血小板源性生长因子-BB在肺癌中的表达和意义

陈基善 周秦

(永州职业技术学院附属医院病理科 湖南永州 425000)

肺癌是最常见的肺原发性恶性肿瘤,占全世界癌症死因的首位,近年来我国肺癌的发病率和病死率均迅速上升。肺癌早期症状不明显,往往错过最佳的诊断和治疗时机,因而提高诊断水平是延长患者存活期的关键。血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)是重要的内皮生成因子,具有促细胞分裂增殖、细胞趋化,以及血管收缩等生物效应,是决定肿瘤大小、转移、复发和预后的重要因素[1]。笔者对我院肺癌患者及肺部良性病变患者PDGF-BB的表达水平进行检测,以探讨其在肺癌发病机制中的作用。

1 资料与方法

1.1 一般资料

肺癌患者30例,均为我院2006年12月至2010年6月收治的住院患者,经胸片、胸CT、痰脱落细胞学、纤维支气管镜活检或胸腔积液脱落细胞学检查确诊,无放化疗史,剔除病理诊断不明确者、高血压病和糖尿病患者。其中男性25例,女性5例,年龄45～85岁,平均(60.7±9.4)岁。组织学分型:鳞癌11例,腺癌10例,小细胞癌9例。按1997年国际抗癌联盟(UICC)非小细胞肺癌分期标准进行分期:Ⅱ期4例、Ⅲ期12例、Ⅳ期14例。肺部良性病变患者30例,既往无心、肝、肾、肺等重要脏器疾病。家族中无肿瘤病史。其中男性24例,女性6例,年龄50～72岁,平均(59.2±8.5)岁。肺炎16例、支气管扩张症8例、慢性支气管炎6例。2组患者在年龄、性别方面无统计学方面无统计学意义,具有可比性,P>0.05。

1.2 方法

1.2.1 血清PDGF-BB浓度的测定 清晨取2组患者的空腹静脉血3mL,在不加入抗凝剂的情况下迅速离心10min分离出血清,置-70℃冷藏贮存待检。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测2组患者的血清PDGF-BB,PDGF-BB定量ELISA试剂盒购自上海森雄科技实业有限公司,操作步骤严格按照说明书进行,绘制标准曲线。

表1 2组患者血清及组织中PDGF-BB检测比较(±s)

表1 2组患者血清及组织中PDGF-BB检测比较(±s)

注:观察组与对照组相比,*P<0.05

?

1.2.2 免疫组织化学染色 免疫组织化学(SABC法)检测PDGF-BB链的表达水平。麦默通穿刺活检标本和术后切除标本经10%多聚甲醛固定后,石蜡包埋,制成4μm切片,将固定切片置于60℃恒温箱中烘烤30min,切片常规脱蜡水化,3%双氧水即用型,室温10min灭活内源性酶;柠檬酸缓冲液进行高温高压抗原修复,山羊血清封闭非特异性抗原,滴加一抗湿盒内4℃过夜,依次滴加山羊抗兔IgG-HRP多聚体,苏木素复染,脱水、中性树胶封固。以用0.1mol/L PBS代替一抗作为阴性对照,选已知阳性的切片作为阳性对照。兔抗人PDGF-BB抗体和SABC免疫组化试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司,仪器为Elecys 2010全自动电化学发光免疫分析仪。

1.3 阳性结果判定方法

PDGF-BB的表达先在在X400倍视野下每张切片随机观察10个视野,根据细胞染色程度评分:染色深度以多数细胞为准,无着色为0,浅着色为1,深着色为2;再为切片中阳性着色范围评分:无着色为0,着色<1/3为1,着色＞1/3为2,弥漫着色为3,最后将上述2项得分相加,得分≥3为阳性。

1.4 统计学方法

用SPSS 11.0统计软件。记数资料采用均数±标准差表示,组间计量资料采用t检验,P<0.05差异有统计学意义。

2 结果

观察组患者的血清PDGF-BB水平为(378.56±34.26)pg/mL、PDGF-BB链阳性表达率分别为66.7%(20/30),均显著高于对照组,P<0.05,见表1。

3 讨论

肺癌为肺部原发性恶性肿瘤,是最常见的恶性肿瘤之一,死亡率极高,且其发病率和死亡率均呈上升趋势。早期肺癌不易早发现,对该病如能做到早期发现、早期诊断、早期治疗,预后效果很好[2]。PDGF主要由血小板、部分肿瘤细胞、成纤维细胞、平滑肌细胞等产生,与肿瘤血管生成、肿瘤转移密切相关。正常组织内PDGF的表达受到严格的调控。本研究结果表明肺癌患者血清和组织中的PDGF-BB的水平均显著高于肺部良性病变组,P<0.05。这说明PDGF-BB参与了肺癌血管的形成,有利于形成有功能的新生血管系统,从而间接促进了肿瘤的生长。其在肺癌组织中的高表达,说明PDGF能够促进结缔组织间质细胞生长,细胞分裂增殖,诱导细胞产生V型胶原,调节Ⅲ型及Ⅳ型胶原的合成,其在加速肿瘤细胞增殖,促进肿瘤的侵袭与转移。此外,PDGF抑制癌细胞凋亡和使5-Fu抗肿瘤敏感性降低,并与其受体结合可提高细胞外机质(ECM)的降解[3]。综上所述,随着肺癌发病率的不断上升,只有不断提高肺癌的诊断水平才能尽量使患者得到有效的治疗。PDGF-BB在肺癌的发生发展中可能起着重要作用,在肿瘤的诊断和预后判断中起作用,其表达的检测有一定的临床指导意义。但具体作用机制有待进一步探讨。

[1]黄竹英,聂新民.血小板源性生长因子在肝细胞肝癌中的表达[J].现代医药卫生,2007,23(21):3167～3169.

[2]秦建文,周静敏,马淑萍.非小细胞肺癌血清VEGF和PDGF测定的临床意义[J].天津医药,2007,35(12):897～899.

[3]周静敏,马淑萍,秦建文,等.肺癌患者血清细胞生长因子及受体联合检测的临床意义[J].中国肿瘤临床,2006,33(18):1054～1060.