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不同宫颈病变组织中C-MYC基因与P16蛋白的表达

2011-06-20武海英史惠蓉

郑州大学学报(医学版) 2011年5期
关键词:鳞状分化宫颈

武海英,史惠蓉

1)郑州大学第一附属医院妇产科郑州450052 2)河南省人民医院妇产科郑州450003

宫颈癌是女性最常见的恶性肿瘤之一。高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染与宫颈癌发病密切相关,但最终只有极少部分发展为宫颈癌。找到宫颈癌发生发展的分子标志物是早期诊断宫颈上皮内瘤变(CIN)和宫颈癌的关键。目前认为,P16蛋白作为肿瘤标志物在CIN及宫颈癌中表达异常,可作为宫颈癌早期病变的标志物之一[1]。有文献[2]证实 CMYC基因及其产物在宫颈癌发生发展中的作用与HPV关系密切。作者分别检测了各级宫颈病变组织中C-MYC基因和P16蛋白的表达,探讨二者在宫颈癌发生发展中的作用及临床意义。

1 材料与方法

1.1 材料 选择2009年6月至2010年6月在郑州大学第一附属医院门诊及住院部收治的不同程度CIN及宫颈癌患者,年龄22~65(44.2±9.3)岁。所有标本均经病理诊断证实,其中慢性宫颈炎40例,CINⅠ级108例,CINⅡ级50例,CINⅢ级35例,浸润性宫颈鳞状细胞癌38例,腺癌14例。宫颈癌中高分化12例,中分化12例,低分化28例;FIGO分期:Ⅰ期18例,Ⅱ期23例,Ⅲ期以上11例;术后有淋巴结转移者10例。

1.2 宫颈各级病变组织中C-MYC基因和P16蛋白表达的检测 所有标本均经体积分数10%甲醛溶液固定,常规石蜡包埋,4 μm厚连续切片备用。采用荧光原位杂交技术(FISH)检测C-MYC基因,C-MYC探针和检测试剂盒由北京金菩嘉生物有限公司提供,参照FISH检测试剂盒说明书步骤操作。结果判断参照文献[2]。

采用免疫组化SP方法检测P16蛋白在宫颈各级病变组织中的表达。鼠抗人P16单克隆抗体(使用时按1-50稀释)、SP试剂盒及DAB显色试剂购于福州迈新公司,具体操作按说明书进行。以PBS代替一抗作阴性对照,用已知阳性表达的宫颈癌切片作阳性对照。P16蛋白阳性表达为胞核和胞质着棕黄色。P16阳性判断参考Negri等[1]的标准。

1.3 统计学处理 采用SPSS 11.5分析数据。各组间C-MYC基因和P16蛋白阳性表达率的比较采用校正χ2检验或确切概率法,检验水准α=0.05。

2 结果

不同宫颈病变中C-MYC基因及P16蛋白的表达见图1和表1。两两比较结果显示,除CINⅢ级与宫颈鳞状细胞癌(P=0.198)、宫颈鳞状细胞癌与宫颈腺癌(P=1.000)之间C-MYC基因阳性表达率的差异无统计学意义外,其余任两者之间比较差异均有统计学意义;除CINⅢ级与宫颈鳞状细胞癌(P=0.389)、宫颈鳞状细胞癌与宫颈腺癌(P=0.870)之间P16蛋白阳性表达率的差异无统计学意义外,其余任两者之间比较差异均有统计学意义。C-MYC基因及P16蛋白的表达与宫颈癌各临床病理特征的关系见表2。

表1 不同宫颈病变中C-MYC基因与P16蛋白阳性表达率的比较 例(%)

表2 C-MYC基因和P16蛋白的表达与宫颈癌临床病理特征的关系

图1 不同宫颈病变中C-MYC基因和P16蛋白的表达

3 讨论

C-MYC基因定位于染色体8q24,编码蛋白由49个氨基酸残基组成,具有调节细胞增殖分化和促进细胞凋亡的作用。C-MYC基因及其产物在宫颈癌发生发展中的作用与HPV关系密切[2]。在正常生理条件下,pRb与E2F细胞因子结合,使游离E2F数量减少,而HPV病毒蛋白E7在细胞内结合pRb,使游离E2F增多,导致C-MYC活性增加,使大量G0细胞提前进入细胞周期,导致不典型增生、癌变的发生[3-4]。Wu[5]检测不同病理分型癌组织,发现 CMYC基因在分化差的癌组织较易扩增和过度表达,且较易复发。Riou等[6]提示C-MYC过度表达更多出现在恶性程度较高的宫颈癌中。Iwasaka等[7]研究证实,C-MYC过度表达的患者,24个月内复发率明显高于无过度表达的患者。该研究结果表明,随宫颈病变级别的升高,C-MYC基因的阳性表达率升高,且C-MYC基因与宫颈癌的分化程度有关,说明C-MYC在宫颈癌的发生发展中起着非常重要的作用,有可能作为判断预后的一个重要指标。

p16基因定位于9p21,又称多肿瘤抑制基因,是细胞周期依赖酶抑制因子,在多数肿瘤中呈低表达,但有研究[8-9]表明p16在CIN及宫颈癌中表现为过表达。对其过表达的机制目前主要解释为:①由于Rb基因的失活造成的。在正常宫颈组织中,p16与pRb之间通过负调节维持着两者的平衡。宫颈发生癌变时,可导致功能性pRb蛋白的缺失,其对p16的抑制作用解除而导致p16升高[10]。②p16表达增高可能与HPV感染有关。HPV感染机体并整合到宿主DNA后,引起E6、E7过表达,E7基因编码蛋白可与pRb结合并抑制其活性,从而使P16蛋白表达升高[11]。因此有学者[9]认为 p16可作为间接测定宫颈癌早期病变及HPV整合的指标。该研究结果表明,随宫颈病变级别的升高,P16阳性率呈逐渐升高的趋势,但P16的表达与宫颈癌的分化程度、病理分期及有无淋巴结转移无关,提示P16的高表达是宫颈正常组织-CIN-宫颈癌发生过程中的早期事件。

综上所述,P16可作为宫颈癌的早期预测指标,而C-MYC基因则与宫颈癌的发生发展关系密切。

[1]Negri G,Bellisano G,Zannoni GF,et al.p16 ink4a and HPVL1 immunohistochemistry is helpful for estimating the behavior of low grade dysplastic lesions of the cervix uteri[J].Am J Surg Pathol,2008,32(11):1715

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[5]Wu H.The expression c-myc protein in uterine cervical cancer:a possible prognostic indicator[J].Nihon Sanka Fujinka Gakkai Zasshi,1996,48(7):515

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