超声波法提取刺五加苷B的条件研究

高 冷，韩 雪，李 宁

（长春工业大学 化学与生命科学学院，吉林 长春 130012）

GAO Leng，HAN Xue，LINing

（School of Chemistry and Life Science,Changchun University of Technology,Changchun 130012,China）

工程师园地

超声波法提取刺五加苷B的条件研究

高 冷，韩 雪，李 宁

（长春工业大学 化学与生命科学学院，吉林 长春 130012）

本文采用超声波法提取刺五加苷B，使用正交实验的方法对提取条件进行优化，确定最佳提取条件为料液比为1：20，以水为浸提剂，时间60min,超声功率650W，此条件下刺五加苷的提取率为3.68%。

刺五加苷B；超声波法；高效液相色谱；正交实验

Study on the extraction process for syringin by technology of ultrasonic

GAO Leng，HAN Xue，LINing

（School of Chemistry and Life Science,Changchun University of Technology,Changchun 130012,China）

Abstract:This article used the ultrasonic extraction to syringin,using themethod of orthogonal experiment to optimize the extraction conditions.The determination optimum extraction condition for thematerial fluid ratio was 1∶20,water as extraction agent,time of extraction was 60min,ultrasonic power was 650W,under these conditions,the extraction rate of syingin was 3.68%.

Key words:syringin；ultrasonic；HPLC；orthogonal

刺五加（Acanthopanaxsenticosus)又名五加参，是五加科重要的药用植物之一，主要分布在中国东北部、俄罗斯远东地区及日本北海道等地，具有益气健脾，补肾安神之功效。刺五加中所含的刺五加苷具有7种型式，其中刺五加苷B相对含量最多[1]，也是刺五加中的主要药效成分之一[2]。

本文以超声波技术为基础，讨论了料液比，乙醇浓度，提取时间及超声功率对刺五加苷B提取率的影响，采用正交实验法确定其最佳的工艺条件，以促进刺五加的进一步开发和应用。

1 实验部分

1.1 色谱条件

色谱柱：AgilentC18（5μm，150mm×4.6mm）；柱温：25℃；流动相：甲醇 - 水（40：60）；流速：1.0mL·min-1；进样量：5μL；检测波长：270nm；保留时间：15min。

1.2 标准曲线的绘制[3]

准确称取刺五加苷B标准品5mg，置于50mL容量瓶中，加入甲醇溶解，定容。用移液管分别吸取对照液 0.0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL，置于 10mL容量瓶中，分别加入甲醇定容至刻度，摇匀，按1.1色谱条件分别进样，记录色谱图，测定峰面积。以进样量（X）为横坐标，峰面积值（Y）为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程：Y=246794X+2783.7（r2=0.9997）。

1.2样品的制备

取刺五加干燥茎皮，粉碎（过60目），超声提取，离心，浓缩，干燥得粗提取物。选取料液比，乙醇浓度，时间和超声功率作为单因素实验的考察对象，采用L9（34）正交实验进行优化。

1.3 样品的测定

称取0.010g提取物，甲醇溶解，50mL容量瓶中定容。取5μL注入液相色谱仪中，测得峰面积，按回归方程计算刺五加苷B的含量，并计算其提取率。

1.4 刺五加苷B的液相色谱图

图1、2分为刺五加标准品和提取物的液相色谱图。

由图1、2可以看出，提取物与标准品的保留时间相同，证明所提物质是刺五加苷B。

图1 刺五加苷B标准品的HPLC图谱Fig.1 HPLC chromatogram of Syringin standard sample

图2 刺五加提取物的HPLC图谱Fig.2 HPLC chromatogram ofextractive ofacanthopanax

2 结果与讨论

2.1 单因素对刺五加苷B提取率的影响

2.1.1 料液比对刺五加苷B提取率的影响（图3）

图3 料液比对提取率的影响Fig.3 Effectof fluid ratio on extraction rate

由图3可见，当料液比超过1∶15时，提取率的增加趋于平缓，说明刺五加苷已基本溶出，再增加料液比，不但提取率变化不大，还会给后续工作增加困难，所以料液比选择1∶15。

2.1.2 乙醇浓度对刺五加苷B提取率的影响（图4）

由图4可见，随着乙醇体积分数的增加，提取率呈明显的递减趋势，主要是由于超声波在水中的传递性较好，因此，选择水作为提取剂。

图4 乙醇浓度对提取率的影响Fig.4 Effectofethanol concentration on extraction rate

2.1.3 提取时间对刺五加苷B提取率的影响（图5）

图5 时间对提取率的影响Fig.5 Effectof time on extraction rate

由图5可见，提取时间增长，提取率呈递增趋势，但在60min后，递增的趋势减弱，主要是由于超声时间较短时，刺五加苷不易溶出，但时间过长提取率增加不明显，综合考虑选取60min为提取时间。2.1.4 超声功率对刺五加苷B提取率的影响（图6）

图6 功率对提取率的影响Fig.6 Effectof power on extraction rate

由图6可见，随着超声功率的增大，提取率明显增加，但当功率大于750W时，增加趋势较弱，主要是因为功率太小，细胞破碎不完全，功率太大会破坏刺五加苷B的结构，不利于提取，因此选择功率为750W。

2.2 提取条件的优化

根据单因素实验结论设计正交实验优化[4]提取条件，采用L9（34）的设计方法，分别讨论不同的料液比，乙醇浓度，提取时间及超声功率对刺五加苷B提取率的影响，确定最佳的提取条件。具体方案见表1。

表1 正交实验因素水平表Tab.1 Level table oforthogonal factor

表2 正交实验结果表Tab.2 Resultsoforthogonal test

结果表明，实验中影响刺五加苷B提取率的主次因素分别为乙醇浓度〉超声功率〉浸提时间〉料液比，最佳工艺条件为A3B1C2D1即料液比为1∶20，以水为浸提剂，时间60min,超声功率650W，此条件下刺五加苷的提取率为3.68%。

3 结论

本实验采用超声波法提取刺五加苷B，在单因素实验的基础上，采用正交实验对提取条件进行优化，得到最佳提取工艺为：料液比为1∶20，以水为浸提剂，时间60min,超声功率650W，此条件下刺五加苷B的提取率为3.68%。超声波法较其它常规方法具有提取时间短，温度低，提取率高的优点，它加速了提取的进程，可以避免高温对目标产物的破坏，达到更理想的提取效果。

［1］吴立军,郑健,姜宝虹,等.刺五加茎叶化学成分［J］.药学学报,2006,34（4）:294-296.

［2］李庆勇,付玉杰.超声波法提取刺五加中丁香苷的研究［J］.植物研究,2003,（2）:182-184.

［3］袁晔蓉,李强.刺五加苷的制备及其含量测定［J］.辽宁中医杂志,2007,34（6）:809-811.

［4］伍娟,沈平,沈永嘉.均匀设计优选微波辅助萃取刺五加中有效成分的研究［J］.中成药,2003,25（1）:11.

R284；O644.3

A

1002-1124（2011）01-0050-03

2010-11-09

高 冷（1963-），男，吉林省，副教授，硕士学位，主要从事天然产物研究。