参萸清眩膏薄层色谱鉴别

2011-07-06左艳敏吴振英王筱婧

大家健康(学术版) 2011年14期

左艳敏吴振英王筱婧

参萸清眩膏为本院制剂，是由党参、熟地黄、枸杞子、山茱萸等100多味中药加蜂蜜研制而成，主要治疗美尼尔氏病、美尼尔氏综合症以及多种原因引起的眩晕症。本实验采用薄层色谱法，对参萸清眩膏中的主要组成药物山茱萸、肉苁蓉、枸杞子、党参等进行了定性鉴别，为其质量控制提供依据。现将实验结果报道如下。

仪器与试剂

JA2003N型电子天平(上海精密科学仪器有限公司天平仪器厂);HG71-A型电子烘干箱(北京试验设备厂);W-105微量进样器(上海医用激光仪器厂);ZF-2型三用紫外线分析仪(上海安亭电子仪器厂);薄层硅胶 G 板(100 mm ×200 mm，厚度0．20～0．25 mm(青岛海洋化工厂);参萸清眩膏(自制:批号20110409);对照药材山茱萸、肉苁蓉、枸杞子、党参(中国药品生物制品检定所);所用化学试剂均为分析纯。

方法与结果

1．山茱萸的鉴别取参萸清眩膏20 ml，加乙酸乙酯30 ml，振摇提取并超声处理30分钟，滤过或离心分离，取乙酸乙酯层，蒸干，残渣加无水乙醇1 ml溶解，作为供试品溶液。另精密称取山茱萸对照药材2 g，剪碎，加乙酸乙酯20 ml，振摇提取并超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，加无水乙醇1 ml溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法［1］实验，吸取上述两种溶液各8μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(20∶4∶0．5)为展开剂，展开，取出，晾干。喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点，置紫外光灯(365 nm)下检视，显橙黄色荧光斑点，如图1所示。

2．肉苁蓉的鉴别

取参萸清眩膏20 ml，加乙醇20～30 ml，加热回流20分钟，滤过，滤液加盐酸2 ml，再加热回流30分钟，取该液浓缩至5 ml，加水10 ml稀释，用石油醚20 ml，充分振摇提取，分取提取液(必要时离心分取)，蒸干，残渣加乙醇1 ml溶解，作为供试品溶液。另取肉苁蓉对照药材2 g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法实验［1］，取供试品溶液 15μl，对照药材溶液10μl，分别点于同一硅胶G 板上，以氯仿-甲醇(40∶1)为展开剂，展开，取出，晾干。置紫外光灯下(365 nm)检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上(距离点样点约25 mm)，显相同颜色的荧光斑点(淡绿色);喷以磷钼酸试液，在110℃加热后，在与对照药材色谱相应位置上(距离点样点约120 mm和140 mm)，呈现黑绿色斑点，如图2所示。

3．枸杞子的鉴别

取参萸清眩膏20 ml，加水20 ml，振摇稀释，用乙醚20 ml充分振摇提取，离心分取乙醚层，挥干，残渣用乙酸乙酯1 ml溶解，作为供试品溶液。另取枸杞子对照药材2 g，剪碎，用乙醚20 ml充分振摇提取，滤过，滤液挥干，残渣用乙酸乙酯1 ml溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法实验［1］，取供试品溶液及对照药材溶液各10 μl，分别点于同一硅胶G板上，以乙酸乙酯-氯仿-甲酸(3∶2∶1)为展开剂，展开，取出，晾干。置紫外光灯下(365 nm)检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上显樱桃红色的荧光斑点，如图3所示。

4．党参的鉴别

取参萸清眩膏20 ml，温热后加水20 ml稀释，加正己烷20 ml，充分振摇提取1小时，或超声处理20分钟，分取正己烷，挥干，加甲醇0．5 ml溶解，作为供试品溶液。另取党参对照药材2 g，剪碎，加正己烷15 ml，振摇提取1小时，或超声处理20分钟，滤过，滤液挥干，加甲醇0．5 ml溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法实验［1］，取两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-氯仿-甲酸(3∶2∶1)为展开剂，展开，取出，晾干。置紫外光灯(365 nm)下检视，供试品色谱中在与对照药材色谱相应位置上显淡黄色荧光斑点，如图4所示。

讨论

参萸清眩膏为煎膏剂。在鉴别方法上，除各药之间的相互干扰外，此剂型中含有大量蜂蜜干扰较大，故进行薄层实验比较困难。关键问题是提取剂的选择，要求即能提取有关成分，又便于分离出来。

中国药典2000年版一部中关于枸杞子药材的薄层鉴别法［2］为水煮后用乙酸乙酯提取，浓缩后作为供试品溶液，照此法，本制剂因系煎膏剂而致使提取过程中难以实现分离，仅可获得少量供试品溶液，经点样，展开后无明显的色谱特征，无法与对照药材色谱比较。以乙醇作为提取剂，结果供试品溶液和对照药材溶液均未显色，置紫外光灯下也无荧光。以氯仿为提取剂，检品与氯仿提取后分离较困难，同样醋酸乙酯溶解后展开，结果检品溶液色谱无明显特征。对照药材溶液色谱中只显不规则的黄色斑点，无法比较。改用乙醚为提取剂后，供试品溶液的色谱中，在与对照药材溶液色谱的相应位置上显相同颜色的斑点。其斑点特征为:在自然光下为两个相同的乳白色斑点，在自然光透视时为两个相同的深灰色斑点，在紫外灯光下检视为两个相同的樱桃红色斑点。两者的色谱特征完全一致，Rf值相近分别为(1．00:0．996)，且阴性对照无干扰。

参萸清眩膏为复方制剂，成分较为复杂，用薄层色谱法对方中主要药物进行定性鉴别，斑点清晰，准确可靠，结果重现性良好，可为参萸清眩膏制定质量标准提供依据。