不同激素水平对文心兰原球茎脱分化的影响1）

尤海波

（黑龙江省农科院园艺分院，哈尔滨 150069）

文心兰属兰科文心兰属（Oncidium），花形奇特似舞女，又名跳舞兰、金粉蝶兰、瘤瓣兰，属复茎类洋兰，附生或地生［1］，原产墨西哥、西印度群岛、巴西等地［1－7］。可作为盆花和切花，同蝴蝶兰及大花蕙兰一样，作为主要的栽培品种，市场需求量越来越大［2－5］。文心兰传统的繁殖方式为分株繁殖，繁殖系数较低，容易受到病毒感染，造成品质退化，应用植物组织培养技术进行快繁利于保持种苗特性，有效控制病害，因此，探索文心兰组织培养快速繁殖方式具有重要意义。

细胞分裂素类激素在试管苗增殖中起关键作用。本试验以诱导出的文心兰原本球茎为外植体，采用3种常用的细胞分裂素考察文心兰原球茎分化效果，选出适于文心兰原球茎分化培养基，同时也为进一步研究3种细胞分裂素的作用机理奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

黑龙江省农科院科技园区栽培的宽唇文心兰品种（Oncidium ）诱导的原球茎；6－BA（6－苄基腺嘌呤）、KT（激动素）、Ad（腺嘌呤硫酸盐）、NAA（α－萘乙酸）等购于中国上海惠兴生化试剂公司。

1.2 培养基

以 MS为基本培养基，糖30g／L、琼脂粉6g／L、pH 5.6，各种激素配比见表1。

1.3 试验设计

3种细胞分裂素分别采用单因素随机区组设计。

1.4 接种方法

将文心兰原球茎置于超净工作台上，用手术刀分成大小均匀的小块，接种于上述不同培养基，每处理10瓶，每瓶5块原球茎。观察记录接种后新芽产生的时间、生长状况及35d的分化情况。

1.5 培养条件

培养室温度（25±1）℃、光强2000～1500lx、光照时间12h／d。

表1 各处理培养基中激素的组合及浓度 mg·L－1

2 结果与分析

2.1 不同浓度6－BA对文心兰原球茎分化试管苗的影响

表2 不同浓度6－BA对文心兰新芽产生的时间及分化率的影响

不同浓度6－BA对文心兰原球茎分化的影响情况见表2。由表2可以看出，当NAA浓度一定时，在6－BA低浓度时没有原球茎（Protocorm Like Body，PLB）形成。6－BA浓度在0.5～3.0mg／L范围内，随着浓度的逐渐增加，新芽形成时间逐渐缩短，且试管苗的分化率逐渐提高；当6－BA浓度为2.0mg／L，NAA浓度0.1mg／L时，试管苗的分化率较高，分化系数达7.27，同时在苗与培养基接触面附近有少量原球茎形成；当6－BA 浓度为2.0mg／L，NAA 浓度0.2mg／L时，试管苗的分化率最高，分化系数达7.27，在苗与培养基接触面附近没有原球茎形成；但当6－BA浓度超过3.0mg／L时，分化系数下降，而原球茎形成量却增加。这说明浓度适中的6－BA对BA对增殖率影响达到了极显著差异的水平。6－BA浓度在2.0mg／L，NAA浓度在0.2水平下的培养基较适合试管苗的增殖。

2.2 不同浓度KT对文心兰试管苗增殖的影响

由表3可以看出，KT浓度在0.5～2.0mg／L的处理中没有新芽产生，而当KT浓度为3.0～4.0mg／L时有丛生芽形成，但形成丛生芽的时间在不同处理之间差异不大，同时，在NAA为0.2mg／L的情况下，KT无论在高浓度或低浓度时均有原球茎产生。由此可见，KT对文心兰的原球茎有增殖作用，对原球茎分化成苗作用相对较弱。

表3 不同浓度KT对文心兰原球茎分化的时间及分化率的影响

3 结论

以MS培养基为基本培养基，用2种不同的细胞分裂素6－BA、KT和不同浓度生长素NAA组配对文心兰原球茎分化影响的研究结果表明，2种激素对文心兰试管苗的影响差异较大。用一定浓度（2.0mg／L）的6－BA对文心兰原球茎进行分化不仅增殖率高，而且苗的状况好，没有原球茎的增殖，比较适合文心兰原球茎分化的培养基为 MS＋6－BA 2.0mg／L＋NAA 0.2。

［1］Santana G E，Chaparro K.Clonal Progpgation of Oncidium Through the Culture of Floral buds［J］.Acculture，1997，482：315－320.

［2］Kerbelly G B.1984.Plant regeneration of Oncidium varicosum by means of root tip culture.Plant Cell Reports.3（1）21－29.

［3］陈兴贻.文心兰组织培养［J］.植物生理学通讯，1989（2）：49.

［4］陈菁英，蓝贺胜，陈雄鹰.兰花组织培养与快速繁殖技术［M］.北京：中国农业出版社，2004：107－115.

［5］崔广荣，刘云兵，何玉华，等.不同细胞分裂素对文心兰试管苗增殖的影响［J］.特产研究，2005（2）：37－40.

［6］朱根发，王怀宇，陈明莉，等.文心兰脱毒快速繁殖技术研究［J］.广东农业科学，1997（4）：27－28.