一例猪肠道寄生虫和胞内劳森氏菌混合感染的诊治

王 斌 李旭廷 曹 良 黄 伟 龚 雪

（1 四川省畜牧科学研究院，四川省成都市 610066；2 四川鼎尖动物药业，四川省成都市 610100）

四川德阳某猪场发酵床饲养育肥猪200头，2011年1月10日，一栋圈内有十几头3月龄育肥猪出现食欲减退，拉黄色稀粪。次日粪便变为红褐色，内有大量脱落的肠粘膜，并有3头死亡。畜主采用了痢菌净注射液进行治疗，无明显效果，发病猪和死亡猪数量继续增加，病情蔓延至整栋猪舍，患猪出现采食量下降和腹泻，病猪拱背，皮肤弹性减退，日渐消瘦，虚弱无力，口、鼻、两耳轻度紫绀，截止2011年1月17日，死亡猪20余头。

1 解剖病变

笔者对发病和死亡猪只进行临床解剖，主要病变位于消化道：盲肠浆膜大量米粒到粟粒大小的白色结节，肠粘膜溃疡，局部淋巴结肿大。回肠、结肠肠管内有多个血凝块，肠壁增厚、肿胀，呈出血性肠炎病变。

2 临床诊断

该猪场猪只于40日龄进行了猪瘟疫苗的免疫，之后未进行驱虫和其它疫苗的免疫，根据临床症状、解剖病变及痢菌净治疗无效，初步诊断为肠道寄生虫和胞内劳森氏菌混合感染。

3 实验室诊断

3.1 寄生虫卵检查

采集肠道粪便，用盐水漂浮法收集虫卵，进行显微镜检。

3.2 螺旋体检查

取肠粘膜直接涂片，加一滴生理盐水，暗视野显微镜下观察。

3.3 猪瘟、蓝耳病抗体检查

耳缘静脉采集病猪血液并分离血清，用武汉科前的猪瘟、蓝耳病ELISA抗体检测试剂盒对分离的8头猪只的血清进行抗体效价测定，方法和判定标准参照试剂盒说明书。

3.4 胞内劳森氏菌PCR检测

采集两份粪便，参照Suh D K等[1]方法设计一对引物：

P15’-GCAGCACTTGCAAACAAT AAACT-3′

P25’-TTCTCCTTTCTCATGTCCC ATAA-3′

引物由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。粪便DNA的提取及PCR反应条件参照参考文献[1]，最后取PCR产物10 μL于1%琼脂糖凝胶中电泳，紫外灯下观察结果，并拍照。

4 结果与分析

4.1 寄生虫检查结果

显微镜视野下可见大量椭圆形的虫卵，卵内有多个胚细胞。最终结合病理变化和显微镜检结果确诊为猪结节虫感染。

4.2 螺旋体检查结果

镜检多个肠粘膜组织涂片，均未发现螺旋体。

4.3 抗体检查结果

根据猪瘟抗体判定标准，OD630值≥0.35，判为阳性，OD630值＜0.35，判定为阴性。结果显示8头猪的血清全部呈阴性。蓝耳病抗体判定标准，OD630值＞0.42判定为阳性，OD630值＜0.38判定为阴性，OD630值介于0.38到0.42之间判定为可疑。结果显示8头猪的血清有6份为阳性，2份可疑，且阳性样本OD630值为0.42的 2～3倍。

4.4 PCR检测胞内劳森氏菌结果

两份粪便病料均在210 bp处扩增出与预期大小相符的目的条带，见图1。

图1 胞内劳森氏菌特异性序列PCR检测结果

实验室检测结果表明，该猪场存在较为严重的寄生虫感染和胞内劳森氏菌感染，猪瘟疫苗免疫失败，且感染了猪蓝耳病病毒。

5 防治方案

根据诊断结果，采用以下治疗方案：对尚有食欲的猪在饲料中添加120 ppm泰乐菌素和4 ppm伊维菌素治疗，连用5天，停药1天，再继续用3天。无食欲猪肌肉注射泰乐菌素注射液和伊维菌素注射液，一日2次，连用3天，同时饮水中添加葡萄糖和盐。采用此方案治疗后，病情得以控制，除严重血痢患猪无法治愈死亡外，其余猪只逐渐康复。

6 讨论

发酵床养猪因环保、低能耗、低成本，在国内掀起了一股发酵床养猪的热潮，但在生产实践中，仍然存在一定的问题，尤其是在疾病的防治方面。田浪[2]等研究发现，微生态发酵床内含有多类致病性细菌，对猪的健康构成潜在威胁。文章中发病猪场采用发酵床养殖，但未进行驱虫，导致寄生虫在场内不断的循环传播，造成疾病暴发。腹泻是发酵床养猪中常见的疾病，也是较难控制的疾病。因为病猪的粪便含大量病原微生物，通过热发酵不能将其全部杀灭，且发病时无法进行彻底消毒，易造成病原微生物在场内的扩散。

解剖症状和显微镜检表明该猪场寄生虫感染严重，但单纯的寄生虫感染并不容易造成如此高的死亡率，通过临床和实验室诊断，表明胞内劳森氏菌是造成血痢的主要病因。在临床上该病很容易被误诊为猪痢疾，采用痢菌净治疗而导致治疗失败。胞内劳森氏菌在我国猪场临床感染率较高，常表现为慢性感染，猪群生长缓慢，饲料报酬下降。本病例为典型的急性感染，发病急、死亡率高，尽管通过药物治疗最后得以控制，但仍对猪场造成了严重损失。因此对于该病应重在预防，一旦发病，应及早采用敏感药物进行治疗。

从抗体检测结果可知该猪场的猪瘟疫苗免疫失败，存在猪瘟感染风险，且蓝耳病病毒抗体异常高，提示已经感染了蓝耳病病毒。

小型散养育肥猪场在我国养猪行业中占了很大比例，笔者近年走访了四川地区一些散养场，很多畜主缺乏疾病预防观念，饲养管理技术落后，导致疫病多发。笔者认为，散养猪场存栏数量少，疫病防控压力相对于规模猪场要小得多，但养殖户也必须掌握基本的饲养管理和防疫技术，只有建立养重于防、防重于治的理念，才能保障小规模饲养场的健康发展。

[1]Suh D K,Lym S K,Bae Y C,et al.Detection of Lawsonia intracellularis in diagnostic specimens by one-step PCR.J Vet Sci,2000,1 (1)：33-37.

[2]田浪,廖党金,万昭军，等.养猪发酵床中主要致病菌鉴定及致病性研究.当代畜牧， 2010（4） ：13-15.