现:AQP1在正常卵巢、卵巢良性浆液性肿瘤、卵巢交界性浆液性肿瘤、卵巢浆液性癌肿均有表达。与正常卵巢阳性率20%比较,卵巢交界性浆液性肿瘤、卵巢浆液性癌阳性率分别为82.6%和62.5%,明显高于正常卵巢,差异有显著性(P＜0.05);卵巢良性浆液性肿瘤虽有表达,但是与正常卵巢组织比较,差异无显著性(P＞0.05)。卵巢癌在病理分级和临床分期上,差异没有显著性(P＞0.05),与石一复[9]等研究结果不同,考虑可能和研究样本的数量相对较少有关。由此推测考虑AQP1可能与卵巢癌的发生、发展有关。卵巢浆液性肿瘤腹水的发生均在恶性肿瘤中出现,交界性和良性肿瘤中均未出现,而且恶性卵巢浆液性肿瘤有腹水和无腹水AQP1的表达比较差异有显著性(P＜0.05),由此推测卵巢癌的腹水的发生可能和AQP1有关。

AQP1在腹膜毛细血管、内皮细胞、间皮细胞均有表达,考虑与腹水的吸收有关;Yang等[10]应用基因敲除技术研究发现AQP1敲除后的小鼠对水通透性能力明显下降,但对非渗透性水重吸收无影响。Akiba等[11]利用腹膜间皮细胞培养研究发现:随着培养液中葡萄糖和甘露醇浓度的升高,AQP1mRNA表达增强,这就为细胞因子血管活性介质、渗透性物质调节腹膜AQP1表达和水转运提供可能,也为今后调控AQP1来改变腹膜水通透探索一系列药物提供实验依据(包括增加腹水重吸收及加强利尿药物的疗效)。本研究明确了AQP1在卵巢癌组织中高表达,可能为卵巢癌的病理机制和卵巢癌腹水的发生到增多可能提供了新的理论依据,为卵巢癌的临床治疗提供新的靶点。

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