尿液潜血的临床检验结果分析
2011-08-15王军伟
王军伟
尿液潜血检查是尿液检验中一个必不可少的项目,常用的检验方法有尿液分析仪潜血反应和尿液显微镜检查红细胞(镜检RBC)两种。近年来随着尿液分析仪的迅速普及,测量参数向着快速、简便、准确的方向发展,为临床提供了更好的诊断依据。笔者对284例门诊患者的随机尿样,用尿液分析仪潜血反应和尿液显微镜检查红细胞两种方法进行检验,并对两种方法的符合程度进行比较。
1 材料与方法
1.1 标本来源 随机选取本院门诊和住院患者尿液检查标本284例,其中男127例,女157例。每例标本均在15min内分别进行尿液化学分析仪检查和显微镜检查。
1.2 试剂和仪器 本检验室所用仪器为长春迪瑞实业有限公司H-500型尿液化学分析仪,所用试纸为长春万成生物电子工程有限公司11 d(100人份/瓶)。电镜显微镜为奥林巴斯CX21生物显微镜。
1.3 检验原理 尿液分析仪使用的是干化学试纸法,是根据多联试带上各模块与尿液成分发生化学反应后颜色变化的深浅来检测尿液中的某化学物质,如直接检测红细胞、白细胞的胞质内涵物,问接推断细胞的有无。尿液分析仪潜血反应原理是:血红蛋白(Hb)中亚铁血红素的过氧化物酶样活性可使过氧化物分解释放出新生态[O],后者氧化底物邻甲苯胺变成邻联甲苯胺发生上由黄色→草绿色→深蓝色的颜色变化。尿液显微镜检查则是通过显微镜的放大作用直接将细胞等有形成分直观真实地呈现在镜下,是对底物的真实反映。
1.4 检验方法
1.4.1 尿液分析仪检测 于混匀的10ml新鲜尿液中浸入尿试纸条1 s后取出,上仪器进行测定,自动打印结果。结果报告分为:-、+-、+、++、+++、++++。
1.4.2 显微镜检测 取尿液10ml于试管中,在水平离心机1500 r/min条件下有效离心5min。弃去上清液,留沉淀0.2ml。充分混匀后,取出约20 ul于载玻片上,加盖玻片(2.0 cm×2.0 cm),然后用较弱的光线以低倍镜观察全貌,以免漏掉量少而有意义的物体,再转用高倍镜辨认细胞,记录10个视野的红细胞数,并计算出平均值。结果报告为:个/高倍视野(HP)。
2 结果
在随机选取的284例检查标本中,尿液分析仪潜血反应呈阳性,显微镜检查有红细胞的有98例,镜检无红细胞的有14例;尿液分析仪潜血反应呈阴性,显微镜检查有红细胞的有8例,显微镜无红细胞的有164例。两种检验方法结果存在一定差异。
2.1 假阳性 即尿液分析仪潜血反应阳性,镜检阴性,其常见原因有:①血红蛋白(Hb)尿液分析仪潜血反应既能与完整的RBC发生阳性反应,也可与RBC溶解释放的Hb发生阳性反应,而显微镜只能检出尿中未溶解的RBC。健康人尿中Hb含量极微,定性为阴性。疾病时,尿中Hb有两个来源:一是发生血管内溶血,血浆Hb超过了结合珠蛋白的结合能力,游离Hb从尿中排出。另一个是尿路(尤其是上尿路)出血,RBC在高渗或(和)低渗时破坏Hb逸出。此时,尿液分析仪潜血反应阳性,但尿沉渣镜检不见RBC或仅见RBC碎片。②肌红蛋白(Mb)分子中也含有血红素基团,具有过氧化物酶活性。Mb主要存在于心肌和骨骼肌组织中,正常人尿中含量甚微,不能检出。当心肌或骨骼肌发生严重损伤时,血浆Mb增高,经肾脏排泄,使尿液Mb含量增高,故潜血反应呈阳性,镜检RBC为阴性[1]。③某些患者尿液中含有对热不稳定酶,也可使试剂块发生颜色改变,出现潜血反应阳性,镜检为阴性。④某些氧化性污染物,例如次氯酸盐会导致潜血反应假阳性。⑤菌尿,在泌尿系感染中,大多数革兰阴性菌和某些革兰阳性菌可能释放过氧化物酶活性物质或本身为了代谢的需要,在繁殖过程中,合成触酶、过氧化物酶和超氧化物歧化酶,这些物质和酶在干化学法测定尿红细胞时,都能使试带中的过氧化氢茴香素或过氧化氢稀枯分解出游离氧,可造成假阳性结果。镜检RBC为阴性。⑥长时间存放及高温实验证明,标本不新鲜,存放时间长或高温存放,使潜血反应的阳性率相对增高,而RBC镜检相应减少,测试结果极有可能出现假阳性。因此,建议尿液标本存放时间不得超过4 h[2]。⑦尿试纸条的超期使用或被污染以及不妥善保存和操作方法的不正确,均可造成测试结果假阳性。⑧尿液分析仪灵敏度过高(0.2 mg/dl出现++),“级差”范围太大(0.8~50 mg/dl级为+++),常会遇到仪器测试为++,而镜检测试红细胞为阴性,临床上又找不到任何导致血红蛋白尿原因的情况。
2.2 假阴性 即显微镜检查呈阳性,尿液分析仪潜血反应呈阴性,其常见原因有:尿液标本中存在大量的维生素C时,能竞争性夺取反应产生的氧,从而引起假阴性反应。高比重、高蛋白尿样降低了试剂潜血反应的灵敏度,使潜血反应呈假阴性。
2.3 离心对结果的影响 离心时,如速度过快,可使有形成分破坏;但速度过慢,当每毫升尿液中的RBC在5000个以下时,沉渣中可能找不到RBC,以至把隐匿型肾小球肾炎漏掉,因而在对检验结果有怀疑时,可用潜血反应证实。
3 讨论
综上所述,尿液标本中红细胞异常敏感,尿液分析仪检测有时可能与显微镜检测结果存在差异,我们要充分考虑影响检测结果各种因素,并结合临床症状进行系统分析。
采用两种不同检测方法的目的,在于区分尿隐血阳性患者的血尿原因。当红细胞通过肾小球基底膜裂孔时,会使其大小和形态或血红蛋白含量发生改变,如皱缩红细胞、大红细胞、胞质有葫芦状外展、内有细颗粒或胞膜破裂及部分胞质丢失畸形红细胞。我们将之定义为肾小球性红细胞,而由于肾小球以下部位和泌尿通路上的出血多因毛细血管破裂所致,红细胞形态可完全正常。
尿液分析仪法检测尿中红细胞异常敏感,有时可与镜检结果存在差异,要充分考虑影响测定结果因素,并结合临床进行分析,原则上尿液分析仪潜血反应阳性结果都应以显微镜法复检,这是做好尿液检验质量保证的重要环节和关键所在。对于尿液分析仪法测定的阴性结果与镜检不一致的也应复查,以确保测定结果的准确性,为临床诊断提供可靠的依据。
[1]何艳.尿液分析仪检测尿隐血与镜检红细胞对照.今日科技,2000,10:36.
[2]边卫萍.FA-100尿液分析仪检测潜血与血尿测定的影响因素探讨.Proceeding0TClinicalMedicine,2003,12(6):450.